1 Ловать Максим Львович, ст.преп. каф. физиологии человека и животных биологического ф-та МГУ им. М.В. Ломоносова Физиология возбудимых клеток. Мембранный потенциал

2 Типы возбудимых клеток Нейроны Мышечные клетки Секреторные клетки Рецепторные клетки

3 Строение животной клетки

4 Особенности строения нейрона

5 Виды нейронов А веретенообразный (кишечнополостные); Б псевдоуниполярный (сенсорный нейрон позвоночных); В мультиполярный (позвоночные); Г типичный нейрон центральной нервной системы беспозвоночных Срез нервного волокна

6 Формирование трансмембранного потенциала А. в чашке Петри KCl K+ Cl - Градиент концентрации Градиент заряда равновесие

7 Рассчет заряда на мембране Равновесный потенциал для какого-либо иона Х можно рассчитать из уравнения, полученного в 1888 году немецким физическим химиком Walter Nernst на основании принципов термодинамики. Равновесный потенциал для какого-либо иона Х можно рассчитать из уравнения, полученного в 1888 году немецким физическим химиком Walter Nernst на основании принципов термодинамики. Где Где R – газовая постоянная, Т – температура (по Кельвину), z – валентность иона, F – константа Фарадея, [Х]о и [Х]i – концентрации ионов по разные стороны мембраны. Уравнение Нернста можно использовать для расчета равновесного потенциала любого иона по обе стороны мембраны, проницаемой для данного иона. Уравнение Нернста можно использовать для расчета равновесного потенциала любого иона по обе стороны мембраны, проницаемой для данного иона. Ек=-85 мв при К+ соотношении 1\30

8 Б. мицелла – синтетический прообраз клетки К+ А- _ + К+

9 Мембрана живой клетки К+ Na+ Са ++

10 Равновесные потенциалы(Е) Движущая сила (V- Е) K+K+ -95 K-каналы Na+ +67 Na-каналы Ca Ca-каналы Cl Cl-каналы

11 Мембрана живой клетки полупроницаема -61 К+ Na+ = 0,023 рК Са ++ р Са ++ = 0 Cl-

12 Проницаемость обеспечена ионные каналами мембраны каналов на квадратный микрометр мембраны Центральная водная пора Центральная водная пора Устья канала: селективный фильтр Устья канала: селективный фильтр Ворота: проницаемость может меняться! Ворота: проницаемость может меняться!

13 Создание градиента концентрации : 1. Na-K АТФ-аза 2. ионные обменники Транспорт 3 Na/2K за счет энергии 1 АТФ (расход до 1/2 энергии нейрона) а.Симпорт б.Антипорт

14 Изменения мембранного потенциала покоя 1. Деполяризация- уменьшение 1. Деполяризация- уменьшение ( ее скорость определяется постоянной времени ( ее скорость определяется постоянной времени ( m =R m C m )) 2. Гиперполяризация- увеличение 2. Гиперполяризация- увеличение 3. Реполяризация- возвращение к 3. Реполяризация- возвращение к исходному уровню исходному уровню 0 МПП Время Деполяризация Реполяризация Гиперполяризация 1 2

15 Внутриклеточная регистрация мембранного потенциала покоя Внутриклеточная микроэлектродная регистрация Величина МПП в возбудимых клетках – Величина МПП в возбудимых клетках – от -60 до -90 мВ А Б Введение электрода Мембранный потенциал покоя Время А Б

16 Потенциал действия Фаза деполяризации Фаза реполяризации Раздражающий импульс

17 Вызывается сверхпороговым раздражением Вызывается сверхпороговым раздражением Амплитуда не зависит от силы раздражения Амплитуда не зависит от силы раздражения Распространяется по всей мембране не затухая Распространяется по всей мембране не затухая Связан с увеличением ионной проницаемости мембраны (открытием ионных каналов) Связан с увеличением ионной проницаемости мембраны (открытием ионных каналов) Не суммируется Не суммируется Свойства потенциала действия

18 Временной ход ионных токов во время потенциала действия Na + K+K+

19 Фармакологическое разделение ионных токов ядами контроль Калиевый ток Натриевый ток Выводы Входящий ток переносится ионами натрия, а выходящий – ионами калия. Натриевый ток развивается быстро, а калиевый – медленно. Натриевый ток быстро уменьшается (инактивация), а калиевый - нет

20 Фазы потенциала действия 1- порог (около 50 мв, ток Na>K) 2- деполяризация 0,5 мс (вход Na) 3- овершут (перелет) 4- реполяризация 0,5- 1 мс (блок Na, активация К токов) 5-следовая гиперполяризация, до 3 мс (ток К) период рефрактерности (блок Na, активация К токов) Амплитуда ПД нейрона – около 110 мв

21 Исследование отдельного канала 1. Возможность исследовать отдельный канал 2. Возможность менять потенциал на мембране 3. Возможность менять ионный состав и добавлять любые исследуемые вещества с обоих сторон мембраны Метод локальной фиксации потенциала «пэтч-кламп»

22 Нобелевская премия 1991 года в области физиологии и медицины Эрвин Нейер и Берт Сакманн «за открытия в области работы одиночных ионных каналов»

23 Канал имеет воротный механизм 1- покой 2-деполяризация 3- рефрактерность Динамика открытия ворот 123 За один ПД входит в клетку ионов Na+ (рост внутриклеточной концентрации 0,7%)

24 Молекулярные механизмы активации и инактивации у большинства каналов общие

25 Работа Na+ канала

26 Белковая структура канала: 4 домена из 6 сегментов каждый Структура Cl - канала S4-воротный механизм, S5 и S6 – пора, между 3 и 4 доменом – «шар на цепи»

27 Рефрактерность - Рефрактерность - снижение способности клетки отвечать на раздражение в результате временной инактивации натриевых каналов Абсолютная рефрактерность Относительная рефрактерность Абсолютная рефрактерность Генерация ПД невозможна Вызвана инактивацией большинства Na каналов Относительная рефрактерность Генерация ПД возможна при увеличении интенсивности раздражителя Связана с тем, что некоторая часть Na каналов все еще инактивирована + с усилением тока К

28 Распространение потенциала действия по волокну Тело ДендритыАксон Увеличение диаметра волокна повышает скорость проводения: Постоянная длины волокна (от 0,1 до 1 см): ток Rm Ri λ =1/2 (d*Rm/Ri)

29 Миелинизированные волокна Эстафетный (до 40 м/с) и сальтаторный (до 120 м/с) механизмы распространения возбуждения

30 Скорость проводения ПД по разным типам волокон ТИП Функции волокна (выборочно) Средний диаметр, мкм Средняя скорость провод., м/с А αДвигательные, чувствительные волокна скелетных мышц (70– 120) А βКожные сенсоры прикосновения и давления 850 (30–70) А γДвигательные волокна мышечных веретен 520 (15–30) А δКожные афференты температуры и боли<315 (12–30) ВСимпатические преганглионарные волокна 37 (3–15) СКожные афференты боли 11 (0,5–2)

31 Виды регистрации ПД Внутриклеточная монополярная Внеклеточная биполярная

32 Использование флуоресцентных красителей

33