«Способы доклинической оценки влияния гомеопатических средств на антенатальное созревание и постнатальное развитие плода» Министерство образования и науки Российской Федерации Министерство здравоохранения и социального развития Российской Федерации Башкирский государственный медицинский университет Бугаева Любовь Ивановна, д.б.н., профессор, зам. директора НИИ фармакологии ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Волгоград г. Уфа, 2012 г.
Характерные эффекты гомеопатических препаратов Аномальная (немонотонная, нелинейная, полимодальная) зависимость «доза-эффект», пики активности в определенных дозах разделяются так называемой «мертвой зоной» 2. Наличие кинетических парадоксов на уровне «лиганд-рецептор» 3. «Расслоение» свойств БАВ по мере уменьшение его концентрации, при котором сохраняется активность, но исчезают побочные эффекты
3 Гомеопатические средства сейчас пользуются большой популярностью в моно- и комплексной терапии поскольку позволяют лечить безвредными лекарствами беременных женщин, кормящих матерей, новорожденных и грудных детей, аллергиков, ослабленных больных - всех тех, у кого повышен риск возникновения побочных эффектов при применении химических лекарств.
4 Периоды зрелости крыс Антенатальное созревание (21-22 дня) Антенатальное созревание (21-22 дня) Постнатальное созревание: Постнатальное созревание: - молочный - инфантильный период (с 1 по 21 дни) - молочный - инфантильный период (с 1 по 21 дни) - Ювенильный: - ранний (20 – 28 дни) - поздний (28 – 45 дни) - Пубертатный период (от 1,5 -3 мес) - взрослые (с 3 х мес.) - зрелые (от 6 -8 мес.) - старые (от 8-8,5 мес. )
5 Этапы доклинической оценки влияния на плод и потомство 1.Исследование эмбриофетального действия 2.Изучение влияния на постнатальное созревание при введении лактирующим самкам 3.Изучение влияния на органы, системы и физическое развитие в хроническом эксперименте. Степень доказательности действия, или отсутствия действия испытуемого средства оценивается по данным достаточного контроля (интактного и, получавшего дистиллированную воду в идентичных опыту объемах), содержащегося в аналогичных опыту условиях. Степень доказательности действия, или отсутствия действия испытуемого средства оценивается по данным достаточного контроля (интактного и, получавшего дистиллированную воду в идентичных опыту объемах), содержащегося в аналогичных опыту условиях.
6 1 этап: Исследование эмбриофетального действия (препарат вводится беременным самкам 20 дней) 1.1. Регистрируемое в антенатальный период: У беременных самок подсчитывают: Количество желтых тел беременности; Количество желтых тел беременности; Количество зачатий; Количество зачатий; Количество плодов (живых и мертвых) Количество плодов (живых и мертвых) Гибель до имплантации и после имплантации. Гибель до имплантации и после имплантации. У развившихся плодов определяют: У развившихся плодов определяют: Пол, массу и краниокаудальные размеры Пол, массу и краниокаудальные размеры Наличие уродств и аномалий развития; Наличие уродств и аномалий развития; Подсчитывают количество геморрагий подкожных и внутренних; Подсчитывают количество геморрагий подкожных и внутренних; Оценивают процессы оссификации и развития внутренних органов Оценивают процессы оссификации и развития внутренних органов-
Влияние тенотена детского (внутрижелудочно,1-19 дни беременности) на прирост массы тела беременных крыс (г., М±m). 7
Влияние тенотена детского (внутрижелудочно, 1-19 дни беременности) на процессы зачатия самок и эмбрионального развития плодов (М±m) 8
9 1 этап: Исследование эмбриофетального действия (препарат вводится беременным самкам 20 дней) 1.2: Регистрируемое в постнатальный период: У родившегося потомства определяют: отлипание ушной раковины, глаз, покрытие шерстным покровом, зрачковый рефлекс, мышечную силу, опущение яичек в мошонку, открытие вагины и пр.), а также исследуются поведенческая активность (тест «открытое поле»), способность к обучению и памяти (тест «УРПИ»). отлипание ушной раковины, глаз, покрытие шерстным покровом, зрачковый рефлекс, мышечную силу, опущение яичек в мошонку, открытие вагины и пр.), а также исследуются поведенческая активность (тест «открытое поле»), способность к обучению и памяти (тест «УРПИ»).
Масса тела крысят в постнатальный период развития 10
Физическое развитие и скорость созревания сенсорно- двигательных рефлексов крысят в постнатальном периоде 11
Поведение 30-ти дневных крысят в тесте «открытое поле» 12
13 2 этап Изучение влияния на постнатальное созревание при введении лактирующим самкам Потомство крысят- от интактных самок. Потомство крысят- от интактных самок. отбирают фиксированное количество здоровых крысят, проживших после рождения 3 дня. Наблюдения проводят до 2-3х месячного возраста. В параметрах наблюдений за потомствами присутствуют те же подходы, освещенные выше (этап 1). В параметрах наблюдений за потомствами присутствуют те же подходы, освещенные выше (этап 1).
Прирост массы тела (г.) крысят, матерям которых препарат тенотен детский вводили с 3 –го по 20-е дни лактационного периода (М±m). 14
Физическое развитие крысят, матерям которых тенотен детский вводили с 3 по 20 дни лактации 15
Поведение 45-ти дневных крысят в тесте «открытое поле», матерям которых тенотен детский вводили с 3 по 20 дни лактации 16
Способность к обучению и воспроизведению полученного навыка у крысят в тесте «УРПИ», матерям которых тенотен детский вводили с 3 по 20 дни лактации 17
18 3 этап. Изучение влияния на органы, системы и физическое развитие в хроническом эксперименте. Препарат вводят инфантильным крысятам, проживших 3 дня (с 4-го – по 60 дни жизни). Препарат вводят инфантильным крысятам, проживших 3 дня (с 4-го – по 60 дни жизни). Исследуют: Исследуют: - физическое развитие, поведенческую активность, адаптивное поведение, способность к обучению и памяти. - По окончании введения и после 1 месячной отмены проводят гематологические, биохимические и патоморфологические исследования.
19 Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на динамику изменений массы тела крысят (г., М±m).
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на физическое развитие крысят (г., М±m). 20
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на поведение 30-ти дневных крысят в тесте «открытое поле» (М±m). 21
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на поведение 60-ти дневных крысят в тесте «открытое поле» (М±m). 22
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на двигательное поведение 90 дневных крысят в тесте «открытое поле» (М±m). 23
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на адаптивное поведение крысят (избегание стресс - ситуации по Хандерсону), (М±m). 24
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на процессы обучения и воспроизведения памятного следа (тест «УРПИ») 25
Влияние тенотена детского (введение с 4 по 60 дни жизни) на коэффициенты масс внутренних органов крысят 26
Заключение: Полагаем, что используемые в работе способы доклинического изучения гомеопатических препаратов позволяют оценить степень раннего и отдаленного влияния на плод и потомство, предопределяют прогноз уровня их безвредности при внедрении в клиническую практику