Сравнение серотонинергических нейронов в ганглиях моллюсков (Lymnaea stagnalis (Linnaeus 1758), Planorbella trivolvis (Say,1817), Helix lucorum (Linnaeus 1758)) и различных методов покраски.Linnaeus1758Linnaeus1758 научный руководитель: Ашихмина Дарья Москва, 2012 Любмила Борисовна Попова

Нервная система улиток. Нервная система легочных моллюсков представлена двумя соединенными между собой кольцами из скоплений тел нейронов – ганглиев. Малое кольцо состоит из пары буккальных(а), пары педальных(в) и пары церебральных (с) ганглиев. Второе, большее кольцо состоит из пары церебральных ганглиев, пары плевральных (d) ганглиев, пары ассиметричных париетальных(e) ганглиев и одного непарного висцерального (f) ганглия. Рисунок 1. Нервная система прудовика

Покраска ганглиев методом иммуногистохимии. Покраска вторичными антителами. Покраски антителами бывают двух типов: прямая (первичными антителами) и непрямая (вторичными антителами). Первичные антитела напрямую соеденины с флюоротарами Вторичные антитела вырабатываются на перыичные в организме другого животного. При данном методе покраски флюоротор присоединен к вторичному антителу. Рисунок 2. покраска вторичными антителами.(рисунок взят из википедии)

Флуорисцентные покраски Флуорисценция - это выделение света веществом в ответ его на облучение.

Цели работы: Научиться выделять из моллюска ганглии и применять к ним иммуногистохимические покраски. Делать с покрашенного препарата при помощи флуоресцентного микроскопа фотографии и различать на них исследуемые нейроны Научиться делать прижизненные покраски серотонинергических нейронов в моллюске. Сравнить между собой нервные системы изучаемых моллюсков на расположение в них серотонинергических нейронов.

Результаты работы Церебральные ганглии. Метод иммуногистохимии. В1 Дорзальная сторона церебрального А1 дорзальная сторона церебрального ганглия Planorbella trivolvis ганглия Lymnaea stagnalis

Висцеральные ганглии, метод иммугостохимии. Висцеральный ганглий Lymnaea stagnalis Висцеральный ганглий Planorbella trivolvis

Helix lucorum, метод пожизненной покраски 5, 7- диокситриптамином Педальный ганглий Helix lucorum вентральная сторона.

Обсуждение и выводы. Метод иммуногистохимии наиболее эффективен для водных моллюсков. Витальные покраски 5,7-диокситриптамином наиболее эффективны для сухопутной улитки Helix lucorum. Даже у достаточно далеких родов улиток мы можем наблюдать одни и те же группы клеток и некоторые отдельные крупные нейроны.

И в заключение... Я благодарю Юрия Валентиновича Панцина и Александра Игоревича Харитонова за помощь в сборе материала и проведения работы, Людмилу Борисовну Попову за прекрасное руководство моей работой, Сергея Менделевича Глаголева за организацию научной практики, а также моего рецензента Елену Евгеньевну Воронежскую за указанные ей замечания к моей работе. Спасибо за внимание!