Морфология миокарда крыс при ишемии и ишемии- реперфузии Минеева Татьяна Владимировна Научный руководитель: Гаврилова Светлана Анатольевна 2009 год

Механизмы повреждения клеток при ишемии и ишемии-реперфузии Ишемия Нарушение метаболизма клеток: недостаток кислорода, накопление метаболитов, истощение запасов АТФ Биосинтез организаторов воспаления: интерлейкинов, простагландинов, молекул адгезии и др. Накопление в ткани большого числа восстановленных молекул Время Ишемия-реперфузия Образование активных форм кислорода (супероксиданион, пероксинитрит, перекись водорода и др.) Воспаление становится генерализованным из-за свободного допуска крови в миокард

Поскольку главные механизмы гибели клеток при необратимой ишемии и ишемии- реперфузии отличаются, в первом случае первостепенное значение придают метаболическим нарушениям, во втором – свободнорадикальному поражению и генерализованному воспалению. Гипотеза: морфологическая картина миокарда крыс в условиях ишемии и ишемии-реперфузии должна быть различной и отличаться от строения интактного миокарда.

Цель. На микроскопическом уровне оценить морфологическую характеристику миокарда крыс в области риска и не задетых ишемией областях в острую стадию развития инфаркта в моделях ишемии и ишемии-реперфузии. Задачи. 1. Освоить методику приготовления препаратов для световой микроскопии. 2. На светооптическом уровне сравнить степень повреждения кардиомиоцитов в миокарде крыс в условиях ишемии и ишемии-реперфузии. 3. Сравнить выраженность реакции воспаления в разных отделах миокарда крыс в моделях ишемии и ишемии-реперфузии

Схема сердца крысы Правый желудочек Правое предсердиеЛевое предсердие Левый желудочек Место перевязки Левая коронарная артерия

Протокол эксперимента 72 часа Ишемия 2,5 часа Реперфузия Операция, необратимая ишемия Забор материала ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ГРУППЫ ЖИВОТНЫХ: ПС БС МП 1. ИНТАКТНЫЕ КРЫСЫ, (N=3) ИМ (НЕОБРАТИМАЯ ИШЕМИЯ), (N=3) ИР (ИШЕМИЯ-РЕПЕРФУЗИЯ), (N=3) ВСЕГО 27 ФРАГМЕНТОВ ТКАНИ, РАССМАТРИВАЛИ ОКОЛО 50 СРЕЗОВ ИЗ КАЖДОГО

Контрольная группа Поперечная исчерченность

Группа необратимой ишемии Кровоизлияние Разрушенные КМЦ Клетки воспаления Разрушенные кардиомиоциты

Группа ишемии-реперфузии Клетки воспаления

Группа ишемии-реперфузии Контрактуры

Морфологические характеристики разных областей миокарда крыс в условиях ишемии и ишемии-реперфузии

Выводы Освоена методика приготовления препаратов для световой микроскопии. На светооптическом уровне степень повреждения кардиомиоцитов в миокарде крыс в условиях ишемии-реперфузии более выражена в разных зонах миокарда, чем у крыс с необратимой перевязкой коронарной артерии. Признаки воспалительной реакции также ярче в сердце крыс с реперфузией коронарной артерии по сравнению с необратимой ишемией. Чтобы определить необратимость и тяжесть выявленных изменений, требуется провести дополнительные исследования.

Список литературы А. Ф. Ванин. Оксид азота – регулятор клеточного метаболизма. Соровский Образовательсный Журнал, 11, 2001г. Ю. А. Владимиров. Свободные радикалы в биологических системах. Соровский Образовательсный Журнал, 12, 2000г. В. И. Кулинский. Активные формы кислорода и оксидативна модификация макромолекул: польза, вред и защита. Соровский Образовательсный Журнал, 1, 1999г. В. П. Скулачев. Явления запрограммированной смерти. Митохондрии, клетки и органы: роль активных форм кислорода. Соровский Образовательсный Журнал, 6, 2001г. В. И. Капелько. Нарушение энергообразования в клетках сердечной мышцы: причины и следствия. Соровский Образовательсный Журнал, 5, 2000г. Парсонс Т., Ромер А. Анатомия позвоночных. М., «Мир», 1992г. Дзержинский Ф. Я. Сравнительная анатомия позвоночных животных. Издательство Московского университета, 1998 г. Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А., Котовский Е.Ф. Гистология, цитология и эмбриология. Сыркин А. Л. Инфаркт миокарда. М., издательство МИА 2006 г. Шулутко Б. И. Ишемическая болезнь сердца. С.-П., издательство ЭЛБИ, 2005 г. С. А. Гаврилова, Т. В. Липина, Т. Р. Загидуллин, Е. С. Фоминых, А. В. Голубева, Е. Н. Вареник, Е. Я. Парнес. Протекторное действие лорноксикама на развитие инфаркта миокарда у крыс в условиях ишемии и ишемии-реперфузии. Кардиология, 12, 2008

Благодарности Глаголеву Сергею Менделевичу за интерес к данной работе и ценные комментарии наших усилий. Гавриловой Светлане Анатольевне за содействие в проведении этой работы. Суховой Галине Сергеевне за предоставленную рецензию. Одиннадцатый биологический класс, а так же всех, кто интересовался работой.

Спасибо за внимание