Зарудная Екатерина; ветеринарный врач, мл. научный сотрудник лаборатории биохимии коллоидных систем 1 Москва Динамическая межфазная тензиометрия как экспресс-метод диагностики в области ветеринарной медицины

Получение российской качественной продукции животного происхождения является одной из важнейших проблем развития России на современном этапе. Все это невозможно без диагностики здоровья животных. В связи с этим особенно важное значение приобретает разработка и внедрение новых, более эффективных средств лабораторной диагностики. Разработка новой методики оценки здоровья животных при помощи экспересс- исследования сыворотки крови животных методом динамической межфазной тензиометрии позволит решить ряд актуальных фундаментальных проблем в области ветеринарной медицины, физиологии, биохимии и фармакологии, а также прикладных задач зоотехнии, экологии, нано- и биотехнологии. Данная диагностическая методика позволят проводить экспресс-оценку здоровья животных разных видов в процессе становления организма в онтогенезе, своевременно отслеживать и корректировать предпатологические состояния, происходящие в организме, не допуская развития заболевания. Все вышеизложенное является неотъемлемой частью научно-технического прогресса в развитии ветеринарной медицины, физиологии, биохимии и животноводства на современном этапе и будет реализовано в данном проекте. Выполнение проекта «Динамическая межфазная тензиометрия как экспресс-метод диагностики в области ветеринарной медицины» обеспечит достижение научных результатов мирового уровня в решении многих актуальных фундаментальных и прикладных проблем физиологии и фармакологии, биохимии и экологии, животноводства и зоотехнии; позволит получать высокопродуктивное поголовье животных, высококачественную продукцию и сырье животного происхождения.

Решение В процессе реализации проекта «Динамическая межфазная тензиометрия как экспресс-метод диагностики в области ветеринарной медицины» должны быть разработаны диагностические методики по мониторингу здоровья животных и методические рекомендации по использованию нового диагностического метода экспресс-исследования, применительно к животным разных видов для непосредственного применения его в хозяйствах РФ Метод динамической межфазной тензиометрии (т.е. измерение динамического поверхностного натяжения) основан на известных коллоидно-химических принципов и не требует дополнительных затрат, в том числе, на покупку реактивов За счет мобильности и небольших размеров предлагаемого нами прибора - тензиометра ВРА-1Р измерение динамического поверхностного натяжения сыворотки крови может проводиться прямо на месте - непосредственно в хозяйстве

Конкуренты Для мониторинга физиолого-биохимического состояния организма животных используются довольно многочисленные методики. Большинство их них основано на изучении тех или иных физиологических показателей, а также биохимических, гематологических, иммунологических исследованиях системы крови, как наиболее важной биологической жидкости организма, объединяющей все органы и ткани, и наиболее полно отражающей протекающие в них процессы. Все перечисленные методики довольно затруднительны, требуют большого числа времени и дополнительных затрат (в том числе, на покупку реактивов) и очень часто не выявляют предпатологического состояния животных (пример, рис. 1 на следующем слайде). Для проведения подобной диагностики необходимо использовать реактивы для конкретного вида животного, что в России практически не применяется. В связи с этим, возникают неточности в полученных значениях и отмечаются значительные колебания средних величин, что не позволяет выявить патологию. Для того, чтобы разработать подобную методику необходимы квалифицированные специалисты, владеющие данной методикой, методически грамотный и целевой подход. При работе над данным проектом необходимо проводить исследование как физиологически здоровых животных, так и животных при разных патологических состояниях. Для точной диагностики конкретного заболевания, качественной оценки предлагаемого метода необходимо детально изучить влияние отдельных элементов крови и компонентов ее сыворотки на значения динамического поверхностного натяжения в норме и при различных патологиях, поэтому при разработке данного проекта параллельно с динамическим поверхностным натяжением проводится клиническое обследование животных, изучение стандартных гематологических и биохимических показателей, а затем рассчитываются коэффициенты корреляции и регрессии между изучаемыми величинами.

Цель работы состояла из трех взаимосвязанных элементов: 1. разработке методологических основ определения динамического поверхностного натяжения (ДПН) биологических жидкостей животных; 2. сравнительном анализе параметров ДПН человека и разных видов животных в зависимости от возраста, физиологического состояния и пола; 3. корреляционном анализе между параметрами ДПН и биохимическими показателями сыворотки крови человека и разных видов животных в зависимости от возраста, физиологического состояния и пола.

Прибор для измерения ДПН Maximum Bubble Pressure Tensiometer BPA-1P диапазон измерения поверхностного натяжения мН/м диапазон измерения поверхностного натяжения мН/м динамический диапазон времени существования поверхности 0, с динамический диапазон времени существования поверхности 0, с воспроизводимость измерения не менее 0,2% (±0,1 мН/м) воспроизводимость измерения не менее 0,2% (±0,1 мН/м) точность измерения ±0,25 мН/м точность измерения ±0,25 мН/м контроль температуры образца контроль температуры образца несколько методов измерения: стандартный (М1) - с увеличением времени существования поверхности; сканирующий (М2) - экспресс метод; обратный (М3) - измерение сначала при больших временах существования поверхности, а потом при малых; статический (М4) -измерение статического ПН при одинаковом времени существования поверхности. несколько методов измерения: стандартный (М1) - с увеличением времени существования поверхности; сканирующий (М2) - экспресс метод; обратный (М3) - измерение сначала при больших временах существования поверхности, а потом при малых; статический (М4) -измерение статического ПН при одинаковом времени существования поверхности. Экспериментальное время: Экспериментальное время: M минут M минут M4 4-6 минут M4 4-6 минут может использоваться как автономное устройство может использоваться как автономное устройство

Принципиальная схема работы тензиометра ВРА-1Р Принципиальная схема работы тензиометра ВРА-1Р P S – P Н –P d где - поверхностное натяжение исследуемой жидкости, (P S – P Н –P d ) - измеренное давление в капилляре, P S r P Н P d P S - избыток максимального давления в измеряющей системе, r - радиус капилляра, P Н - гидростатическое давление жидкости, P d - динамическое давление, обусловленное вязко-инерционными эффектами, P d 0

Рис. 1: 1 - двухсуточный поросенок; 2 - поросенок 24- суточного возраста; мес. ремонтная свинка; 4 - свиноматка на 27 дне супоросности; 5 - лактирующая свиноматка В целях определения связи возраста и физиологического состояния животных с ДПН сыворотки крови, проводили измерения ДПН сыворотки крови физиологически здоровых свиней, крупного рогатого скота и собак разного возраста. Результаты исследования представлены в виде тензиограмма - кривых зависимости ПН от времени «существования» поверхности. Тензиограммы сыворотки крови животных Рис. 2: 1 - кобель немецкой овчарки, 3 года; 2 - сука немецкой овчарки, 4 года; 3 - сука немецкой овчарки, 7 лет Определяли значения ДПН, соответствующие времени существования поверхности t 0,02 сек ( 1 ) и t 1 сек ( 2 ) в координатах (lgt), а также равновесное ПН ( 3 ) и 0 путем экстраполяции динамической тензиограммы к бесконечному времени в координатах (t -1/2 ) и нулевому времени в координатах (t 1/2 ), и значения коэффициентов наклона кривой в области малых (λ 0 ) и больших (λ 1 ) времен существования поверхности в координатах (t 1/2 ) и (t -1/2 ) соответственно.

Рис. 3. Рис. 3. Тензиограмма сыворотки крови 24-дневного поросенка зависимости от t eff 1/2. Характеристика линейного участка тензиограммы сыворотки крови поросенка: σ 0 =72,1 мН/м, λ 0 =9,2 мН. м -1. с -1/2 Рис. 4. Рис. 4. Тензиограмма сыворотки крови 24-дневного поросенка в зависимости от t eff -1/2. Характеристика линейного участка тензиограммы сыворотки крови поросенка: σ 3 =55,9 мН/м, λ 1 =11,6 мН. м -1. с 1/2 Определяли значения ДПН, соответствующие времени существования поверхности t 0,02 сек ( 1 ) и t 1 сек ( 2 ) в координатах (lgt), а также равновесное ПН ( 3 ) и 0 путем экстраполяции динамической тензиограммы к бесконечному времени в координатах (t -1/2 ) и нулевому времени в координатах (t 1/2 ), и значения коэффициентов наклона кривой в области малых (λ 0 ) и больших (λ 1 ) времен существования поверхности в координатах (t 1/2 ) и (t -1/2 ) соответственно.

Табл. 1. Значения динамического поверхностного натяжения сыворотки крови поросят в зависимости от возраста группа параметры сосуны, 2-3 сут. сосуны, сут. отъём, сут. ремонт, сут. ремонт, 6 мес. откорм, 6 мес. n10 86 σ 0, мН/м 66,45±1,3571,89±0,28 *** 72,40±0,25 *** 72,44±0,28 *** $ 72,72±0,25 *** # 73,19±0,19 *** ## $ σ 1, мН/м 65,48±1,2470,28±0,60 ** 71,72±0,30 *** # 70,57±1,07 ** $ 72,07±0,52 *** # 72,53±0,38 *** ## σ 2, мН/м 58,48±0,9564,09±0,47 *** 66,15±0,36 *** ## 66,76±0,34 *** ### 68,12±0,32 *** ### $$$ 67,94±0,19 *** ### $$$ σ 3, мН/м 51,34±0,7855,62±0,56 *** 59,63±0,56 *** ### 60,55±0,46 *** ### 61,73±0,49 *** ### $ 61,34±0,36 *** ### $ Достоверное различие (p0,05, p0,01 и p0,001, соответственно) *, ** и *** по сравнению с 2-3 суточными поросятами; #, ## и ### по сравнению с суточными поросятами; $, $$ и $$$ по сравнению с поросятами-отъемышами;, и по сравнению с ремонтными поросятами в возрасте суток К суткам σ 0, σ 1, σ 2 и σ 3 возрастают на 9,0%, 9,5%, 13,2% и 16,2% и на 0,7%, 2,2%, 3,2% и 7,2%, соответственно, по сравнению с 2-3-суточными и суточными поросятами, соответственно. К 6-месячному возрасту σ 0, σ 1, σ 2 и σ 3 становятся достоверно выше в среднем на 8,9%, 9,4%, 14,2% и 13,9%, на 1,5%, 2,8%, 5,8% и 9,6% по сравнению с 2-3-суточными и суточными поросятами, соответственно; σ 2 и σ 3 - на 2,8% и 3,2% по сравнению суточными поросятами, соответственно 1 - двухсуточный поросенок; 2 - поросенок 24-суточного возраста; 3 - поросенок- отъемыш; 4 - ремонтный поросенок в возрасте 112 суток; месячный поросенок Рис. 5: 1 - двухсуточный поросенок; 2 - поросенок 24-суточного возраста; 3 - поросенок- отъемыш; 4 - ремонтный поросенок в возрасте 112 суток; месячный поросенок

Табл. 2. Значения динамического поверхностного натяжения сыворотки крови свиноматок в зависимости от физиологического состояния группа параметры ремонт., 8 мес. супоросные лактирующие (1-3 день) дни супоросности n σ 0, мН/м72,57±0,2072,54±0,3472,40±0,4073,02±0,2673,40±0,19** # $ σ 1, мН/м71,06±0,3869,17±0,68*68,72±0,44**71,80±0,96 # $ 72,70±0,40* ### $$$ σ 2, мН/м66,70±0,6465,72±0,3666,58±0,4267,91±0,46 ## $ 68,29±0,39* ### $$ σ 3, мН/м60,07±0,2758,44±0,54*59,22±0,37**60,31±0,48 # 61,60±0,50* ### $$ Достоверное различие (p0,05, p0,01 и p0,001, соответственно) *, ** и *** по сравнению с 8 мес. ремонтными свиноматками; #, ## и ### по сравнению со свиноматками, находящимися на дне супоросности; $, $$ и $$$ по сравнению со свиноматками, находящимися на дне супоросности С наступлением супоросности происходит достоверное снижение σ 1 и σ 3 (на 2,7% и 4,6%, соответственно) по сравнению с 8-месячными холостыми свинками. К дню супоросности значения σ 1, σ 2 и σ 3 возрастают на 3,7%, 3,3% и 3,2%, соответственно, по сравнению со свиноматками в конце первого месяца супоросности. У лактирующих свиноматок значения σ 0, σ 1, σ 2 и σ 3 на 1,2%, 4,9%, 3,8% и 7,7%, соответственно, достоверно выше по сравнению со свиноматками на дне супоросности мес. ремонтная свинка; 2. - свиноматка на 27 дне супоросности; 3. - свиноматка на 99 дне супоросности; 4. - лактирующая свиноматка Рис. 6: мес. ремонтная свинка; 2. - свиноматка на 27 дне супоросности; 3. - свиноматка на 99 дне супоросности; 4. - лактирующая свиноматка

Табл. 3. Значения динамического поверхностного натяжения сыворотки крови коров в зависимости от возраста и физиологического состояния (М±m; n=8) группа параметры возраст нетеликоровы месяц стельности (лактации) 6 мес12 мес17-18 мес 51-2 (3-4)5-6 (6-7) σ 0, мН/м72,07±0,1773,94±0,49*73,34±0,3573,22±0,31*74,39±0,42*73,18±0,32 σ 1, мН/м71,91±0,4373,52±0,14*73,08±0,4872,86±0,23* # 73,09±0,5172,45±0,39 # σ 2, мН/м66,80±0,3070,11±0,42*69,86±0,76*66,10±0,48 ### 64,24±0,43* ### 65,62±0,37 ### σ 3, мН/м61,19±0,6664,35±0,64*62,22±0,55 # 60,45±0,59 ## 56,80±0,59* ### 58,97±0,69 ### Достоверное различие (p0,05, p0,01 и p0,001, соответственно) *, ** и *** по сравнению с телочками 6-месячного возраста; #, ## и ### по сравнению с телками 12-месячного возраста К 12 мес. σ σ 3 достоверно увеличиваются (на 2,3…5,2%). К σ 3 достоверно снижается на 3,3% по сравнению с 12-мес. С наступлением стельности у нетелей и лактирующих коров ДПН достоверно снижается: σ 2 - на 5,4% и 7,6%, σ 3 - на 2,8% и 7,5%, соответственно. Нетели и коровы на 5-6 месяце стельности имеют достоверно более высокие значения параметров σ 2, σ 3 и λ 0 (на 2,9% и 2,5%, 6,4% и 3,8%, 11,0% и 33,5% соответственно) и более низкие значения параметров σ 0 и λ 1 (σ 0 достоверно ниже в среднем на 1,6%, λ 1 - на 25,7% и 12,5% соответственно) по сравнению с коровами, находящимися на 1-2 месяце стельности. Тензиограммы сыворотки крови коров: месяцев; месяцев; 3. - нетели; 4. - лактирующей коровы (3-4 месяц лактации; 1-2 месяц стельности) Рис. 7. Тензиограммы сыворотки крови коров: месяцев; месяцев; 3. - нетели; 4. - лактирующей коровы (3-4 месяц лактации; 1-2 месяц стельности)

Рис.8. Динамика λ 0 (мНм -1с -1/2 ) и λ 1 (мНм -1с 1/2 ) сыворотки крови свиней (вверху) и сыворотки крови коров (внизу) Достоверное различие *, ** и *** по сравнению с телочками 6-месячного возраста; #, ## и ### по сравнению с телками 12-месячного возраста

Табл. 4. Параметры динамического поверхностного натяжения сыворотки крови немецких овчарок в зависимости от пола и возраста группа параметры КобелиСукиКобелиСуки 4 года7 лет n 4554 σ 0, мН/м 73,78±0,1973,50±0,0674,04±0,2173,48±0,08 σ 1, мН/м 73,40±0,2273,20±0,1673,54±0,1572,92±0,12 σ 2, мН/м 67,12±0,1767,12±0,2667,11±0,1367,09±0,14 σ 3, мН/м 59,04±0,8959,96±0,9060,32±0,2261,89±0,16 λ 0, мНм -1с -1/2 8,40±0,166,50±0,977,90±0,459,70±0,21 λ 1, мНм -1с 1/2 8,40±1,077,30±0,916,70±0,326,30±0,87 В возрасте 4 лет λ 0 на 23% ниже у сук, чем у кобелей, а λ 1 – на 13%. В возраст 7 лет λ 0 у сук на 23% выше по сравнению с кобелями, а λ 1 на 6% ниже. Возникновение и течение многих патологических состояний может существенно отличаться у особей мужского и женского пола. В связи с этим, необходимо отличать тактику диагностики (в том числе и лабораторной) у самок и самцов животных. В связи с этим были исследованы собаки двух возрастных групп в зависимости от пола. Было показано, что достоверные отличия (Р

Рис. 9. Тензиограммы сыворотки крови жеребцов 2-х летнего возраста русской рысистой породы, проба 1- кровь была взята у жеребца после чрезмерной тренировки Метод межфазной тензиометрии позволяет выявлять предпатологические состояния организма, поэтому его можно использовать в качестве экспресс-теста при ведении племенной работы, в период проведения массовых вакцинаций и осеменения животных, при оценки готовности лошадей к соревнованиям

Параметры Группа обследованных σ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 1, мНм -1с 1/2 Кровь Больные70,62±0,1166,48±0,1957,6±0,313,1±0,3 Здоровые70,0±0,467,7±0,460,0±0,412,6±0,5 Моча Больные71,26±0,1266,7±0,359,3±0,410,4±0,3 Здоровые71,5±0,369,3±0,261,8±0,413,5±0,5 Табл. 5. Табл. 5. Параметры динамического поверхностного натяжения сыворотки крови и мочи у больных сахарным диабетом и здоровых людей (В.Н. Казаков, О.В. Синяченко, Г.А. Игнатенко и др., 2003 г.) Сахарный диабет - эндокринное заболевание животных (болеют обезьяны, собаки, реже кошки, лошади, свиньи и другие животные с однокамерным желудком) и человека, обусловленное абсолютной или относительной инсулиновой недостаточностью, что приводит к нарушению всех видов обмена веществ, прежде всего углеводного, поражению сердечно-сосудистой системы, нервной системы, а также других органов и тканей. В большинстве случаев диабет развивается постепенно и до периода его явных клинических проявлений может пройти длительное время (несколько лет). При скрытом (латентном) течении у больных отсутствуют симптомы болезни, присущие явному диабету. В этом случае нарушения углеводного обмена можно выявить на основании специальных проб (тесты) на выносливость (толерантность) к углеводам, например с помощью глюкозо-толерантного теста (ГТТ). Уровень глюкозы в крови человека в норме натощак не превышает 6,0 ммоль/л (у собак 4,39 ммоль/л, у кошек 3,38 ммоль/л), а после приема пищи - 7,8 ммоль/л (у собак 7,3 ммоль/л, у кошек 6,3 ммоль/л). Достоверное повышение уровня сахара крови натощак более 120 мг% (у собак и кошекболее 8,2 ммоль/л) свидетельствует о развитии у пациента сахарного диабета.

где r- коэффициент корреляции; М1; М2 – средние арифметическое двух изучаемых признаков; х; у - отклонение каждого измерения от средней арифметической ( ) – слабая положительная (отрицательная) корреляционная связь - коэффициент корреляции от 0,1 до 0,29; ( ) – средняя положительная (отрицательная) корреляционная связь - коэффициент корреляции от 0,3 до 0,69; ( ) - сильная положительная (отрицательная) корреляционная связь - коэффициент корреляции больше 0,69. Коэффициент корреляции r находят как частное от деления сумм произведений отклонений Σ ПО на максимальную сумму Σ М. Для точной диагностики конкретного заболевания, качественной оценки метода межфазной тензиометрии необходимо детально изучить влияние отдельных компонентов сыворотки крови на полученные значения динамического поверхностного натяжения в норме и при различных патологиях, поэтому при разработке данного метода параллельно проводится клиническое обследование животных, изучение стандартных биохимических показателей, а затем рассчитываются коэффициенты корреляции между изучаемыми величинами. Достоверность коэффициента корреляции: *- p0,05,, ** - p0,01 и *** - p0,001

Табл. 6а. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови свиней (n=99) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий белок, г/л * * Альбумины, г/л ** - - IgG, г/л *** * * IgA, г/л *** * ** IgM, г/л - ** Мочевина, ммоль/л *** ** *** ** Табл. 7а. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови коров (n=48) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий белок, г/л *** Альбумины, г/л ** *** ** Мочевина, ммоль/л ** Табл. 8а. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови собак (n=14) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий белок, г/л * * * Альбумины, г/л ** * Мочевина, ммоль/л

Табл. 6б. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови свиней (n=99) Табл. 7б. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови коров (n=48) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий холестерол, ммоль/л *** Триацилглицеролы, ммоль/л *** Глюкоза, ммоль/л ** *** параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Триацилглицеролы, ммоль/л *** * ** Общий холестерол, ммоль/л ** *** ** Глюкоза, ммоль/л * Табл. 8б. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови собак (n=14) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Триацилглицеролы, ммоль/л * * Общий холестерол, ммоль/л * ** - Глюкоза, ммоль/л *

Табл. 6в. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови свиней (n=99) Табл. 7в. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови коров (n=48) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий кальций, ммоль/л ** *** - Р неорганический, ммоль/л *** ** *** Калий, ммоль/л * * * Натрий, ммоль/л ** Хлорид-ионы, ммоль/л *** ** *** ** *** параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий кальций, ммоль/л *** ** * * Р неорганический, ммоль/л ** Калий, ммоль/л *** ** * * Натрий, ммоль/л *** * Хлорид-ионы, ммоль/л * * Табл. 8в. Результаты корреляционного анализа между показателями ДПН (столбцы) и биохимическими показателями (строки) сыворотки крови собак (n=14) параметры ДПН биохим. показатели σ 0, мН/мσ 1, мН/мσ 2, мН/мσ 3, мН/мλ 0, мНм -1 с -1/2 λ 1, мНм -1 с 1/2 Общий кальций, ммоль/л * Р неорганический, ммоль/л **

1. Динамическое поверхностное натяжение сыворотки крови животных и человека имеет особенности, зависящие от вида, возраста, пола и физиологического состояния. 2. Физиологическое состояние организма животных в разные фазы постнатального онтогенеза сопровождается закономерными изменениями в значениях динамического поверхностного натяжения и зависит от изменения количественного состава веществ крови животных, содержания и соотношения поверхностно-активных веществ и других соединений. 3. Значения динамического поверхностного натяжение сыворотки крови свиноматок и коров имеют видовые и возрастные особенности и общие характерные закономерности, связанные с физиологическим состоянием животных, активацией и изменением интенсивности обмена веществ в период полового и физиологического созревания, а также с наступлением и течением беременности.. 4. Значения динамического поверхностного натяжение сыворотки крови будут существенно изменяться при возникновении предпатологических и патологических состояний, что дает предпосылки для внедрения простого, недорогого и доступного метода диагностики в практическую ветеринарную медицину. ВЫВОДЫ

Благодарю за внимание !

Контакты Зарудная Екатерина Николаевна Москва 23