Возбудитель сибирской язвы План 1.Морфология возбудителя 2. Культуральные и биохимические свойства 3.Диагностика и профилактика сибирской язвы Здоровье животных в ваших руках

ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ - Bacillus anthracis, род Bacillus Сибирская язва - острое инфекционное заболевание сельскохозяйственных и диких животных, а также человека, характеризующееся лихорадкой, септицемией, кровоизлияниями в ткани и органы, образованием карбункулов. Возможно сверхострое течение (крс, мрс). У свиней часто протекает с поражением заглоточных лимфатических узлов.

Bacillus anthracis Под разными названиями была описана с незапамятных времен Гомером, Гиппократом, Цельсием 1788 году название болезни дал С.С. Андреевский – штабной лекарь Челябинского округа Возбудитель болезни обнаружен: А.Паллендером (Германия) в 1849 г. К.Давеном (Франция) 1850 г. Ф.А.Брауэлем –профессором Дерптского ветучилища в 1857 г. Детально сибирскую язву изучили Р.Кох (1876), Л.Пастер (1877) и Л.С.Ценковский (1883).

Морфология Возбудитель крупная неподвижная грамположительная палочка длиной 6-8 мкм и шириной 1,0-1,5 мкм. Содержит дифференцированный нуклеоид (ядро). В мазках располагается одиночно или чаще цепочками. Концы бацилл в окрашенных препаратах как бы срезаны под прямым углом.

Защитные механизмы возбудителя сибирской язвы Высокая устойчивость возбудителя сибирской язвы к неблагоприятным факторам обуславливается тем, что в организме он образует капсулу, вне организма – спору. Капсула образуется в восприимчивом и неиммунном организме, а также иногда на средах с добавлением крови или сыворотки. Капсула выполняет защитную функцию и является носителем вирулентности. Бескапсульные штаммы авирулентны. Споры появляются при доступе кислорода воздуха, недостатке питательных веществ и даже в дистиллированной воде при С. Споры располагаются посередине микробной клетки и имеют овальную форму. На питательной среде при температуре 37 С молодые споры прорастают через 1-2 ч, старые через 5-7 ч. В каштановых и черноземных почвах в летнее время споры могут прорастать, образуя вегетативные клетки, которые с наступлением осени снова превращаются в исходные формы.

В лабораторию направляют ухо от трупа животного, перевязанное у основания (ухо отрезают с той стороны, на которой лежит труп), или кровь из надреза уха в виде толстого мазка на двух предметных стеклах. Чтобы исключить попадание возбудителя во внешнюю среду, место разреза прижигают шпателем. От трупов свиней для лабораторного исследования отправляют заглоточные лимфатические узлы и участки отечной соединительной ткани. Если подозрение на сибирскую язву возникло в ходе вскрытия, его прекращают и на исследование направляют часть селезенки. Нативный материал помещают в чистую посуду (пробирки, банки). Высушенные мазки кладут в чашки Петри, которые оборачивают плотной бумагой. На упаковке делают надпись «Мазок не фиксирован!» Посуду с материалом помещают во влагонепроницаемую тару, обвязывают, пломбируют или опечатывают, делают надпись «Верх. Осторожно!» и с сопроводительными документами нарочным направляют в лабораторию. Материал для исследования

Лабораторная диагностика возбудителя сибирской язвы Бактериоскопия (окраска по Михину, по Ольту, по Граму) Выделение чистой культуры и идентификациюя возбудителя по культурально-морфологическим признакам. Биопроба (2 белые мыши или морские свинки) Тест «жемчужного ожерелья» Фаготипирование Гемолитическая активность (-) Реакция с сибиреязвенной люминесцирующей сывороткой (+) Подвижность (-) Реакция преципитации (РП)

Способы окрашивания возбудителя Из поступившего в лабораторию материала готовят мазки и окрашивают по Граму. Для выявления капсулы мазки окрашивают одним из методов (методы Михина, Гимзы, Ольта и т. д.), а также сибиреязвенными люминесцирующими сыворотками. В окрашенных мазках из трупного материала возбудитель обнаруживают в виде крупных грамположительных палочковидных бактерий, располагающихся одиночно, парами, короткими цепочками. Концы палочек, обращенные друг к другу, резко обрублены, свободные концы закруглены, клетки окружены капсулой. В отдельных случаях, особенно в мазках из материала, полученного от свиней, форма клеток может быть нетипичной: короткие, толстые, изогнутые или зернистые палочки со вздутием в центре или на концевых частях бактерий. Предварительный ответ в хозяйство, откуда поступил материал, дают немедленно по результатам микроскопического исследования.

Питательные среды С целью выделения культуры возбудителя исследуемый материал засевают: в МПБ, на МПА в бульон и агар Хоттингера.

Культуральные свойства Возбудитель сибирской язвы – факультативный анаэроб. Оптимальная температура 35-37°С. Оптимум рН среды 7,2- 7,4. Инкубируют в аэробных условиях ч, а при отсутствии роста - до 48 ч.

Характер роста возбудителя На МПА B. anthracis формирует плоские, матово-серые, шероховатые, с отростками на краях колонии (R- форма, рис.), может образовывать и атипичные колонии без отростков. Края колоний R-формы под малым увеличением микроскопа имеют вид локонов, получивших название «львиная грива» (рис.). На МПБ рост возбудителя характеризуется образованием на дне пробирки рыхлого осадка при прозрачной питательной среде; после встряхивания осадок разбивается на хлопья

Kолонии Bacillus anthracis (a-«львиная грива» б- R, S и RO-форм

Bacillus anthracis: в МПБ - ватообразный рыхлый осадок, в МПЖ- разжижение желатины

Bacillus anthracis: 1- реакция «жемчужного ожерелья» на среде с пенициллином; 2 –проба с бактериофагом (в пробирках метод стекающей капли, в ч. Петри – микрометод)

Если возбудитель выращивать на питательных средах, содержащих сыворотку крови, и в атмосфере с повышенным содержанием оксида углерода (IV), то на МПА образуются гладкие колонии S-формы, а на МПБ отмечают рост в виде диффузного помутнения среды. В выросших культурах исследуют морфологические и тинкториальные свойства клеток. В мазках, окрашенных по Граму, обнаруживают длинные цепочки из грамположительных типичных палочек; На бессывороточных средах бактерии капсулу не образуют, на сывороточных средах возбудитель формирует капсулу, причем клетки в препарате в последнем случае чаще располагаются одиночно или парами. Характер роста возбудителя

При значительной контаминации материала посторонней микрофлорой посев делают на селективный агар: расплавленный МПА мл, сульфат полимиксина М – 0,5 мл, невиграмон - 0,5 мл, гризеофульвин -1 мл, моющее средство «Прогресс» - 10 мл, фенол- фталеинфосфат натрия - 0,1мл; перемешивают, разливают по чашкам Петри. Через ч культивирования на внутреннюю поверхность крышки чашки Петри наносят 1-2мл 25%-го водного раствора аммиака, чашку переворачивают. Колонии В. anthracis остаются бесцветными, колонии бактерий с фосфатазной активностью розовеют.

Сибиреязвенные бациллы, быстро размножаясь в крови больного животного, заполняют кровеносное русло и ткани

Посмертные изменения в организме животного при сибирской язве (труп вздут, кровянистые выделения из естественных отверстий)

Клинические признаки сибирской язвы у лошади

Клиническое проявление сибирской язвы у свиньи

Клиническое проявление сибирской язвы. Кровянистые выделения из естественных отверстий

Возбудитель сибирской язвы сохраняется в ротовом аппарате слепня до пяти дней

За часов до смерти животное становится опасным источником болезни

Молниеносная форма чаще поражает крупный рогатый скот и овец (животные тяжело дышат, падают и в судорогах погибают. Из носа, рта, заднего прохода вытекает темная кровь)

Кожа больной свиньи имеет синевато- красный оттенок, на языке и твердом небе появляются карбункулы

Заражение человека происходит при лечении и вскрытии сибиреязвенных животных, при разделке, обработке шкур, шерсти и меха на кожевенных заводах

Вне организма сибиреязвенные бациллы образуют споры

Споры очень устойчивы. Действие прямого солнечного света они выдерживают дней

При кипячении сибиреязвенные споры погибают только через 20 мин, легко переносят высушивание, холод, гниение

Споры устойчивы к действию дезинфицирующих веществ

Кровеносные сосуды наполнены темной, похожей на деготь лаковой кровь. Кровь не свертывается

Лимфатические узлы увеличены, внутри – темно- красного цвета

Селезенка черно - красного цвета, резко увеличена. Ткань ее при разрезе стекает с ножа

Кишечник приобретает темно – красный цвет, слизистая оболочка набухает

Особенно стойкие очаги заражения - во влажных и болотистых местностях

Люди заражаются сибирской язвой при вскрытии, выделке, обработке сибиреязвенных туш животных

Свиньи заражаются, поедая отходы погибших животных

Споры сибиреязвенных бацилл длительное время сохраняются во внешней среде

Скотомогильники, расположенные вблизи русел рек, становятся источниками заражения воды почвы спорами сибирской язвы

Заболоченные пастбища, которые могут служить стойкими очагами сибиреязвенной инфекции, осушают

Меры борьбы с заболеванием При установлении диагноза на сибирскую язву вводят карантин

КАРАНТИН По условиям карантина запрещается: - ввод и ввоз, вывод и вывоз за пределы территории животных всех видов; - заготовка и вывоз продуктов и сырья животного происхождения - перегруппировка животных внутри хозяйства; - использование молока от больных животных; - проведение хирургических операций, кроме неотложных; - вход на неблагополучную ферму посторонним лицам, въезд транспорта, не связанного с обслуживанием данной фермы; - выгон животных на водопой из прудов и других естественных водоемов.

Проводят клинический осмотр всех восприимчивых животных, измеряют температуру тела

Больных и подозрительных на заболевание животных изолируют и вводят им внутривенно лечебную сыворотку

Для лечения сибирской язвы на фоне иммунной сыворотки применяют также антибиотики

Больным животным улучшают условия содержания и кормление

Остальных животных (2 группа) и больных(1 группа- через 14 дней после клинического выздоровления) вакцинируют

Вакцинация свиней

Вакцинация оленей

БИОПРЕПАРАТЫ * Вакцина СТИ (живая) * Вакцина ВГНКИ (сухая, живая) * Ассоциированная (живая вакцина против сибирской язвы и эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота) * Вакцина из штамма 55 (живая) * Лечебно – профилактическая сибиреязвенная сыворотка * Сибиреязвенная преципитирующая сыворотка * Сибиреязвенная люминесцирующая сыворотка * Сибиреязвенный диагностирующий бактериофаг

Вакцина из штамма 55 Лиофилизированная, в ампулах(флаконах) в виде таблеток по 1-2 куб.см ( доз) для п/к применения Жидкая во флаконах по куб.см ( доз) для п/к применения и в ампулах по 1-5 куб.см ( доз) для п/к или в/к применения Молодняк всех видов ж-х с 3-х мес.возраста, жеребят – с 9-ти мес. Ревакцинация через 6 мес. после первой вакцинации и в последующем -ежегодно всех животных, 1 раз в год

Вакцина из штамма 55 Подкожное применение: овцам и козам – по 0,5 куб.см – в область средней трети шеи или внутренней поверхности бедра; лошадям, к.р.с, оленям, верблюдам, ослам – по 1,0 куб.см –в область средней трети шеи; свиньям – 1,0 куб.см - в область внутренней поверхности бедра или за ухом; пушным зверям -1,0 куб.см –в область внутренней поверхности бедра или в подхвостовое зеркало

Вакцина из штамма 55 Внутрикожно - с помощью безыгольного инъектора в объеме 0,2 куб.см к.р.с., оленям, верблюдам – в бесшерстный участок промежности; лошадям и ослам –в обл.средней трети шеи свиньям –за ухом; овцам и пушным зверям – в объеме 0,1 куб.см –в подхвостовое зеркало Иммунитет через 10 дней, на 1 год

Место укола дезинфицируют 2%-ным раствором карболовой кислоты

В неблагополучных по сибирской язве пунктах предохранительные прививки делают ежегодно Вынужденные прививки проводят при вспышках сибирской язвы

Трупы животных, павших от сибирской язвы, и их остатки сжигают

Трупы перевозят в специальных машинах или непроницаемых повозках

В эпизоотическом очаге сибирской язвы: 1).По результатам клинического обследования животных делят на 2 группы: 1- больные животные (имеющие клинические признаки болезни или повышенную температуру тела. Им вводят противосибиреязвенную сыворотку или глобулин и антибиотики. Через 14 дней после клинического выздоровления им прививают противосибиреязвенную вакцину. 2- остальные животные, находящиеся в эпизоотическом очаге. Их вакцинируют противосибиреязвенной вакциной в соответствии с наставлением по ее применению с последующим (в течение 3 дней) ежедневным клиническим осмотром. Животных с клиническими признаками болезни переводят в 1-группу.

2) Для ухода за больными и подозрительными по заболеванию животными закрепляют обслуживающий персонал. Его обеспечивают спецодеждой, дезосредствами, аптечками первой помощи, средствами личной гигиены. Эти лица должны быть привитыми против сибирской язвы или подвергаются экстренной профилактике. Работников, у которых на руках, лице и других открытых местах тела имеются повреждения кожи, к работе по уходу за больными животными, уборке трупов, очистке и дезинфекции загрязненных возбудителем помещений и прочих объектов не допускают. 2) Корма, заготовленные на благополучных участках посевов, пастбищ, сенокосных угодий, не соприкасавшиеся с больными животными и незагрязненные их выделениями, допускают к вывозу после снятия карантина (полученные с участков, на которых находились больные или павшие от сибирской язвы животные, или контаминированные иным путем, вывозу из хозяйства не подлежат, их скармливают на месте животным, вакцинированным против сибирской язвы).

4)Молоко от животных первой группы в течение всего периода лечения подлежит уничтожению после обеззараживания путем добавления хлорной извести, содержащей не менее 25 % активного хлора, из расчета 1 кг на 20 литров молока, и 6 часовой выдержки. Молоко от животных второй группы в течении 3 дней после вакцинации кипятят в течение 4-5 минут и скармливают в эпизоотическом очаге вакцинированным животным; по истечении указанного срока молоко под контролем ветеринарных специалистов вывозят через перевалочный пункт на закрепленный маслозавод для переработки на масло. 5) Продукция, выработанная на молочных предприятиях, из молока, поступившего из хозяйства до наложения карантина, реализуется без ограничений. 6) Навоз, подстилку и остатки корма, загрязненные выделениями больных животных сжигают. Навозную жижу в жижесборнике смешивают с сухой хлорной известью, содержащей не мене 25 % активного хлора, из расчета 1 кг извести на каждые 20 литров навозной жижи.

ДЕЗИНФЕКЦИЯ ПРИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЕ Для дезинфекции загрязненных возбудителем поверхностей применяют: 10 %-й горячий р-р едкого натра, 4 %-й р-р формальдегида, р-ры хлорной извести, двутретиосновной соли и нейтрального гипохлорида кальция, ДП - 2, гексанита с содержанием 5 % активного хлора, 10%-й однохлористый йод (только для деревянных поверхностей), 7%-й р-р перекиси водорода с добавлением 0,2 % молочной кислоты и 0,2 % ОП-7 или ОП-10, 2 %-й р-р глутарового альдегида. Дезинфекцию указанными средствами (кроме однохлористого йода, перекиси водорода и глутарового альдегида) проводят трехкратно с интервалом в 1 час из расчета 1 литр на 1 кв. м. в типовых помещениях и 2 литра раствора на 1 кв. м. в помещениях, приспособленных для содержания животных. При применении однохлористого йода поверхность обрабатывают двукратно с интервалом минут при норме расхода 1 л/кв. м. площади, а перекиси водорода и глутарового альдегида - двукратно с интервалом в 1 час исходя из того же расчета.

Для дезинфекции поверхностей при низкой (минусовой) температуре применяют: растворы хлорной извести, двутретиосновной соли гипохлорита кальция с содержанием 8% ак- тивного хлора, препарата ДП - 2 и нейтрального гипохлорида кальция с содержанием 5 % активного хлора. Растворы готовят перед применением на горячем (50-60°С) 15 %- м (при наружной t от 0 до минус 15°С) или 20 %-м (при t до минус 30°С) растворе поваренной соли. Растворы наносят трехкратно с интервалом 1 час при норме расхода 0,5-1 л/кв. м. Для обеззараживания деревянных поверхностей применяют: 10%-й раствор однохлористого йода - трехкратно с интервалом мин. по 0,3-0,4 л/кв. м., после предварительного увлажнения по- верхностей 20 %-м раствором поваренной соли из расчета 0,5 л/кв.м. Экспозиция во всех случаях - 12 часов после последнего нанесения дезраствора. По окончании экспозиции кормушки и поилки обмывают водой, помещение проветривают.

Почву на месте падежа, вынужденного убоя больного животного или вскрытия трупа животного, павшего от сибирской язвы, орошают р-ром хлорной извести, содержащем 5 % активного хлора, из расчета 10 л/кв. м.. После этого почву перекапывают на глубину см, перемешивают с сухой хлорной известью, содержащей не менее % активного хлора, из расчета на 3 части почвы 1 часть хлорной извести. После этого почву увлажняют водой. Обеззараживание почвенных очагов сибирской язвы проводят бромис- тым метилом в соответствии с действующими инструкциями. После обеззараживания почвенный очаг считается ликвидированным и соответствующие ограничения снимаются. Спецодежду, щетки, скребницы, ведра и другой мелкий инвентарь обеззараживинвентарь обеззараживают путем погружения на 4 часа в 1 %-й активированный раствор хлорамина, 4 %-й раствор формальдегида или кипятят в 2 %-м растворе кальцинированной соды не менее 90 минут. Меховые изделия, кожаную, резиновую обувь и другие портящиеся при указанном выше методе дезинфекции вещи обеззараживают парами формальдегида в пароформалиновых камерах при расходе 250 мл. формалина на 1 куб. м объема камеры, температуре 58-59°С и экспозиции 3 часа. Ценные меха обрабатывают в специальных герметических камерах бромистым метилом (в соответствии с инструкцией).

Ежеквартальная динамика неблагополучия по сибирской язве (КРС, МРС, свиньи, лошади) за г. г. ГодыКварталы IIIIIIIV

Ежеквартальная динамика заболеваемости по сибирской язве (КРС, МРС, свиньи, лошади) за г. г. ГодыКварталы IIIIIIIV По данным ИАЦ Россельхознадзора

Сибирская язва (по данным ИАЦ Россельхознадзора) г. - Ситуация: стационарное неблагополучие, в первую очередь, за счет наличия почвенных очагов инфекции - Вакцинозависимость - Очаговая инцидентность (п = 7) = 4,1 - Регистрация почвенных очагов не совершенна. Данные, представленные в «Кадастре» значительно выше количества учтенных очагов в субъектах РФ - В течение года заболевание регистрировалось в трех субъектах РФ: - у свиней в Воронежской области в первом квартале (заболело одно животное); - у КРС в Курской области (3 квартал) и Р.Северная Осетия (4 квартал) - заболело по одному животному

Сибирская язва (по данным ИАЦ Россельхознадзора) г. В 2010 г зарегистрировано 11 случаев сибирской язвы животных Неблагополучие по заболеванию выявлено в следующих ре-гионах: Республики- Дагестан (2н.п., заболела 1 голова КРС и 1 голова МРС), Чечня (2н.п., заболело 2 головы КРС), Калмыкия (1н.п., заболела 1 голова КРС). Ставропольский край (1н.п., заболела 1 голова КРС), Краснодарский (1н.п., где заболело 152 головы КРС и 2 лошади). Волгоградская область (1н.п., заболела 1 голова КРС), Рос- товтовская (1н.п., заболела 1 свинья), Омская (2н.п., забо- лело 2 лошади) Эпидемические пороги по неблагополучию и заболеваемости в 4-ом квартале не превзойдены. Краткосрочный тренд по неблагополучию убывающий, по заболеваемости –возрастающий. Поквартальная динамика неблагополучия крайне изменчива: от 0 до 8 вспышек.

Сибирская язва у человека: симптомы и профилактика