Оценка бактерицидности растворов дезинфицирующих средств методом Аржакова и его модификацией Исполнитель: Давыдова Инна, ученица 11 специализированного класса МБОУ Краснообской СОШ 1 Научный руководитель: Леонов Сергей Владимирович, к.б.н.,научный сотрудник лаборатории болезней птиц ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии

Цели исследования: отработка метода оценки бактерицидного действия дезинфектантов по Аржакову отработка метода оценки бактерицидного действия дезинфектантов по Аржакову Задачи исследования: поиск возможностей его модификации (использование другой среды) поиск возможностей его модификации (использование другой среды) отработка технологии постановки метода Аржакова на изолятах бактерий, выделяемых с объектов вет.контроля Птицефабрик специалистами лаборатории. отработка технологии постановки метода Аржакова на изолятах бактерий, выделяемых с объектов вет.контроля Птицефабрик специалистами лаборатории.

Дезинфекция, стерилизация, антисептика ГруппаМикобактерииГрибыБактерии Гр+Бактерии Гр-Вирусы АльдегидыЭЭЭЭЭ СпиртыЭЭЭЭ ФенолыЭЭЭЭ ЧАС ОГРЭ ПерекисиЭЭЭЭЭ ЙодЭЭЭЭ ХлорЭЭЭЭЭ Антимикробная активность дезинфектантов Широкая изменчивость чувствительности к дезинфектанту внутри каждой группы микроорганизмов Дифференциальные признаки стерилизации, дезинфекции и антисептики. ПризнакиСтерилизацияДезинфекцияАнтисептика Область применения Объекты внешней среды Тело человека или животного Средства воздействия Физические, реже химические и механические Физические, химические, механические Химические, реже физические, механические, биологические. Требуемая полнота деконтаминации Полная, универсальная Селективная

Методы оценки чувствительности к дезинфектантам Метод тест-объектов Метод тест-объектов Метод вертикальной диффузии Метод вертикальной диффузии Суспензионный метод Суспензионный метод Метод Аржакова Метод Аржакова

Метод Аржакова дата утверждения - 21 июня 2001 года, протокол заседания Ученого Совета ИЭВСиДВ Россельхозакадемии - 5 Основные этапы проведения исследования по методу Аржакова: V=π r2 h

Эксперимент 1. Замена питательной среды Мюллера-Хитона (в оригинальном методе) на питательную среду БТН-1. Питательные среды – сравниваемые среды готовим по стандартной прописи. Питательные среды – сравниваемые среды готовим по стандартной прописи. В эксперименте используем стерильные чашки Петри диаметром 90 мм (внутренний диаметр 83 мм). В эксперименте используем стерильные чашки Петри диаметром 90 мм (внутренний диаметр 83 мм). В каждую чашку Петри разливаем дозатором по 20 мл остуженной среды (толщина агарового слоя 3,7 мм). В каждую чашку Петри разливаем дозатором по 20 мл остуженной среды (толщина агарового слоя 3,7 мм). Диаметр пробойника – 8 мм Диаметр пробойника – 8 мм В качестве тест-культуры используем изолят кишечной палочки (E.coli, выделен из содержимого кишечника цыпленка-бройлера, изолят не патогенен для белых мышей). В качестве тест-культуры используем изолят кишечной палочки (E.coli, выделен из содержимого кишечника цыпленка-бройлера, изолят не патогенен для белых мышей). Тест-дезинфектнаты, вносимые в лунку по 200 мкл (до краев): Тест-дезинфектнаты, вносимые в лунку по 200 мкл (до краев): Моклавит (0,75% для орального применения), Моклавит (0,75% для орального применения), Вироцид (0,5% раствор для орального применения), Вироцид (0,5% раствор для орального применения), Бромосепт (0,1% растворы орального применения). Бромосепт (0,1% растворы орального применения). Тестируемые растворы готовили разбавлением исходного (маточного) раствора дистиллированной водой. Тестируемые растворы готовили разбавлением исходного (маточного) раствора дистиллированной водой. Эксперимент проводили в десяти повторах. Эксперимент проводили в десяти повторах. Полученные результаты обрабатывали статистически (используя критерий достоверной разницы Стьдента), с помощью MS Excel. Полученные результаты обрабатывали статистически (используя критерий достоверной разницы Стьдента), с помощью MS Excel. Условия эксперимента:

Эксперимент 1. Замена питательной среды Мюллера-Хитона (в оригинальном методе) на питательную среду БТН-1. Результаты проведенных исследований Вывод: полученные результаты свидетельствуют об отсутствии достоверных различий в полученных результатах с использованием среды Мюллера-Хитона и БТН-1 (во всех результатах P>0.05)

Эксперимент 2. Тестирование модифицированного метода Аржакова при подборе эффективной концентрации Криодеза для послеубойной обработки тушки бройлера. Условия эксперимента: Питательная среда – БТН-1, готовим по стандартной прописи. Питательная среда – БТН-1, готовим по стандартной прописи. В эксперименте используем стерильные чашки Петри диаметром 90 мм (внутренний диаметр 83 мм). В эксперименте используем стерильные чашки Петри диаметром 90 мм (внутренний диаметр 83 мм). В чашки Петри разливаем агар дозатором по 22 мл (толщина агарового слоя 4 мм). В чашки Петри разливаем агар дозатором по 22 мл (толщина агарового слоя 4 мм). Диаметр пробойника – 8 мм. Диаметр пробойника – 8 мм. В качестве тест-культуры используем изоляты Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) и Proteus spp (бактерии рода Протей) и кишечную палочку (E.coli). Данные изоляты выделены из ванн первичного охлаждения убойного цеха птицепереобатывающего Предприятия сотрудниками лаборатории. В качестве тест-культуры используем изоляты Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) и Proteus spp (бактерии рода Протей) и кишечную палочку (E.coli). Данные изоляты выделены из ванн первичного охлаждения убойного цеха птицепереобатывающего Предприятия сотрудниками лаборатории. Тестируемые концентрации Криодеза (от 0,05-0,09% раствор по содержанию ДВ- см. на инструкцию, рассчитай как готовить раствор на 10 мл). Тестируемые концентрации Криодеза (от 0,05-0,09% раствор по содержанию ДВ- см. на инструкцию, рассчитай как готовить раствор на 10 мл). Тестируемые растворы Криодеза готовили разбавлением исходного (маточного) раствора дистиллированной водой. По формуле: Тестируемые растворы Криодеза готовили разбавлением исходного (маточного) раствора дистиллированной водой. По формуле: Р = Ро х Ср / С Р = Ро х Ср / С где Р – количество (масса) Криодеза, необходимое для приготовления рабочего раствора, кг; где Р – количество (масса) Криодеза, необходимое для приготовления рабочего раствора, кг; Ро – количество (масса) рабочего раствора, кг; Ро – количество (масса) рабочего раствора, кг; Ср - требуемая концентрация (массовая доля) НУК в рабочем растворе; Ср - требуемая концентрация (массовая доля) НУК в рабочем растворе; С - концентрация (массовая доля) НУК в Криодезе (в нашем случае - 12%). С - концентрация (массовая доля) НУК в Криодезе (в нашем случае - 12%). Эксперимент проводили в трех повторах. Эксперимент проводили в трех повторах. Полученные результаты обрабатывали статистически (используя критерий достоверной разницы Стьдента), с помощью MS Excel. Полученные результаты обрабатывали статистически (используя критерий достоверной разницы Стьдента), с помощью MS Excel.

Эксперимент 2. Тестирование модифицированного метода Аржакова при подборе эффективной концентрации Криодеза для послеубойной обработки тушки бройлера. Результаты проведенных исследований Вывод: Из полученных данных видно, что Криодез эффективен против кишечной палочки (при концентрации НУК 0,05% и выше), синегнойной палочки (при концентрации НУК 0,06% и выше). И абсолютно не эффективен против изолята протея.

Выводы метод оценки бактерицидности растворов дезинфицирующих веществ, предложенных Аржаковым с соавторами технически прост и не затратен. Позволяет проводить тестирование различных концентраций дезинфектантов, применяемых в пищевой промышленности, применяемых в присутствии животных и птицы. метод оценки бактерицидности растворов дезинфицирующих веществ, предложенных Аржаковым с соавторами технически прост и не затратен. Позволяет проводить тестирование различных концентраций дезинфектантов, применяемых в пищевой промышленности, применяемых в присутствии животных и птицы. замена питательной среды Мюллера-Хитона на среду БТН-1 никак не сказалась на чувствительности метода. замена питательной среды Мюллера-Хитона на среду БТН-1 никак не сказалась на чувствительности метода. при использовании данного метода необходимо соблюдать равномерную толщину агарового слоя. В противном случае наблюдается искажение результата по причине неравномерной диффузии. при использовании данного метода необходимо соблюдать равномерную толщину агарового слоя. В противном случае наблюдается искажение результата по причине неравномерной диффузии.

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ