1 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Сравнительные исследования растворения и заявки Всемирная организация здравоохранения Семинар «Качество лекарственных средств, GMP и биоэквивалентность Киев, Украина 3-7 октября 2005 г. Theo Dekker, D.Sc., consultant to WHO Research Institute for Industrial Pharmacy North-West University, Potchefstroom, South Africa

2 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Что такое исследования растворения? Таблетки и капсулы (обыкновенные) Они позволяют измерить долю (%) API, который (1) высвободился из таблетки/капсулы и (2) растворился в растворяющей среде в ходе контролируемого исследования на протяжении определенного отрезка времени Прежде всего таблетка разрушается Только после этого API может подвергнуться растворению Медленное разрушение медленное растворение % растворенного API устанавливается с помощью валидированных методов: UV/VIS, HPLC, AA, GC, etc Исследования растворения также применимы к суспензиям и суппозиториям

3 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Глоссарий Твердые лекарственные формы для перорального применения Немедленное высвобождение обычно обозначает, что 75% API растворилось в течение 45 минут Быстрое растворение: 85% in 30 мин Очень быстрое растворение : 85% in 15 мин За рамками презентации Лекарственные формы усовершенствованного высвобождения (см. Int.Ph., BP, USP) Формы целенаправленно модифицированного высвобождения (замедленного) Длительного высвобождения (пролонгированного) более медленное прохождение через ЖКТ Отсроченного высвобождения (таблетки, покрытые кишечнорастворимой оболочкой) устойчивость в кислой среде желудка и разрушение в содержимом тонкой кишки

4 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Что такое многопунктовое растворение? В ходе многопунктового растворения Несколько ( 3) образцов извлекаются из растворяющей среды в течение исследования растворения В заранее определенные моменты времени и Выясняют % растворенного API в каждом образце График зависимости % растворившегося API от времени: Профиль растворения

5 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Многопунктовое растворение Примеры профилей растворения

6 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Сравнительные исследования растворения Принципы Сравнивают два или более препарата или серии, содержащих одинаковый API The strength of products / batches may or may not be the same (в зависимости от целей исследования) Растворение проводится в одних и тех же условиях, т.е. Аппаратура, среда, объем, скорость чередования, температура. Минимизация вероятности изменения условий эксперимента Отбор проб проводят в одной временной точке и сравнивают данные (профили растворения) При подсчетах: помнить и учитывать изменение объема растворяющей среды в результате растворения

7 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Сравнительные исследования растворения Определение сходства профилей Два условия, чтобы определить совпадение профилей растворения двух препаратов/серий в определенной растворяющей среде : 1.Если оба препарата испытуемый и референтный демонстрируют растворение 85% API в течение 15 минут, профили считаются одинаковыми Расчетов не требуется Если это не так, применяется п. 2 2.Расчет объема f 2 (фактор схожести): Если f 2 50, обычно профили рассматриваются как идентичные

8 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Сравнительные исследования растворения Фактор схожести f2 n = количество временных точек R(t) = значение % растворившегося API во временной точке x для референтного препарата T(t) = значение % растворившегося API во временной точке x для референтного препарата Минимум 3 временных точки (не считая нуля) 12 единиц (каждая в отдельной емкости для растворения) длдя каждого препарата (для официальных целей) Если оба препарата достигли 85% растворения, достаточно учесть одно измерение RSD на следующей временной точке 10%

9 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Сравнительные исследования растворения Условия растворения (дизайн исследования) Аппаратура (выбор) Paddle, 50 (75) rpm or Basket, 100 rpm Растворяющая среда Во всех трех средах для всестороннего сравнения 1.Буфер pH 6.8 или воспроизведенный интестинальный секрет без ферментов 2.Буфер pH M HCl или буфер pH 1.2 или воспроизведенный желудочный сок без ферментов ( simulated gastric fluid without pepsin SGF) Объем среды900 ml или менее Температура37°C ± 0.5°C Точки отбора проб10, 15, 20, 30, 45, (60, 120) мин. (обычно) Единицы (для каждого) 12 для официальных исследований

10 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Типичные временные точки Таблетки (капсулы) немедленного высвобождения Обоснование: 1.Условие 1 85% растворение обоих препаратов за 15 минут Таким образом, временная точка 15 минут является основной, определяющей 2.Условие 2, для подсчета f 2 требуется не менее 5 точек После растворения 85 % (обеих таблеток) достаточно учитывать только одно измерение Таким образом точка 20 минут первая на очереди (если на 15 минуте выполнено 1 е условие) PointTime

11 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Сравнительные исследования растворения Сравнение препаратов Когда параметры растворения двух препаратов (серий) считаются одинаковыми? Профили должны совпадать для всех трех сред нестабильность или нерастворимость рассматриваются как неприемлемый результат, но должны быть отражены и объяснены

12 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 1 Установление совпадения профилей Example 1-B % API dissolved Time (min) Tablet D (Ref) Tablet E (Test) f2 требуется? Yes f 2 (n = 3 ?) 64 (similar) Example 1-A % API dissolved Time (min) Tablet A (Ref) Tablet B (Test) f2 требуется? No, 85% in 15 min f 2 (n = N/A ?) profiles similar

13 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 1 Установление совпадения профилей (продолж.) Example 1-D % API dissolved Time (min) Tablet A (Ref) Tablet Y (Test) f2 требуется? Yes f 2 (n = 3 ?) 31 (not similar) Example 1-C % API dissolved Time (min) Tablet X (Ref) Tablet Y (Test) f2 требуется? Yes f 2 (n = 6 ?) 74 (similar)

14 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 2 Ciprofloxacin: две серии одного препарата Apparatuspaddle at 50 rpm Среда 1: SGF (900 ml) Среда 2: ацетатный буфер pH 4.5 (900 ml) Среда 3: фосфатный буфер pH 6.8 (900 ml) Temp.:37°C ± 0.5°C (start, middle, end) Единицы:по 12 таблеток каждой из серий в каждой среде Отбор проб:Ручной, через стационарный фильтр (0.45 μm PVDF unit) at 10, 15, 20, 30 and 45 minutes Анализ:HPLC анализ для ципрофлоксацина ProductManufacturerBatch NrExpiry dateStatus Cipro 500ABC Ltdxxx06/2007Test Cipro 500ABC Ltdzzz07/2007Reference

15 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 2 Ciprofloxacin: две серии (продолж.) Заключение: Профили для всех трех сред могут рассматриваться как одинаковые / не одинаковые, поскольку ………… MediumSGF, pH 1.16Buffer pH 4.5Buffer pH 6.8 % dissolved Time (min)b/n xxxb/n zzzb/n xxxb/n zzzb/n xxxb/n zzz совпадение ? n = 5 ? 85% in 15 min. f 2 = 83 ( 50)

16 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 2 Ciprofloxacin: две серии (продолж.) SGF without pepsin, pH 1.16Acetate buffer pH6.8

17 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 2 Ciprofloxacin: две серии (продолж.) Phosphate buffer pH 6.8

18 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Вопросы: 1.Какого уровня растворения способен достичь ципрофлоксацин (таблетки 250 мг) в среде с уровнем pH 6.8? 2.Повлияет ли изменение размера частиц на уровень растворения? X. Yu et al. Pharm. Research, 11, (1994) Ø Ciprofloxacin (продолж.) Ø Растворимость зависит от pH: Высокая растворимость при pH < 6 100% растворение происходит при pH 4.5 и pH 1.16 При pH 6.8 и 40°C растворимость около 0.2 mg/ml Интерпретируйте 40% растворение для дозы 500 mg!! 40°C

19 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 3 Таблетки lamivudine 150 mg + zidovudine 300 mg Источник, документы ВОЗ: Непрерывный мониторинг антиретровирусных препаратов в рамках проекта преквалификации ВОЗ Ongoing Monitoring of Antiretroviral Products as Part ofWHOs Prequalification Project. Journal of Generic Medicines (принято к публикации на январь 2006) Образцы, полученные от Проекта PQ или приобретенные/заказанные Apparatus:paddle at 75 rpm Среда:900 ml 0.1 M HCl, 37°C Время отбора проб:5, 10, 15, 20, 30 and 45 minutes Анализ:HPLC Данные для каждого из APIs в следующей таблице

20 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 3 Таблетки lamivudine 150 mg + zidovudine 300 mg (2) Time (min) Lamivudine % растворения, заявленный в маркировке Combivir®Gen-1Gen-2Gen-3Gen in 15 min ? Reference no f2f2 21

TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 3 Таблетки lamivudine 150 mg + zidovudine 300 mg (3) Time (min) % Zidovudine % растворения, заявленный в маркировке Combivir®Gen-1Gen-2Gen-3Gen in 15 min ? Reference no f2f2 20

22 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 3 Таблетки lamivudine 150 mg + zidovudine 300 mg (4) Заключение (с учетом 0.1 M HCl как единственной среды растворения) 1.3 препарата демонстрируют совпадение профиля с таковым для Combivir® ( 85% за 15 мин) 2.Профиль для Combivir® и Gen-1 не совпадают Препараты по-прежнему должны продемонстрировать биоэквивалентность Профили растворения APIs для отдельных препаратов совпадают (для всех 5) Пример: см. профили для Combivir® и Gen-1

23 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 3 Таблетки lamivudine 150 mg + zidovudine 300 mg (5) Combivir ® dissolution profileGen-1 dissolution profile 0.1 M hydrochloric acid Отмечается совпадение профилей API у каждого препарата Высокорастворимые APIs = растворение контролируется по времени разрушения Насколько важен размер частиц APIs?

24 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Пример 4 Таблетки clarithromycin – пропорциональный состав 2 дозы изготовлены из одного гранулята f 2 = 31 Профили не совпадают ! согласно BCS, растворимость API в буфере pH 6.8низкая Ка вы думаете, размер частиц может оказать влияние на профиль?

25 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Влияние размера частиц на растворение таблеток Nevirapine (источник: Ranbaxy) 1 Viramune 2 Nevipan 90% < 31 3 Nevipan 90% < 81 f 2 : 1 vs 2 = 72 f 2 : 1 vs 3 = 31 X f 2 : 2 vs 3 = 34 X 1 2 3

26 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Заявки 1.Выбор состава на стадии разработки Путем сравнения профилей растворения инновационного препарата и рассматриваемого Намек: начните с препарата сравнения и изучите: Немедленное высвобождение? Быстрое растворение? Очень быстрое растворение? На ранних стадиях могут помочь исследования разрушения Это должно быть основной стратегией R&D для максимального обеспечения биоэквивалентности

27 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Заявки (продолж.) 2.В рамках программы преквалификации существует требование предоставлять сравнительные данные растворения для серий биологических и инновационных препаратов Для некоторых серий аналогично использованию при исследовании биоэквивалентности ! Подача отчета с данными, сравнительными профилями и результатами обсуждения (см. требования к отчету) Этот отчет образует часть отчета о фармацевтической разработке Рекомендуется включение такого же отчета в структуру отчета об исследовании биоэквивалентности

28 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Заявки (продолж.) 3.Подтверждение биоэквивалентности in vivo для одной или более лекарственной формы FPP с невысокой дозой (дозами) может быть отклонено по причине: 1.использования в исследовании BE in vivo более высокой дозы, чем у препарата сравнения 2.подтверждения идентичности профилей растворения, 3.если препарат с более низкой дозой пропорционально соответствует по составу препарату с более высокой дозой (bio-batch) и 4.если выполнены все фармакокинетические требования См. руководства по биологическим препаратам, где рассматриваются также обратные ситуации

29 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Заявки (продолж.) 4.Сравнение параметров растворения основных (промышленных) серий Подтвердить идентичность in vitro- параметров таких серий Чрезвычайно важно для сохранения эффективности и безопасности Как правило, исследования ВЕ серии биологического препарата проводятся однократно на этапе разработки Необходимо подтвердить, что препарат сохраняет параметры растворения в процессе производства Данные этих исследований следует подавать в составе досье как часть отчета о разработке FPP

30 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Заявки (продолж.) 5.Выбор спецификаций растворения для выпуска препарата и определения стабильности 1.Установление условий и критериев приемлемости 2.Для этих целей можно использовать профили растворения bio-batch 3.Спецификации растворения должны позволять определить неадекватные параметры высвобождения для промышленных серий Завышенные пределы растворения не имеют качественной селективности 4.Пример: Combivir ® (на основании Примера 3) 80% (Q) за 20 (15?) минут для обоих APIs при условиях, описанных в Примере 3

31 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Заявки (продолж.) 6.Заявка на внесение пострегистрационных изменений Требование для внесения определенных изменений: подтвердить, что профили измененной и текущих серий совпадают См. руководства по изменениям/отклонениям

32 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Отчетность Данные сравнительных исследований растворения Полный отчет, включающий 1.Цели исследования 2.Информацию о препарате/серии Номер серии, производитель/дата выпуска, упаковка etc. CoA и объем серии (и BMR для отчета о биологическом исследовании) 3.Условия и методы растворения 4.Аналитические методы или ссылки на раздел досье 5.Результаты (% растворившегося API) Табличные Графические Определение / расчет совпадения 6.Заключение

33 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Руководства WHO Prequalification 1.Supplement 1 [for use from July 2005 (CPH25)] to: Guideline on Submission of Documentation for Prequalification of Multi-source (Generic) Finished Pharmaceutical Products (FPPs) Used in the Treatment of HIV/AIDS, Malaria and Tuberculosis Dissolution testing Others Guidance for Industry. Waiver of In-Vivo Bioavailability and Bioequivalence Studies for Immediate-Release Solid Oral Dosage Forms Based on a Biopharmaceutics Classification System. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), August CPMP Note for Guidance on the Investigation of Bioavailability and Bioequivalence. The European Agency for the Evaluation of Medicinal Products CPMP/EWP/QWP/1401/98, July 2001

34 TG Dekker – WHO, Malaysia Feb 2005 Некоторые выводы Сравнительное исследование растворения Представляет собой важнейшую составляющую R&D препаратов твердых лекарственных форм для перорального применения (в т.ч. суспензий), Поддержка биологических исследований, Требуется для сравнения фармацевтических параметров высвобождения в промышленных сериях, Используется для установления спецификаций растворения, Пригодится на случай внесения пострегистрационных изменений NB!: проводить исследования в трех средах, в полном соответствии с требованиями руководств, отбирать пробы для анализа через четкие промежутки времени Уметь определять совпадение профилей