Лекция 5 Наталья Володина

Транскрипция

Транскрипция, трансляция Альбертс глава 5

Матрица

Основы полимеризации

Цепи ДНК

РНК полимераза (прокариоты)

Промотер

Консервативные последовательности

Инициация транскрипции

Регуляция транскрипции у бактерий

Негативная регуляция

Терминация транскрипции 1

2 - фактор

Эукариотическая РНК полимераза –Полимераза I – синтезирует пре- рибосомные РНК –Полимераза II - мРНК –Полимераза III - тРНК и 5S рибосомную РНК

Элонгация цепи, окончание транскрипции

Трансляция (синтез белка)

Синтез белка Инициация, элонгация и терминация Активация тРНК присоединением соответствующей аминокислоты Пост-трансляционная модификация – добавление липидов, сахаров, фосфатов, сульфатов и.т.д.

Пептидная связь –Костяк белка –Функция белка определяется боковыми цепями аминокислот его составляющих

Активация Связь между анти-кодоном в тРНК и аминокислотой

тРНК Меньше 100 нт. Минимум 32 тРНК L-образная структура

Инициация Сборка рибосомы –70 S из 30S and 50S субъединиц у прокариот –40S + 60S = 80S у эукариот Требует факторов инициации Требует (ф)метионил-тРНК

Комплекс инициации у прокариот Требуются факторы инициации Последовательность Шайна- Дальгарно (Shine-Dalgarno sequence,) была описана австралийскими учеными Джоном Шайном и Линн Дальгарно и является сайтом связывания рибосом на молекуле мРНК прокариот, обычно на расстоянии около 10 нуклеотидов до стартового кодона AUG

Эукариотическая инициация Эукариотичеккая мРНК имеет специальные белки на 5 и 3 конце (связываются с 5 CAP и 3 poly A) Первый AUG после CAP – начало трансляции

Элонгация и терминация Элонгация Аминоацилированная тРНК устанавливается на рибосоме в месте кодона Пептид переносится на эту тРНК Цикл повторяется Терминация –Стоп кодон соединяется со специальным белком вместо тРНК

Процессинг Начинается с момента синтеза белка Требует специальных ферментов Может происходить разрезание пептидной цепи с образованием конечного продукта (например, инсулин)

Рибосома Субъединицы состоят из рРНК и белков, соединяются только для трансляции

Компоненты рибосомы –Малая субъединица –16 S рРНК у прокариот и 18S рРНК у эукариот –Ее последовательность используется для установления эволюционного родства между организмами –+ белки

Компоненты рибосомы II Большая субъединица (на примере прокариот) –23 S rRNA –5 S rRNA –26 белков

Бороздка между субъединицами –Место связи анти-кодон- кодон –Пептидная цепь выходит оттуда тоже

Эукариотические рибосомы 40S + 60S –18S, 28S + 5.8S rRNA +5S