Проведение поведенческих экспериментов в условиях SPF вивария Заведующий виварно- эксперименальным комплексом НИИ Митоинженерии МГУ, к.б.н. Ловать М.Л.

Исследование поведения животных Доклиника: специфическая активность скрининг Фундаментальные исследования: Этология Нейробиология Фармакология

Специфика постановки поведенческих опытов Плотный контакт с животными Большая продолжительность работ Большое количество животных Громоздкое оборудование, непосредственно контактирующее с животными Риск инфицирования исследователя и животного Физическая, психическая нагрузка Необходимость поддерживать одинаковые условия в течение всего эксперимента (требования к помещению) Жесткие временные рамки опыта (протокол) Высокая субъективность измерений (СОПы) Невозможность повторения опыта (отклонения) Сложность интерпретации поведения (комиссия по биоэтике) Решающее значение следования принципам GLP:

Проблемы в содержании животных Проблемы микроклимата: Колебания температуры, влажности Плохая вентиляция Неравномерное освещение Отсутствие нормального суточного ритма у животных Проблемы ухода за животными: отсутствие воды, некачественный корм и нестандартная вода, пылящая подстилка, запах аммиака нерегулярное посещение животных заболевания животных (диарея, клещ, гепатит мышей и крыс и т.п.) Искажение результатов научных исследований ID Customer ID RAT ASSESSMENT PLUS ELISA SEND--- ELISA PVM--- ELISA SDAV/RCV --+ ELISA KRV--- ELISA H-1--- ELISA GD-7--- ELISA RE ELISA MPUL--+ ELISA LCMV--- ELISA MAD ELISA HANT--- ELISA CARB--- ELISA CPIL--+ ELISA ECUN--- ELISA NS IFA SDAV/RCV ++ IFA KRV ++ IFA MPUL + IFA CPIL ++ IFA RPV +++

Что для нас означают стандарты GLP: (Good Laboratory Practice -надлежащая лабораторная практика) Система норм, правил и указаний, для получения достоверного и воспроизводимого результата лабораторных исследований. Животное = биологическая модель для получения таких результатов Главная задача GLP - обеспечить возможность полного прослеживания и восстановления всего хода исследования по бумагам. Оптимально работать на животных SPF категории * SPF (Specific Pathogen Free) – категория животных с контролируемой микрофлорой Конвенциональные животные – здоровые животные, содержащиеся по стандартам GLP, у которых микрофлора не мониторируется (а не с помойки)

ПОДДЕРЖАНИЕ SPF-СТАТУСА ВОЗМОЖНО ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ: Гнотоизолятора Системы индивидуально вентилируемых камер (IVC) Вивария барьерного типа

1.Достаточно большое пространство для проведения эксперимента 2.Защита от заражения в процессе тестирования, транспортировки, манипуляций 3.Сведение различий в условиях содержания и опыта к минимуму (минимальность адаптации животных) 4.Возможность проведения нескольких тестов одновременно (в том числе в хронических экспериментах) 5.Возможность работы нескольких экспериментаторов одновременно Требования к блоку исследования поведения: Еженедельная дезинфекция оборудования, помещений

Мы: виварно-экспериментальный комплекс НИИ Митоинженерии МГУ - барьерного типа Три технологически разделенных блока, общей площадью 610 кв.м. 1.Административно- бытовой комплекс 2.Технологический сектор 3.SPF-зона В виварии контролируются условия содержания животных : избыточное давление в SPF зоне Па воздухообмен – объемов/час температура – 22+2 С влажность % световой день - 12 часов системаGLP-SCADA (параметры микроклимата, перемещения, доступ ) Резервирование, мониторинг всех процессов: вода воздух эл-во материалы люди

Особенности оснащения помещений для поведенческих экспериментов Зонирование лаборатории SPF Соседство с технологической зоной (СО2 наркоз, компьютер, установки) Возможность дезинфекции помещений и крупного оборудования (УФ, Н2О2) Контроль качества дезинфекции: Экспресс АТФ- тест Микробиологический мониторинг Heath monitoring сентинел ! Большие затраты !

Разборный модуль для исследования поведения ООО «НПК Открытая Наука» - Оснащенность «под ключ» -Быстрая сборка в любом помещении -Простота монтажа -Легкость обслуживания -Стандартность условий - Взаимозаменяемость установок (например,хирургия- поведение-эмбриология) -Относительно невысокая цена ! Для поддержания SPF- статуса должна комплектоваться системой обеспечения и дезинфекции

«SPF –капсула» площадью 18 м2 (пример) 1.- поведенческие установки 2. стол операторов 3. зона передержки и манипуляции с животными (ламинар) 4. Склад «чистый» 5. Стол, мойка и стеллажи для «грязных» предметов и манипуляций 6. Банкетка (переобувание) и вешалка (внутренняя одежда) 7. Душ фильтр приток вытяжк а Сопутствующее оснащение: 1.Мойка большая 2.Стиральная машина 3.Стерилизатор 4.Склады 5.Архивы 6.офис

Компактное, разборное (складное) Не содержит хрупких, мелких, пористых деталей, полостей (легко моется), Не боится стерилизации (едких р- ров или температуры), Соответствует стандартным методикам эксперимента Требования к оборудованию

Спасибо за внимание!