ЗЯСУВАННЯ МОЖЛИВОСТІ ЗБЕРЕЖЕННЯ АНТИОКСИДАНТНОЇ ТА ПРОТИЗАПАЛЬНОЇ ДІЇ ЕКСТРАКТІВ ПЛАЦЕНТИ ТА ЇХ ОКРЕМИХ ФРАКЦІЙ НА СУСПЕНЗІЯХ ЕРИТРОЦИТІВ, ТРОМБОЦИТІВ. - презентация

1 ЗЯСУВАННЯ МОЖЛИВОСТІ ЗБЕРЕЖЕННЯ АНТИОКСИДАНТНОЇ ТА ПРОТИЗАПАЛЬНОЇ ДІЇ ЕКСТРАКТІВ ПЛАЦЕНТИ ТА ЇХ ОКРЕМИХ ФРАКЦІЙ НА СУСПЕНЗІЯХ ЕРИТРОЦИТІВ, ТРОМБОЦИТІВ ТА ДРІЖДЖІВ S. СEREVISIAE ПІСЛЯ ЗАМОРОЖУВАННЯ- ВІДІГРІВУ ПЛАЦЕНТИ І ЇЇ ЕКСТРАКТІВ

2 МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ Матеріалом досліджень служили водно–сольові екстракти та окремі фракції плаценти людини Методи: Гель-хроматографія Спектрофотометрія - вміст білків - антиоксидантні властивості - визначення відносного вмісту метгемоглобіну в еритроцитах - дихальна активність дріжджів ЕПР - оцінка стану цитозолю еритроцитів - дихальна активність дріжджів Хемілюмінесценці

3 Вплив свіжоотриманих ЕПЛ і окремих фракцій на вміст метгемоглобіну в еритроцитах з нітритом натрію. Нітрит здатен проникати крізь мембрану еритроцитів та взаємодіяти з оксигемоглобіном, перетворюючи його на мет-форму. Показано що, при попередній експозиції еритроцитів з екстрактами плаценти людини та їх фракціями вони проявляють захисну дію по відношенню до окисного стресу еритроцитів викликаного нітритом натрію, що проявляється у відносному вмісті метгемоглобіну в еритроцитах.

4 Попередня експозиція еритроцитів з цільними ЕПЛ і їх фракціями дозволяє зберегти структурно-динамічний стан цитозолю еритроцитів більш близьким до контролю Вплив ЕПЛ на рухливість спін-зонду в цитозолі еритроцитів в умовах окисного стресу, викликаного нітритом натрію: – контроль, – після експозиції з нітритом натрію, – після одночасної експозиції з нітритом натрію та ЕПЛ Вплив ЕПЛ і окремих фракцій на рухливість спін- зонду в цитозолі еритроцитів в умовах окисного стресу, викликаного нітритом натрію: – контроль; – еритроцити+12 кДа+нітрит – еритроцити+ЕПЛ+нітрит; Δ – еритроцити+65 кДа+нітрит; – еритроцити+5 кДа+нітрит; – еритроцити+нітрит

5 Вміст метгемоглобіну в еритроцитах в умовах окисного стресу під дією нітриту натрію Вплив попередньої експозиції з ЕПЛ на еритроцити в умовах окисного стресу, викликаного нітритом натрію та перекисом водню Рівень гемолізу еритроцитів в умовах окисного стресу під дією перекису водню Встановлено, що заморожування до -20˚С або до -196˚С і наступний відігрів плаценти зберігають властивості отриманих із них екстрактів захищати еритроцити від окисного стресу на високому рівні

6 Показано, що як свіжоотримані ЕПЛ так екстракти отримані із плаценти після її заморожування до -20˚С або -196˚С, знижують дію перекису водню на дріжджі S. cerevisiae, захищаючи їх від впливу окисного стресу. Дослідження впливу експозиції з ЕПЛ на дихальну активність S. cerevisiae в умовах окисного стресу, викликаного перекисом водню Відновлення спін-зонду ТЕМПОН в суспензії S. сerevisiae: – контроль; – H 2 O 2 (10 мМоль/л); – попередня експозиція з ЕПЛ після заморожування. Дихальна активність дріжджів S. cerevisiae під дією перекису водню

7 Дихальна активність дріжджів S. Cerevisiae під дією нітриту натрію Дослідження впливу експозиції з ЕПЛ на дихальну активність S. cerevisiae в умовах окисного стресу, викликаного нітрітом натрію Показано, що як свіжоотримані ЕПЛ так і екстракти отримані із плаценти після її заморожування до -20˚С або - 196˚С, знижують дію нітриту натрію на дріжджі S. cerevisiae, захищаючи їх від впливу окисного стресу.

8 Індукована АДФ агрегація тромбоцитів у ЗТП при попередній експозиції з ЕПЛ та окремими фракціями ЕПЛ із: (А) свіжоотриманої, (Б) замороженої до –196°C, (В) замороженої до – 20°C плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=6) Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на агрегацію тромбоцитів А Б В

9 Пригнічення агрегації тромбоцитів у ЗТП фракціями ЕПЛ та цільними ЕПЛ із: (А) свіжоотриманої плаценти, (Б) замороженої до –196°C плаценти, (В) замороженої до – 20°C плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=6) Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на агрегацію тромбоцитів АБ В

10 Встановлено, що попередня експозиція еритроцитів з ЕПЛ викликає підвищення термостійкості еритроцитів на 18,7±1,9 % відносно контролю. Показано, що більшості фракцій свіжоотриманих ЕПЛ притаманна здатність знижувати температурно-індукований гемоліз еритроцитів. Термогемоліз еритроцитів * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=9) Відсоток зниження термогемолізу еритроцитів фракціями ЕПЛ зі свіжоотриманої плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до цільного ЕПЛ, p < 0,05 (n=9) Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на термогемоліз еритроцитів

11 Вплив заморожування-відігріву екстрактів на зниження температурно-індукованого гемолізу еритроцитів екстрактами та окремими їх фракціями : (А) заморожування до –196°C, (Б) заморожування до – 20°C * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=6) АБ Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на термогемоліз еритроцитів Показано, заморожування-відігрів ЕПЛ зберігають здатність екстрактів та їх фракцій знижувати температурно-індукований гемоліз еритроцитів. Встановлено, що найбільший ефект проявляє фракція ЕПЛ з молекулярною масою кДа.

12 Відсоток зниження термогемолізу еритроцитів екстрактами та окремими їх фракціями із: (А) свіжоотриманої плаценти, (Б) замороженої до –196°C плаценти, (В) замороженої до – 20°C плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=9) АБ В Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на термогемоліз еритроцитів Попереднє заморожування плаценти зберігає пригнічувальну дію ЕПЛ та їх фракцій по відношенню до термогемолізу еритроцитів.