Лекция 10 Аутоиммунные заболевания. Теории возникновения атеросклероза. Общие характеристики лекарственных препаратов Новые способы диагностики. - презентация

1 Лекция 10 Аутоиммунные заболевания. Теории возникновения атеросклероза. Общие характеристики лекарственных препаратов Новые способы диагностики

2 АУТОИММУННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ Аутоиммунные заболевания развиваются в результате выработки антител, которые могут взаимодействовать с антигенами собственного организма. Это может происходить при: 1)демаскировании антигенов; 2) снятии толерантности: 3) при соматических мутациях; 4) недостаточности антиидиотипических антител; 5) нарушении распознавания "своего" посредством рецепторов, в качестве которых Т-лимфоциты используют антигены главного комплекса гистосовместимости.

3 Демаскирование антигенов Демаскирование антигенов наблюдается в высокодифференцированных органах при нарушении гистогематических барьеров (в головном мозге, хрусталике, яичке, щитовидной железе и др.). В этих органах имеются вещества, которые являются аутоантигенами, поскольку в период формирования иммунной толерантности и в последующем они были изолированы от иммунной ткани гистогематическими барьерами. При нарушении барьеров происходят демаскирование этих аутоантигенов и выработка против них аутоантител. Демаскирование аутоантигенов, скрытых внутри биологических макромолекул, отмечается и в органах, в которых специализированные барьеры отсутствуют. Под действием физических, химических и биологических факторов возможно появление потенциально аутоантигенных детерминант и возникновение аутоаллергической реакции

4 Снятие иммунной толерантности Снятие иммунной толерантности к гаптенам своего организма возможно при замене носителя гаптенов. Известно, что к большому числу антигенов своего организма В-лимфоциты не толерантны. Объясняется это различиями в условиях формирования иммунной толерантности у Т- и В-лимфоцитов. Однако в норме В-лимфоциты не вырабатывают аутоантитела к компонентам собственного организма, так как к ним толерантны Т-лимфоциты. При встрече с этими антигенами Т-лимфоциты не вступают в кооперацию с В- лимфоцитами, без чего нетолерантные В-лимфоциты не вовлекаются в иммунный ответ. Если в организм попадают макромолекулярные антигены, к которым присоединяются собственные гаптены, то Т-лимфоциты начинают реагировать на антигенные носители и кооперироваться с В- лимфоцитами, а последние в свою очередь начинают реагировать на гаптены своего организма, вошедшие в антигенный комплекс с чужеродным носителем. Ко многим веществам в организме поддерживается иммунная толерантность, в основе которой лежит активация антигенами Т- супрессоров. Неблагоприятные влияния на организм, а также наследственные нарушения могут вызвать снижение функции Т- супрессоров и развитие иммунного ответа против нормального компонента организма.

5 Соматические мутации Соматические мутации в различных органах могут привести к появлению клеток, обладающих антигенными свойствами по отношению к своему организму. В большинстве случаев это завершается быстрой элиминацией мутировавшего клона соматических клеток. Мутация иммуноцитов может стать причиной аутоиммунных заболеваний в связи с тем, что приводит к появлению "запретных" клонов, воспринимающих нормальные компоненты организма в качестве антигенов. Появление запретных клонов может происходить и другим путем. Поскольку в нормальном организме у В-лимфоцитов не формируется иммунная толерантность к антигенам своего организма, то мутации первично могут приводить к отмене функции супрессоров или появлению запретного клона хелперов. В результате нетолерантные В- лимфоциты начинают реагировать на нормальные компоненты тканей своего организма. К аутоиммунным заболеваниям, возникающим по этому типу, относят ревматоидный артрит, системную красную волчанку, аутоиммунную гемолитическую анемию и лейкопению. При ревматоидном артрите наблюдается выработка антител к собственному гамма-глобулину крови. В патогенезе системной красной волчанки ведущее значение имеют противоядерные аутоантитела, реагирующие с компонентами ядер клеток крови и тканей.

6 Недостаточность антиидиотипических антител Детерминанта антитела, реагирующая только с данным антигеном, имеет уникальное строение и сама является своеобразным антигеном идиотипом (от греч, idios своеобразный). Существование антиидиотипических антител было установлено экспериментально. Существует предположение, что аутоиммунный процесс может развиться из-за недостаточной активности клона, вырабатывающего антиидиотипические антитела к каким-либо аутоантителам. Данное предположение экспериментально подтверждено при аутоиммунном адъювантном артрите, вызываемом находящимися в адъюванте туберкулезными микобактериями, обладающими двумя антигенами, имеющими общность с антигенами протеогликанов хрящей суставов. Введение животным, больным адъювантным артритом, клонов иммуноцитов, несущих антиидиотипические антитела к противохрящевым антителам, предупреждает или прекращает заболевание

7 Нарушение распознавания свой- чужой Антигены главного комплекса гистосовместимости используются Т- лимфоцитами в качестве рецепторов иммунного распознавания. Это создает возможность ошибки распознавания на основе различной экспрессии антигенов этой системы в клеточных мембранах за счет нарушения селекции клонов иммуноцитов по этим антигенам, которое у Т-лимфоцитов обязательно происходит в вилочковой железе. Эти механизмы аутоиммунной патологии имеют место при аутоиммунных антиген-ассоциированных заболеваниях. В частности, при инсулин- зависимом диабете, когда Т-лимфоциты собственного организма убивают β- клетки островков поджелудочной железы, установлена явная связь с наследованием антигенов группы HLA-DR. Механизм аутоиммунного поражения при инфекции нецитопатогенными вирусами (вирус хориоменингита у мышей и вирус гепатита В у человека). Эти вирусы не вызывают гибели инфицированных клеток, но антигены вирусов экспрессируются зараженными клетками в составе антигенов МНС в своих мембранах, где распознаются Т-лимфоцитами, которые разрушают инфицированные клетки, вызывая тяжелое, иногда смертельное заболевание. Блокада активности Т-лимфоцитов при этих заболеваниях улучшает состояние заболевших, но они становятся вирусоносителями.

8 Теории возникновения атеросклероза Существует несколько теорий возникновения атеросклероза. Каждая выделяет ведущий фактор воздействия, которые несомненно значимы в комплексе. Принято считать, что атеросклероз возникает как «реакция на повреждение» слоя эндотелия, которое может быть вызвано разными причинами. В ответ на метаболические, механические, химические или инфекционные воздействия возникает местное воспаление и нарушение проницаемости эндотелия. Воспаление могут инициировать высокие гемодинамические нагрузки (которые вызывают разрушение интимы), токсины, иммунные комплексы, вирусы. Нарушение целостности эндотелия приводит к секреции факторов роста, миграции моноцитов и образованию жировых отложений. У пациентов с ИБС в период обострения, выявляется повышенное образование характерных для острой фазы воспаления реактантов и цитокинов с местным накоплением клеток воспаления. При хроническом повреждении стенки артерии в ней наблюдается инфильтрация макрофагами, Т- лимфоцитами, секретирующими интерферон, который подавляет синтез коллагена и пролиферацию ГМК. Подтверждением теории воспаления является повышение в плазме крови больных ИБС маркёров воспаления: С-реактивного белка, интерлейкина-6, интерлейкина-8 и др. В настоящее время определение в плазме крови повышенного уровня С-реактивного белка в сочетании с уровнем холестерина является маркёром развития атеросклероза и ИБС.

9 Теории возникновения атеросклероза Повреждение эндотелия сосудов усугубляется взаимодействием компонентов липидного обмена с иммунными факторами. У больных атеросклерозом установлен дисбаланс иммунологических показателей - высокая активность гуморального иммунитета и дефицит Т-клеток в периферической крови. У них обнаружено повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов и иммуноглобулинов, а также снижение количества Т-лимфоцитов и их активности, хотя количество Т-супрессоров повышено. Сами ЛП обладают иммунорегуляторными свойствами: ЛПНП и ЛПОНП могут ингибировать иммунный ответ. Сочетание иммунного поражения сосудистой стенки с гиперлипидемией является реальным условием развития атеросклероза. Нарушения в антиоксидантной системе: процесс свободно- радикального окисления липидов вызывает ряд патологических проявлений (синдром пероксидации): повреждением мембран клеток и внутриклеточных органелл, нарушением активности антиоксидантных и мембранных ферментов, накоплением первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов. Это приводит к окислению ЛП и фосфолипидов, распаду эластических волокон, индуцирует старение коллагена. Мембраны клеток эндотелия артерий очень уязвимы, потому что в их составе много легкоокисляемых фосфолипидов и они контактируют с относительно высокими концентрациями кислорода

10 Теории возникновения атеросклероза Ключевым в атеросклеротическом воспалении считается снижение рецепторного поглощения клетками. Его прямое следствие - накопление в стенке артериальных сосудов ЛПНП с дефицитом эссенциальных полиненасыщенных жирных кислот. Дефицит возникает потому, что их транспортной системой являются именно ЛПНП. На снижение поступления в клетки эссенциальных полиненасыщенных жирных кислот в них компенсаторно синтезируются собственная эйкозатриеновая кислота, и, как результат, появляются провоспалительные лейкотриены. Для образования бляшки необходимо поглощение ЛПНП макрофагами. Для этого накапливающиеся ЛПНП должны быть предварительно модифицированы с последующим возможным связыванием иммуноглобулинами. Этот процесс требует участия нейтрофильных лейкоцитов, высвобождается большое число активных радикалов, участвующих в реакциях перекисного окисления липидов. Именно этими реакциями, системой комплемента, изменением числа связанных с рецепторами сиаловых кислот, в конечном итоге, обеспечивается окисление накапливаемых в крови липопротеидов. В лизосомах макрофагов происходит деградация этих структур, но справиться с этим полностью они не могут. Негидролизованные структуры накапливаются вначале в лизосомах, далее занимают цитоплазму моноцитов, образуя "пенистые" клетки,

11 Требования к лекарственному соединению Химический реагент становится лекарством только в том случае, если: Химический реагент становится лекарством только в том случае, если: он хорошо всасывается достигает тканей-мишеней метаболизируется так, что сохраняется его фармакологическая активность в процессе метаболизации не возникает токсических продуктов

12 Основные понятия фармакокинетики Фармакокинетика это раздел фармакологии, изучающий процессы всасывания, распределения, связывания с белками, биотрансформации и выведения лекарственных веществ. Основные понятия: Скорость элиминации величина, которая определяет скорость удаления препарата из системного кровотока путем биотрансформации (метаболизации) и выведения. Абсорбция величина, описывающая скорость поступления лекарства в системный кровоток из места введения. Площадь под кривой: (AUC – area under the curve) – это интегральный параметр, характеризу ющий общее время нахождения лекарственного препарата в крови и его концентрацию, т.е. величина, характеризующая суммарное количество лекарственного средства в кровеносном русле после его принятия Биодоступность - количество достигшего плазмы крови неизмененного лекарственного вещества крови неизмененного лекарственного вещества по отношению к количеству исходной дозы. по отношению к количеству исходной дозы. За биодоступность в 100 % принимают За биодоступность в 100 % принимают величину поступления препарата в системный кровоток при внутривенном введении. величину поступления препарата в системный кровоток при внутривенном введении. AUC концентрация время

13 Лекарственная форма Лекарство употребляется не в виде активной субстанции, то есть химического вещества, которое обладает определенным физиологическим и биохимическим эффектом, а в виде лекарственной формы, то есть таблеток, капсул, инъекций и т.д. В состав лекарственной формы входит активная субстанция, носитель и дополнительные вещества В состав лекарственной формы входит активная субстанция, носитель и дополнительные вещества Таблетка помимо активной субстанции, может содержать: Таблетка помимо активной субстанции, может содержать: 1. Связующее вещество (целлюлоза) 2. Разжижающее вещество (микроцеллюлоза) 3. Антистатический агент (коллоидный кремнезем) 4. рН забуферивающие агенты 5. Смазочный материал (стеариновая кислота, луброл, полиоксиэтиленгликоль) и т.д. 6. Антиоксиданты 7. Консерванты Дополнительные вещества обеспечивают доставку активной субстанции, например, всасывание в нужном отделе желудочно- кишечного тракта, нормальные условия его сохранения и т.д. Например, наличие соединений, которые обеспечивают медленное растворение активной субстанции, дают возможность обеспечить пролонгированное действие лекарства

14 Одна и та же активная субстанция может быть представлена в нескольких формах Аморфная форма или различные кристаллические формы (запатентовано около 10 кристаллических форм омепразола), которые различаются по: 1. стабильности, 2. растворимости, 3. химической реакционноспособности, например, по скорости гидролиза или окисления, 4. механическим изменениям, например, таблетки крошатся при хранении (кинетически предпочтительная форма при этом может превращаться в термодинамически более стабильную) 5. различной чувствительности к распаду при высокой влажности) и т.д.

15 Эквивалентность генериков Фармацевтическая эквивалентность – эквивалентность по качественному и количественному составу лекарственных средств Фармацевтическая эквивалентность – эквивалентность по качественному и количественному составу лекарственных средств Фармакокинетическая эквивалентность (биоэквивалентность Фармакокинетическая эквивалентность (биоэквивалентность или сходная биодоступность), изученная на добровольцах, на больных или на животных; или сходная биодоступность), изученная на добровольцах, на больных или на животных; Клиническая терапевтическая эквивалентность, изученная по эффективности на больных людях; Клиническая терапевтическая эквивалентность, изученная по эффективности на больных людях; Клиническая терапевтическая эффективность лекарств со специальным вниманием к переносимости и безопасности при применении у пациентов с определенным патологическим состоянием. Клиническая терапевтическая эффективность лекарств со специальным вниманием к переносимости и безопасности при применении у пациентов с определенным патологическим состоянием.

16 Фармацевтическая эквивалентность Генерики и оригинальные препараты содержат одну и ту же активную субстанцию (содержание лекарственного средства не должно отличаться более чем на 5%) Генерики и оригинальные препараты содержат одну и ту же активную субстанцию (содержание лекарственного средства не должно отличаться более чем на 5%) Препарат А Препарат В Чистота 99,9% Одинаково ли действуют эти препараты? Это зависит от характера примесей.

17 Генерики и оригинальные препараты Препарат генерик – лекарственный препарат, срок действия патентной защиты на который уже закончился. Воспроизведенный лекарственный препарат – лекарственный продукт, обладающий доказанной терапевтической взаимозаменяемостью с оригинальным инновационным лекарственным средством аналогичного состава, выпускаемый производителем, но не разработчиком оригинального препарата и без лицензии разработчика.

18 Метаболизация лекарственного соединения: цитохромы Р-450 Метаболизация лекарственного соединения осуществляется системой монооксидаз, содержащих цитохром Р-450, совместно с другими ферментами, в частности моноаминоксидазой (МАО) и УДФ-глюкоронозилтрансферазой. Комплекс восстановленного гемопротеина Р-450 с окисью углерода имеет характерный максимум поглощения при 450 нм, что определило название фермента. Использование слова "цитохром" по отношению к гемопротеинам класса Р450 нельзя считать удачным, так как функция цитохромов - это перенос электронов, а не катализ монооксигеназных реакций. Комплекс восстановленного гемопротеина Р-450 с окисью углерода имеет характерный максимум поглощения при 450 нм, что определило название фермента. Использование слова "цитохром" по отношению к гемопротеинам класса Р450 нельзя считать удачным, так как функция цитохромов - это перенос электронов, а не катализ монооксигеназных реакций. В рекомендациях по номенклатуре семейства Р450, предложенной Д. Небертом, слово "цитохром" упоминается только при расшифровке обозначения CYP (т.е. cytochrome Р450), используемого при обозначении генов Р450. В настоящее время известно около 160 различных Р450, обнаруженных в животных, растениях, грибах, бактериях. Гемопротеин отсутствует только у строго анаэробных бактерий.

19 Реакции, осуществляемые монооксигеназами печени (цитохромами Р-450) Р450 наряду с монооксигеназной может проявлять и оксидазную активность, генерируя активные формы кислорода в виде супероксидного и гидроксильного радикалов, перекиси водорода. В связи с этим в литературе иногда Р450 называют оксидазой со смешанной функцией. А.И. Арчаков с сотрудниками обнаружили, что Р450 может функционировать и как истинная четырехэлектронная оксидаза, генерируя только воду из молекулы кислорода. Р450 обнаруживает и пероксидазную активность, используя в реакции окисления в качестве косубстратов вместо NAD(P)H органические перекиси или перекись водорода. Имеются данные, что Р450 может катализировать диоксигеназные реакции. Таким образом, характерной особенностью Р450 является множественность функций, но основной является монооксигеназная.

20 Свойства системы цитохромов Р-450 Прокариоты содержат растворимый Р450. Переход к эукариотическим системам (дрожжи, грибы) сопровождается встраиванием Р450 в мембрану. Все цитохромы Р450 высших организмов - мембранные ферменты. В эволюционном плане наиболее древней является бактериальная монооксигеназа. На промежуточной стадии эволюционной лестницы стоит митохондриальная гидроксилазная система надпочечников. Она имеет все признаки бактериальной растворимой системы и состоит из трех компонентов. Два ее компонента - FAD-содержащий флавопротеин (NADPH- или NADH-зависимая редуктаза) и негеминовый серосодержащий белок (адренодоксин) являются водорастворимыми ферментами и локализованы в матриксе митохондрий, третий - Р450, встроен в мембрану. Р450 играют важную роль в окислении многочисленных соединений, как эндогенных (стероиды, желчные кислоты, жирные кислоты, простагландины, лейкотриены, биогенные амины), так и экзогенных (лекарства, яды, продукты промышленного загрязнения, пестициды и т.п.), последние называют ксенобиотиками. По типу катализируемых реакций Р450 можно отнести к монооксигеназам внешнего типа. В присутствии доноров электронов (NAD(P)H) Р450 способен активировать молекулярный кислород, один атом которого затем внедряется в молекулу окисляемого субстрата, а другой восстанавливается до воды' R + AH + O2 = ROH + A + H2O R + AH + O2 = ROH + A + H2O где R - субстрат, ROH - продукт, AH - донор электронов. где R - субстрат, ROH - продукт, AH - донор электронов.

21 Реакции, осуществляемые цитохромами Р-450 Оксигеназные реакции, катализируемые цитохромом Р450, разнообразны. Одна из наиболее широко распространенных реакций окисления ксенобиотиков- реакция окислительного деалкилирования, которая сопровождается окислением алкильной группы, присоединенной к N-, O- или S-атомам. Второе место по распространенности принадлежит реакциям гидроксилирования циклических соединений, которые включают гидроксилирование ароматических, предельных и гетероциклических углеводородов. Р450 может также катализировать реакции гидроксилирования алифатических соединений, N- окисление, окислительное дезаминирование, реакции восстановления азо- и нитросоединений. Реакции окисления природных соединений включают w- окисление насыщенных жирных кислот, гидроксилирование стероидных гормонов, желчных кислот и холестерина, биосинтез простагландинов, перекисное окисление ненасыщенных жирных кислот.

22 Классификация цитохромов Р-450 Цитохромы Р450 млекопитающих представляют собой структурно и функционально различные изоферменты, кодируемые суперсемейством генов. Классификация Р450 основана на дивергентной эволюции и гомологии нуклеoтид/аминокислотной последовательностей. Суперсемейство разделено на семейства, подсемейства и индивидуальные гены. Цитохромы Р450, имеющие более 40% гомологии аминокислотных последовательностей объединяют в одно семейство, а имеющие более 59% гомологии – в одно подсемейство. При составлении номенклатуры не учитывалась каталитическая активность цитохромов, поэтому члены различных подсемейств могут иметь перекрывающуюся субстратную специфичность.

23 Классификация и обозначение цитохромов Р-450 Семейства цитохромов Р450 обозначают арабскими цифрами, подсемейства – латинской буквой и римскими цифрами. Отдельные изоферменты обозначают: сначала арабская цифра (семейство), далее латинская буква (подсемейство) и в конце - арабская цифра, соответствующая изоферменту. Например, изофермент цитохрома Р450, обозначающийся как CYP2D6, принадлежит к семейству 2, подсемейству IID, изофермент 6.

24 Структура цитохромов Р450 Сведения о первичной структуре, субстратной специфичности, индуцибельности, локализации в клетке, строении гена и многих других свойствах смотри в базе данных "Cytochrome P450, Database" (CPD). Сведения о первичной структуре, субстратной специфичности, индуцибельности, локализации в клетке, строении гена и многих других свойствах смотри в базе данных "Cytochrome P450, Database" (CPD). Молекулярная масса различных Р450 колеблется кДа. Мономеры гемопротеина состоят из одной полипептидной цепи, содержащей от 45 до 55% неполярных аминокислотных остатков. В отсутствие детергента они существует в виде агрегатов с молекулярной массой от 300 до 700 кДа. Полная аминокислотная последовательность установлена для более чем 150 цитохромов Р450 Молекулярная масса различных Р450 колеблется кДа. Мономеры гемопротеина состоят из одной полипептидной цепи, содержащей от 45 до 55% неполярных аминокислотных остатков. В отсутствие детергента они существует в виде агрегатов с молекулярной массой от 300 до 700 кДа. Полная аминокислотная последовательность установлена для более чем 150 цитохромов Р450 Единственный Р450, трехмерная структура которого была детально изучена с помощью рентгеновской кристаллографии - это Р450 из P. putida. Белок содержит 414 аминокислотных остатков, молек. масса - 47 кДа. Молекула этой монооксигеназы представляет собой асимметричную призму с основанием 3,0 нм и сторонами по 5,5 и 6,0 нм. Белок содержит 3 вида структур: 4 анти-параллельных спиральных участка, смесь спиралей и неупорядоченных структур, перемежающихся параллельными бета-структурами. Гем расположен между двумя параллельными спиралями; с пропионовыми группами гема взаимодействуют остатки Arg-112, Arg-229 и His-335, другие аминокислоты, окружающие гем, неполярны: гем не выходит на поверх- ность молекулы. Наименьшее расстояние от поверхности до гема составляет около 0,8 нм.

25 Индуцибельные и конститутивные цитохромы Р-450 Независимо от структуры и хромосомной локализации, цитохромы P450 подразделяют на конститутивные и индуцибельные. Конститутивные изоформы Р450 постоянно продуцируются клеткой, независимо от условий роста. Экспрессия индуцибельных ферментов может контролироваться химическими соединениями. Специфическая индукция отдельных форм Р450 – одно из важнейших свойств этих ферментов, приобретенных в процессе эволюции. Индукторы цитохромов могут уменьшить эффективность лекарств- субстратов. Существует и другая сторона этого явления. Внезапная отмена лекарства-индуктора (или прекращение воздействия индуктора из окружающей среды) может неожиданно привести к сильному повышению концентрации препарата в плазме крови, который ранее интенсивно метаболизировался. Примером может служить ситуация, когда курильщики, привыкшие к постоянному употреблению кофе, решают внезапно бросить курить, в результате чего снижается активность CYP 1А2, а в плазме крови повышается концентрация кофеина. Это может усугублять выраженность синдрома отмены: головную боль и возбуждение.

26 Метаболизм лекарственных средств Несмотря на разнообразие цитохромов в организме человека, метаболизм лекарственных средств происходит с участием ограниченного количества CYP 450. Наиболее распространенными представителями этой группы являются: CYP 1А2, CYP 2С9, CYP 2С19, CYP 2 D 6, CYP 2E1, CYP 3A4 (метаболизация более 90% известных лекарственных препаратов). Один цитохром может метаболизировать несколько лекарственных препаратов, имеющих различную химическую структуру; Один и тот же лекарственный препарат может подвергаться воздействию различных CYP 450 в разных органах и системах человеческого организма. Скорость ингибирования зависит от фармакокинетических свойств «конфликтующих» препаратов. Если и ингибитор, и лекарство-субстрат имеют короткий период полураспада (например, циметидин и ингибитор его метаболизма – теофиллин), взаимодействие окажется максимальным на 2–4-й день. Столько же времени потребуется для прекращения эффекта взаимодействия. В случае одновременного применения варфарина и амиодарона для прекращения ингибиторного эффекта потребуется 1 месяц и более, что связано с длительным периодом полураспада последнего.

27 Взаимодействие лекарственных препаратов Если два препарата метаболизируются с участием одного цитохрома, это приводит к снижению скорости метаболизации обоих препаратов и повышению их уровня в плазме (взаимодействие лекарственных препаратов). Отрадно, что существует не так много препаратов, обладающих характеристиками выраженного ингибитора. Характерными ингибиторами являются циметидин, эритромицин, кетоконазол и хинидин. Среди более новых препаратов потенциальными ингибиторными свойствами обладают селективные ингибиторы обратного транспорта серотонина и ингибиторы протеаз.

28 Взаимодействие ингибиторов протонного насоса и других лекарственных препаратов ИПП, диклофенак, фенитоин, варфарин,толбутамид, гликлазид, глибенкламид, глипизид, метформин, клопидогрель ИПП фелодипин, нифедипин, амлодипин, дилтиазем, лозартан, натеглинид, розеглитазон, статины (симвастатин и торвастатин) грейпфрутовый сок CYP 2C19 CYP 3А4

29 Генетическая вариабельность метаболизации лекарственных препаратов Для каждого человека характерен свой метаболизм лекарственных веществ, отличающийся от такового других людей. Индивидуальные особенности зависят от генетических факторов, возраста пациента, его пола, состояния здоровья, характера питания, сопутствующей фармакотерапии и т.д. Генетическая вариабельность лекарственного метаболизма была установлена случайно: стандартные дозы лекарств неожиданно вызывали нестандартные реакции у разных индивидуумов. Активность метаболизирующих ферментов бывает двух (иногда трех) основных видов: интенсивная и слабая (иногда и средняя), соответственно метаболизм лекарственных веществ может происходить быстро и медленно.

30 Влияние генетического полиморфизма на антисекреторный эффект лансопразола и рабопразола БМ = быстрые метаболизаторы ММ = медленные метаболизаторы * P < 0.01 vs ММ 1,6

31 Эзомепразол – (S-энантиомер) чистый оптический изомер омепразола зеркало D-(R) глицеральдегид L(S)-глицеральдегид.. Эзомепразол – S-энантиомер (L-энантиомер) Пара оптических антиподов (энантиомеров), одна молекула является зеркальным отражением другой

32 Эзомепразол (S-энантиомер омепразола) прогрессивно ингибирует CYP2C19 Andersson T et al. Gastroenterology. 2000;118:A ,0 4,0 6,0 8,0 10,0 12,0 День1День5День1День5День1День5 AUC R-Энантиомер (100% R) Омепразол (50% S; 50% R) Эзомепразол (100% S)

33 Моноклональные антитела в медицине Моноклональные антитела антитела, вырабатываемые иммунными клетками, принадлежащими к одному клеточному клону, то есть произошедшими из одной плазматической клетки-предшественницы. Они могут быть использованы для обнаружения соответствующего антигена или для его очистки. В последнее время их начали использовать для получения лекарственных препаратов. В случае их использования в качестве лекарства его название оканчивается на -mab (от английского «monoclonal antibody»). антитела клонуантитела клону

34 Моноклональные антитела Процесс получения моноклональных антител изобретён Жоржем Кёлером и Сезаром Мильштейном в 1970 годах, за что в 1984 году они получили Нобелевскую премию по физиологии. Идея состояла в том, чтобы взять линию миеломных клеток, которые не обладают способностью синтезировать свои собственные антитела, и слить такую клетку с нормальным B- лимфоцитом, синтезирующим антитела. После слияния получаются бессмертные клетки, производящие антитела, необходимо лишь отобрать гибридные клетки, синтезирующие нужное антитело. Идея была успешно реализована и уже к началу 1980-х годов началось коммерческое получение различных гибридом и очистка антител против заданных антигенов. Жоржем КёлеромСезаром Мильштейном Жоржем КёлеромСезаром Мильштейном Так как лимфоциты были мышиные и синтезировали мышиный иммуноглобулин, введение таких моноклональных антител человеку вызывает иммунную реакцию отторжения. В 1988 г Грег Винтер разработал специальную методику «очеловечивания» (гуманизации) моноклональных антител, что в основном снимает проблему иммунного ответа на введение антител больному с терапевтическими или диагностическими целями.

35 Антитела с адресной доставкой Моноклональные гуманизированные антитела против CD56, CD33, СD44 конъюгированные с метотрексатом, даунорубицином, доксорубицином, винкристином, винбластином, мелфаланом, митомицином C и хлорамбуцилом, используются при лечении рака груди и шейки матки, но они оказались неэффективными против в рака поджелудочной железы.

36 Терапевтические моноклонпльные антитела Даклизумаб - иммуносупрессорное гуманизированное моноклональное антитело (иммуноглобулин IgG1), производимое с использованием технологии рекомбинантной ДНК. Даклизумаб специфически связывается с высоким сродством с альфа-субъединицей (р55, CD25 или Tac-субъединица) человеческого рецептора для IL-2, который экспрессируется на поверхности активированных лимфоцитов

37 Моноклональные антитела Процесс получения моноклональных антител был изобретён Жоржем Кёлером и Сезаром Мильштейном в 1975 годах. [1] За это изобретение в 1984 году они получили Нобелевскую премию по физиологии. Идея состояла в том, чтобы взять линию миеломных клеток, которые потеряли способность синтезировать свои собственные антитела и слить такую клетку с нормальным B-лимфоцитом, синтезирующим антитела, с тем, чтобы после слияния отобрать образованные гибридные клетки, синтезирующие нужное антитело. Эта идея была успешно реализована и уже к началу 1980-х годов началось коммерческое получение различных гибридом и очистка антител против заданных антигенов. Жоржем КёлеромСезаром Мильштейном1975[1]1984Нобелевскую премию по физиологииB-лимфоцитом гибридные клетки Жоржем КёлеромСезаром Мильштейном1975[1]1984Нобелевскую премию по физиологииB-лимфоцитом гибридные клетки Однако, так как лимфоциты были мышиные и синтезировали мышиный иммуноглобулин, введение таких моноклональных антител человеку вызывали иммунную реакцию отторжения. В 1988 Грег Винтер разработал специальную методику «очеловечивания» моноклональных антител, что в основном снимало проблему иммунного ответа на введение антител больному с терапевтическими или диагностическими целями. иммуноглобулин 1988иммуноглобулин 1988

38 Способы диагностики полигенных заболеваний: рак На основании изучения наблюдаемых иммунных ответов на человеческие опухоли было высказано предположение, что сывороточные аутоантитела ("aABs") могут быть полезными при диагностике рака Проводится детектирование aAB в биологических образцах и используются различия в иммунном статусе, определенном по характеристике аутоиммунных антител, для выявления различий в физиологических состояниях или фенотипах (определяемых как классы) для получения прогностической информации Для определения меры связывающих активностей в образцах от больных раком и нераковыми заболеваниями применяется набор синтетических пептидов, кроме того, идентифицированы и применяются наборы информативных эпитопов для характеристики иммунного статуса, ассоциированного с раком