Реймерс Н.Ф., 1991 Кузьмичев Л.Н.,2005 Дата и место исследования Характерис- тики эякулята США 1930 - 1980 Европа 1938 - 1990 Франция 1989 - 1997 Данные. - презентация

1

2 Реймерс Н.Ф., 1991

3

4 Кузьмичев Л.Н.,2005

5 Дата и место исследования Характерис- тики эякулята США Европа Франция Данные ВОЗ 2002 Концентрация (млн./мл.) ,6 66,6 20 Подвижность (%) 52,2 45,3 25% - А 50% - А+В морфология (%) 61,7 51,914% Объем эякулята (мл.) На 0,7 мл. уменьшился объем эякулята 2 – 6 мл.

6 Irvine S. et al, 1996

7

8

9

10 Оценка наличия спермиев Оценка подвижности спермиев Однородность препарата Агглютинация и аггрегация Предварительная оценка воспаления Наличие лецитиновых зерен Кристаллы Бетхера

11 Показатели спермогр. клиники Концентрация (млн./мл.) Подвижность (А+В, %) N морфология (%)

12 Объем 2-5 мл. Концентрация 20 млн./мл. Подвижность более 60% Нормальное строение более 60% Карманный справочник по диагностическим тестам. В.С.Камышникова, 2004 г.

13 ВОЗ 2002

14 Объем эякулята 1,5 мл. (1,4-1,7) Концентрация сперматозоидов 15 млн./мл.(12-16) Подвижность: прогрессивноподвижных форм 32% (31-34) подвижных форм 40% (38-42) Морфологически нормальных форм 4% (3-4) Human Reproduction Update, 2009

15

16 Есть ли сперматозоиды? Центрифугирование эякулята, исследование осадка. Появились спермии? Азооспермия Стандартная спермограмма Исследование центрифугата посторгазменной мочи. Появились спермии? Подвижные они? Исследование концентрации спермиев в камере Горяева без разведения Тест с эозином. Живые есть? Исследование окрашенного мазка эякулята. Клетки сперматогенеза найдены? Аспермия Ретроградная эякуляция Некроспермия

17

18 Отличия Отличия наличие поступательного движения наличие поступательного движения скорость спермия 25-50мкм/с скорость спермия 25-50мкм/с наличие поступательного движения наличие поступательного движения скорость спермия < 25мкм/с скорость спермия < 25мкм/с Феномен качания Феномен качания Манежные спермии Манежные спермии скорость спермия < 3мкм/с скорость спермия < 3мкм/с d) Отсутствие любой подвижности d) Отсутствие любой подвижности Нормы: Нормы: а > 25% а > 25% а + b > 50% а + b > 50% c < 3% c < 3% d) нет своей нормы d) нет своей нормы Репродуктивная группа ВОЗ различает Репродуктивная группа ВОЗ различает а). Сперматозоиды с активно поступательным движением а). Сперматозоиды с активно поступательным движением b). Сперматозоиды с поступательным движением b). Сперматозоиды с поступательным движением c). Сперматозоиды без поступательного движения c). Сперматозоиды без поступательного движения d) Неподвижные сперматозоиды d) Неподвижные сперматозоиды

19

20

21 Спермий человека

22 «Строгие критерии» морфологии по T. Kruger Головка Головка длина 4,0-5,5 мкм длина 4,0-5,5 мкм ширина 2,5-3,5 ширина 2,5-3,5 длина/ширина = 1,50-1,75 длина/ширина = 1,50-1,75 Площадь акросомы = 40-70% площади головки Площадь акросомы = 40-70% площади головки Шейка Шейка толщина менее 1 мкм толщина менее 1 мкм длина 1,5 длины головки длина 1,5 длины головки прикреплена к головке вдоль оси прикреплена к головке вдоль оси Цитоплазматические капли не более 1/2 размера головки Цитоплазматические капли не более 1/2 размера головки Хвост Хвост прямой прямой не закрученный не закрученный одинаковой толщины на всем протяжении одинаковой толщины на всем протяжении уже шейки уже шейки длиной около 45мкм длиной около 45мкм

23 Микроскопия мазка

24 N морф. меньше 4% - оплодотворялось 7,6% ооцитов N морф. от 4-14% - оплодотворялось 63,9% ооцитов N морф. более 14% - оплодотворялось 85-88% ооцитов, при этом 99% эмбрионов имплантиравалось.

25 Генные Хромосомные Нарушение компактизации хроматина ядра Фрагментация хроматина ядра

26

27 бесплодие неясной этиологии бесплодие неясной этиологии привычное невынашивание привычное невынашивание варикоцеле варикоцеле половые инфекции половые инфекции возраст более 45 лет, курение, токсические агенты возраст более 45 лет, курение, токсические агенты перенесенные воспалительные заболевания перенесенные воспалительные заболевания отбор доноров спермыотбор доноров спермы Показания к анализу фрагментации ДНК

28 Tunel ( terminal deoxynucleotidye transferase (tdt) mediated dUTP nick end labeling) – выявляет дефекты и разрывы в ДНК с помощью уридина на 3 он конце. SCSA (sperm chromatin structure assay) – выявляет ss и ds ДНК с помощью акридинового оранжевого и позволяет определить индекс фрагментации Comet – электрофорез фрагментов ДНК, полученных в нейтральных условиях ( ds разрывы ДНК) и с помощью алкалина ( ss разрывы ДНК).

29 - ядра сперматозоидов с фрагментированной ДНК не развивает ореол дисперсии или ореол минимален набор Halosperm - денатурация ДНК, с удалением ядерных белков (кислотная обработка и лизис с DTT и Triton X100) - петли ДНК формируют ореол дисперсии хроматина Компания Halotech DNA

30 - В отсутствии национального стандарта оценки эякулята, необходимо пользоваться стандартами ВОЗ - В выборе тактики лечения, по данным спермограммы, необходимо взаимодействие с клиниками ВРТ (урологами – андрологами, клиническими эмбриологами) - Своевременно принимать решения о переходе к методикам IVF – ICSI - IMSI

31 СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ