Скачать презентацию
Идет загрузка презентации. Пожалуйста, подождите
Презентация была опубликована 11 лет назад пользователемlrb.jinr.ru
1 Лаборатория В.А. Шевченко сегодня Л.Е. Сальникова Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН
2 Владимир Андреевич Шевченко Владимир Андреевич Шевченко Кабинет спецработ Лаборатория радиационной генетики Лаборатория экологической генетики (зав. А.В. Рубанович) (зав. А.В. Рубанович)
3 Развитие работ В.А. Шевченко в лаборатории экологической генетики Генетический мониторинг облученных контингентов Отдаленные последствия хронического облучения природных популяций растений Поиск новых молекулярно-генетических подходов к оценке уровня индуцированного мутагенеза на лабораторных мышах Генетика радиочувствительности человека: сопряженность соматической мутабильности с полиморфизмом ДНК Динамика распространения потенциально опасных аллелей высокополиморфных локусов
4 Мониторинг облученных контингентов Уровень аберраций хромосом у ликвидаторов аварии на ЧАЭС (совместно с ФГУ «РНЦРР Росмедтехнологий», Москва) Генетический мониторинг женщин, проживающих в регионах России, загрязненных в результате аварии на ЧАЭС (совместно с МРНЦ РАМН, Обнинск)
5 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 Контроль Год проведения анализа Частота дицентриков на 100 клеток Средняя частота дицентриков и центрических колец на 100 клеток в различных группах ликвидаторов, обследованных в разное время после аварии на ЧАЭС. Контроль У ликвидаторов аварии на ЧАЭС спустя 20 лет сохраняется повышенный уровень радиационно-специфических аберраций хромосом
6 Отдаленные последствия хронического облучения природных популяций растений Морфологические и генетические эффекты у 2-ого поколения потомков сосен, облученных в результате аварии на ЧАЭС Восточно-Уральский радиоактивный след: мутационный процесс в хронически облучаемых популяциях прозанника, выявлемый цитогенетическими методами
7 Опорный пункт «Горки Ленинские»: питомник потомков сосен, облученных в результате аварии на ЧАЭС Май 2007
8 Схема происхождения растений в питомнике Горки Ленинские Чернобыль «Рыжий лес» Самосев 1987, сбор семян 2004 в Чернобыле Посев 2005, теплица, Горки сеянцев на площади 0,2 га F0F0 F2F2 F1F1
9 Массовое появление морфозов во втором поколении после облучения Радиационно-индуцированные морфологические нарушения развития (морфозы) сосны ранее считались ненаследуемыми
10 Возникновение морфозов во 2-ом поколении (F 2 ) сосны обыкновенной в зависимости от дозы облучения предковых растений
11 vvvvсосны из зоны ЧАЭС. Во втором поколении после облучения частота аберраций хромосом не превышала контрольный уровень F F F Частота аберраций хромосом, % Контроль Питомник Гр 5-10 Гр Гр >20 Гр Контроль
12 Объект: Прозанник пятнистый (Hypochoeris maculate L.) Популяции: «Лежневка» - 55 МБк/м 2, 50 лет Контроль Восточно-Уральский радиоактивный след: мутационный процесс в хронически облучаемых популяциях прозанника, выявлемый цитогенетическими методами
13 Восточно-Уральский радиоактивный след: мутационный процесс в хронически облучаемых популяциях прозанника, выявлемый цитогенетическими методами Частота клеток с аберрациями хромосом Частота растений, у которых все клетки имеют измененный (одинаковый) кариотип Среди растений с измененным кариотипом 40% имели симметричную транслокацию L1- S Сильное нарушение равновесия Харди-Вайнберга (P= ): избыток гомозигот и дефицит гетерозигот по транслокации L1-S Численностьt/tt/++/+ Наблюдаемая28226 Ожидаемая0,211,6224,2 В хронически облучаемой популяции число растений с измененным кариотипом в 26 выше, чем в контроле Возникновение репродуктивного барьера и появление вида-двойника
14 Восточно-Уральский радиоактивный след: радиоадаптация в хронически облучаемых популяциях прозанника, выявлемая при дополнительном облучении У растений из популяции «Лежневка» частота аберраций выше, чем в контроле Проростки дополнительно облученных семян тех же растений имеют вдвое меньше аберраций по сравнению с контрольными
15 Поиск новых молекулярно-генетических подходов к оценке уровня индуцированного мутагенеза на лабораторных мышах Изменчивость RAPD- и ISSR-паттернов в потомстве облученных мышей Изменчивость минисателлитных генов в спермиях облученных самцов мышей (совместно с Университетом г. Лестер, Великобритания)
16 Сравнение паттернов родителей и потомства STR используются в качестве праймеров: амплификация участков между микросателлитами Анализ мутационного процесса у потомков облученных мышей с использованием RAPD - и ISSR-маркеров 2 недели 3 месяца Облучение на стадии сперматид (постмейотическая стадия) Облучение на стадии сперматогониев (премейотическая стадия) -облучение 1-3 Гр
17 Частота изменений ISSR-паттернов в потомстве мышей, облученных на различных стадиях сперматогенеза 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1, Доза, Гр Частота «мутаций» по ISSR Сперматиды Стволовые сперматогонии Не обнаружено достоверных различий между пре- и постмейотическими стадиями сперматогенеза по радиационно-индуцированным изменениям RAPD- и ISSR-паттернов
18 Частота изменений RAPD-паттернов в потомстве мышей, облученных на различных стадиях сперматогенеза 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1, Доза, Гр Частота «мутаций» по RAPD Сперматиды Стволовые сперматогонии Частота изменений RAPD - и ISSR- паттернов в потомстве самцов BALB/c при -облучении в дозах 1-3 Гр возрастает на порядок по сравнению с контролем
19 Генетика радиочувствительности человека: сопряженность соматической мутабильности с полиморфизмом ДНК Уровень спонтанных и индуцированных хромосомных аберраций у здоровых добровольцев, в зависимости от генотипов по кандидатным генам Спонтанный уровень TCR-мутантных лимфоцитов, в зависимости от генотипов по кандидатным генам
20 -облучение 1 Гр in vitro Выделение ДНК, ПЦР-генотипирование Цитогенетический анализ (не менее 1000 метафаз на человека) 26 аспирантов и молодых сотрудников ИОГен 90 курсантов Военно-технического университета (г. Балашиха) 116 здоровых добровольцев до 25 лет: Изучение уровней спонтанных и индуцированных хромосомных аберраций у здоровых добровольцев, в зависимости от генотипов по кандидататным генам
21 Генотипировано по 7 локусам, предположительно влияющим на естественную изменчивость радиочувствительности: ЛокусПолиморфизмБелокФункция CYP1A1A4889G(8%) Цитохромы P ая фаза детоксикации ксенобиотиков CYP2D6G1934A(14%) GSTM1Делеция(70%) Глутатион-S трансферазы 2-ая фаза детоксикации ксенобиотиков GSTT1Делеция(40%) GSTP1A313G(25%) NAT2G590A(28%) N-ацетил- трансфераза 2 MTHFRC677T(30%)5,10-метилен тетрагидрофолат редуктаза Превращение гомоцистеина в метионин (метилирование ДНК, синтез тиминов) … > 10% Детоксикация, репарация ДНК, регуляция оксидативного ответа и клеточного цикла Созданный банк ДНК позволяет в дальнейшем продолжить поиск генов, ассоциированных с радиочувствительностью При этом основное внимание будет уделяться высокополиморфным локусам Планируются: SOD2, MDR1, XRCC1, CCND1, COMT
22 Аберрации в зависимости от генотипов: предварительные итоги Спонтанный уровень аберраций Аберрации, индуцированные дозой 1 Гр in vitro Не обнаружено различий между генотипами по уровню индуцированных аберраций после облучения 1 Гр in vitro Обнаружены различия по аберрациям хромосомного типа между генотипами GSTM1
23 Распределения частот спонтанных аберраций хромосомного типа для «нулевых» и «положительных» генотипов по локусу GSTM >0.008 Частота аберраций хромосомного типа Относительная частота, % GSTM1 n Средняя частота 0/0 27 0,0012±0, ,0025±0,004 Значимость р=0,018
24 Распределение частот TCR-мутантных клеток ( ) для носителей различных генотипов по локусу CYP1A1 Высокую частоту TCR-мутаций имеют носители минорного аллеля G в локусе CYP1A1 OR=20,6 ; P=0,0002 по точному критерию Фишера
25 Оценка селективной значимости и прогноз динамики распространения потенциально опасных аллельных вариантов генов с выраженным влиянием на устойчивость и предрасположенность к мультифакториальным заболеваниям Поиск полиморфных генов, сопряженных с плодовитостью и нарушениями фертильности у человека (привычное невынашивание, бесплодие) (совместно с ММА им. Сеченова каф. акушерства, гинекологии и перинатологии ФППО и Научным центром акушерства, гинекологии и перинаталогии РАМН) Поиск сопряженности широкораспространенных генов с предрасположенностью и ответом на терапию социально-опасных заболеваний (предрак, рак, первичная и вторичная пневмония, посттравматические осложнения) (совместно с МРНЦ РАМН, ФГУ «РНЦРР Росмедтехнологий», ФНЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии Росздрава и Институтом общей реаниматологиии РАМН) Мета-анализ временной и географической динамики распространения потенциально опасных аллельных вариантов генов Нас интересуют гены, которые существенно изменяют активность белка ассоциированы с широкораспространенными мультифакториальными заболеваниями и встречаются с частотой 20-70% Динамика распространения потенциально опасных аллелей высокополиморфных генов
26 GSTM1 0/0 – генотип, которым обладает каждый второй Повышенная чувствительность к токсикантам Предрасположенность ко многим системным заболеваниям И в то же время: Мета-анализ: 206 работ за гг. Частота «нулевых» генотипов GSTM1 в контрольных выборках: слабая, но достоверная тенденция к возрастанию за 20 лет
27 Повышенная частота TCR-мутаций (на 15%) Пониженная частота спонтанных аберраций хромосомного типа (на 100%) «Нулевой» генотип GSTM1 в наших исследованиях: Рост частоты «положительных» генотипов GSTM1 в ряду «здоровые – предрак - рак» Случаи «неправильной» зависимости от GSTM1: «нулевой» генотип селективно выгодней «положительного» Фиброзно-кистозная мастопатия Рак молочной железы
28 Светлаяпамять! Владимир Андреевич Шевченко Владимир Андреевич Шевченко
29 Спасибо Оргкомитету Чтений и всем присутствующим
Еще похожие презентации в нашем архиве:
© 2024 MyShared Inc.
All rights reserved.