Изучение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов периферической венозной крови доноров при воздействии суспензии наночастиц SiO 2 разной концентрации. - презентация

1 Изучение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов периферической венозной крови доноров при воздействии суспензии наночастиц SiO 2 разной концентрации Аспирант кафедры биологии ЧелГМА: И.А. Колбин Научный руководитель: зав.кафедрой биологии ЧелГМА, профессор, доктор медицинских наук О.Л. Колесников.

2 Актуальность работы 1. Проект о «Концепции токсикологических исследований, методологии оценки риска, токсичности, методов идентификации и количественного определения наноматериалов», который был утвержден постановлением Главного Государственного санитарного врача РФ Г.Г. Онищенко 79 от г.

3 2. Анализ данных литературы показал, что наночастицы обладают более высокой токсичностью по сравнению с обычными микрочастицами. 3. Установлено, что наночастицы обладают высокой проникающей способностью в клетку: легко проникают через мембраны клеток, обнаруживаются в клеточном ядре. 4. Это может приводить к увеличению продукции свободных радикалов и активных форм кислорода и далее – к повреждению биоструктур.

4 5. Токсичность наночастиц зависит от формы, размера, способа введения, концентрации и продолжительности влияния на организм. 6. Самым распространенным в биосфере нашей планеты после кислорода является кремний.

5 Цель исследования: оценить жизнеспособность и функциональную активность нейтрофилов периферической крови после 6 часовой инкубации с наночастицами SiO 2 в концентрациях 1,08, 0,54 и 0,27 × 10¹³ частиц/мл. Размер наночастиц в среднем составлял 9 нм.

6 Задачи исследования: ОЦЕНИТЬ: 1.Процент жизнеспособных нейтрофилов периферической крови доноров. 2.Общее количество нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров. 3.Абсолютное количество жизнеспособных нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров. 4.Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров. 5.Активность и интенсивность спонтанного и индуцированного НСТ-теста нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров. 6.Активность лизосомальной люминесценции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров.

7 Материалы и методы Объектом исследования были нейтрофильные гранулоциты, выделенные из периферической венозной крови доноров в возрасте лет.

8 Методы исследования: 1. Оценка процента жизнеспособных нейтрофилов по стандартному методу суправитального окрашивания клеток трипановым синим. 2. Подсчет общего количества нейтрофилов в камере Горяева. 3. Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов на модели поглощения частиц латекса (К.А. Лебедев, И.Д. Понякина, 1990) 4. НСТ-тест нейтрофилов (А.И. Карпищенко, 1998 г.). 5. Определение лизосомальной активности нейтрофилов (И.С. Фрейдлин, 1984)

9 Показатели жизнеспособности нейтрофилов, %

10 Общее количество нейтрофилов, (Х10 клеток/мл)

11 Абсолютное количество жизнеспособных нейтрофилов * ***

12 Показатели активности фагоцитоза нейтрофилов, % *

13 Показатели интенсивности фагоцитоза, усл. ед.

14 Показатели активности спонтанного и индуцированного НСТ-теста нейтрофилов, % ***

15 Показатели интенсивности спонтанного и индуцированного НСТ-теста нейтрофилов, усл.ед. * ***

16 Показатели активности лизосомальной люминесценции нейтрофилов, %

17 Выводы: 1.Наночастицы диоксида кремния снижают процент трипанонегативных и абсолютное количество жизнеспособных нейтрофильных гранулоцитов периферической крови доноров. 2. Наночастицы диоксида кремния увеличивают функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов.

18 БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!!!