Скачать презентацию
Идет загрузка презентации. Пожалуйста, подождите
Презентация была опубликована 10 лет назад пользователемВиктория Шарова
1 1995 МЕЖДУНАРОДНАЯ РАБОЧАЯ ГРУППА ВОЗ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ МЕТОДОВ ГЕНОМНОЙ АМПЛИФИКАЦИИ ДЛЯ ТЕСТИРОВАНИЯ КРОВИ И ЕЕ ПРОДУКТОВ НА ВИРУСНУЮ И БАКТЕРИАЛЬНУЮ БЕЗОПАСНОСТЬ WHO INTERNATIONAL WORKING GROUP ON THE STANDARTIZATION OF GENOMIC AMPLIFICATION TECHNOLOGIES FOR THE VIROLOGICAL SAFETY TESTING OF BLOOD AND BLOOD PRODUCTS (SoGAT) NAT – NUCLEIC ACIDS AMPLIFICATION TECHNOLOGY
2 Концентрации вирусов в международных NAT-стандартах ВОЗ 1)HIV МЕ/мл 2)HCV МЕ/мл 3)HBV МЕ/мл 4)B МЕ/мл 5)HAV МЕ/мл
3 НОВОЕ НАЗВАНИЕ SoGAT Standartization of qualitative and quantitative nucleic acids tests to contribute to the safety of blood, tissues and organs with regard to blood borne pathogens
4 НОВЫЕ ЦЕЛИ SoGAT (обсуждены и одобрены участниками 16-ой конференции SoGAT ) 1. Международные стандарты на все патогены; 2. Международное сотрудничество по воспроизводимости; 3. Обмен информацией по научным и техническим аспектам в контролирующих организациях, академических лабораториях, производствах препаратов крови и диагностических наборов, диагностических лабораториях, банках крови; 4. Новые поколения реагентов и стандартов; 5. Стандарты для тестирования новых патогенов; 6. Мультиплексное тестирование и микрочипы; 7. Корреляция между концентрацией нуклеиновых кислот и инфекционностью; 8. Методы для оценки уменьшения патогенов.
5 Калибровка национального NAT- стандарта на HCV по международному ВОЗ-стандарту 98/790 и Италии (Karen Cristiano, SoGAT XV, 2002, Афины) Mean log 10 IU/ml=4.93Mean log10IU/ml=3,66 Istituto Superiore di Sanita, 2002
6 Экстракция нуклеиновых кислот Амплификация (тест-система) Лимит детекции QiagenRoche ME/мл (534 г экв/мл) OrganonRoche ME/мл (267 г экв/мл) In houseRoche ME/мл (107 г экв/мл) Roche 2.0 7,9 ME/мл (50 г экв/мл) M. Testi et. al, VI Eur. Congr. of ISBT. May 9-13, 1999, p.73 Определение лимита детекции HCV-RNA в национальном Центре крови Италии при помощи рабочего NAT- стандарта на HCV с титром 1698МЕ/мм для 4 способов экстракции РНК
7 Остаточный риск (число инфицированных донаций на миллион) трансфузионной передачи ВГС, ВИЧ-1 и ВГВ после скринирования крови или плазмы Вирус Остаточный риск До введения NATПосле введения NAT ПлазмаЦельная кровьПлазмаЦельная кровь ВГС не определялось ВИЧ не определялось ВГВ не определялось 6.7 Из статьи Tabor E. and Epstein J.C. NAT screening of blood and plasma donations: evolution of technology and regulatory policy. – Transfusion 2002, v.42, p
8 NAT в национальной службе крови Англии Roger Eglin, XVI SoGAT,
9 Преимущество технологиии минипул-генотестирования для вируса гепетита В по сравнению с иммунохемилюминесцентным* определением HbsAg Minegishi et al Japanese Red Cross Vox sang :287 W.H.Gerlich, XVI SoGAT, , PEI >11 million donations tested in pools of 50 Prescreened with RPHA for HBsAg* and high anti-HBc 181 HBV DNA positive donations found (early phase) copies/mL** N HBsAg* neg total *Abbotts Prism*ca positive**Taqman
10 Sixth Engelhardt conference on molecular biology, 2003 Diagnosis of Viral Hepatitis in the Blood Transfusion Services: NAT or NOT? Howard A.Fields., Ph.D. Centers for Disease Control and Prevention (CDC) NAT or NOT? Are We Going to Live in a NAT World? It Depends: For resource-adequate regions: YES For resource-challenged regions: NAT NOT YET
11 NAT в отличие от ИФА является прямым и количественным методом и позволяет концентрировать патогены путем: 1. связывания моноклональными антителами 2. гибридизационного захвата 3. фильтрации 4. центрифугирования 5. увеличения объема материала для экстракции ДНК или РНК 6. использования многокопийных генов, например, гена 16S рРНК
12 Материал для NAT-тестирования может храниться: 1.в лизирующем растворе 2.высушенном состоянии (на фильтровальной бумаге) 3.в замороженном состоянии NAT позволяет определять: 1.концентрацию патогена в крови 2.генотип патогена (штамм) 3.возможно мультиплексное тестирование нескольких патогенов
Еще похожие презентации в нашем архиве:
© 2024 MyShared Inc.
All rights reserved.