КУРСОВАЯ РАБОТА НА ТЕМУ: ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОМ АНАЛИЗЕ Выполнил: Петрова Сахая Студент IV курса группы фарм 401/2 Руководитель работы: Егорова О.М ст. преподаватель кафедры фармакологии и фармации

Цель: Изучить тонкослойную хроматографию в фармацевтическом анализе Задачи: Изучить физико-химические основы ТСХ Проанализировать основы тонкослойной хроматографии Рассмотреть аппаратуру для проведения ТСХ Изучить качественный и полуколичественный анализ Изучить применение метода ТСХ в фармации

Физико-химические методы анализа

Силикагель алюминиевая пластинка

Сорбент Силикагель Оксид алюминия Флоросил

Кизельгур Кремнекислый магний Целлюлоза

Растворитель

Оборудование и Аппараты

Техника проведения анализа Нанести анализируемую смесь (0,5 – 5,0 мкл) и стандартные вещества на линию старта Подготовить хроматографическую пластинку Поместить пластинку в герметичную хроматографическую камеру с растворителем (элюентом) мин После достижения элюентом линии финиша извлечь пластинку из камеры, высушить растворитель мин Проявить хроматограмму известными методами

Качественный анализ Качественный анализ осуществляют сравнением времен удерживания пятен, полученных при хроматографированный смеси веществ, и времен удерживания стандартных веществ- свидетелей. Значение Rf.

Цветные реакции. Цветные реакции в тонкослойной хроматографии используются чрезвычайно широко. Они служат не только для определения местоположения разделенных компонентов (обработка серной кислотой, парами йода), но и определения как класса веществ, так и идентификации (при наличии индивидуальных реакций). Сравнение со свидетелем. При проведении исследований веществ с предполагаемым составом, применяют метод хроматографирования со свидетелем - известным веществом. Этот метод используется когда трудно выдержать условия хроматографирования, нет литературных данных Rf для данной системы или адсорбента, использование градиентного метода и т.д.

Физико-химические методы идентификации. Детектирование. В TCX хроматографический процесс останавливают после разделения анализируемой смеси, не проводя элюирования с пластинки. В этой связи важной проблемой является локализация и проявление зон веществ, большинство из которых не окрашено. Для проявления зон используют в основном три метода: флуоресцентный, опрыскивание реагентами и обугливание. Химическое обугливание проводят концентрированной серной кислотой или насыщенным раствором бихромата калия в 70%- ной серной кислоте. Воздействие ускоряется при нагревании хроматограммы при 100°С в течение получаса.

Количественный анализ Полуколичественный метод определения концентрации вещества с использованием калибровочного графика Метод определения площади пятна. S пятна = f(С вещества )

Необходимость получения более достоверного результата количественного определения привела к использованию инструментальных методов.

Метод элюирования. Этот метод заключается в том, что разделенное вещество смывают с сорбента растворителем и определяют его концентрацию уже другими методами - фотометрическими, полярографическими и т.д. Это достаточно точный метод, но только при условии количественного выделения разделенного вещества. Из-за высокой трудоемкости метод используется достаточно редко и неприемлем при большом количестве исследуемых образцов.

Фотографический метод определения заключается в фотографировании пластинок с разделенным веществом и дальнейшим определением степени почернения, с использованием десинтометров. Радиографический метод аналогичен фотометрическому, только с той разницей, что определяется почернение пластинки, вызванное излучением разделенного вещества. Этот метод используется только при определении веществ с меченными атомами.

Фотодесинтометрический метод может быть использован без выделения вещества с пластинки и основан на определении не только площади пятна, но и его интенсивности. Это наиболее точный метод определения концентрации веществ, так как позволяет при использовании калибровочных графиков, проводить достаточно точные количественные определения всех разделенных веществ (до 2- 10%) непосредственно на пластинке за короткий промежуток времени.

Тонкослойная хроматография для идентификации компонентов лекарственных смесей

Величины Rf некоторых алкалоидов, барбитуратов, производных пиразолона и других лекарственных веществ.

Величины Rf некоторых фармацевтических препаратов фенольного характера.

Спасибо за внимание!