Задаксин

Задаксин ® (thymalfasin) Тимальфазин в естественном виде первоначально был выделен из тканей тимуса. В норме может быть обнаружен в сыворотке в пределах 0.1 – 1 нг / мл. Тимальфазин в естественном виде первоначально был выделен из тканей тимуса. В норме может быть обнаружен в сыворотке в пределах 0.1 – 1 нг / мл. Тимальфазин, находящийся в максимально высоких концентрациях в тимусе, был найден в селезенке, легких, почках, мозге, крови и ряде других тканей. Тимальфазин, находящийся в максимально высоких концентрациях в тимусе, был найден в селезенке, легких, почках, мозге, крови и ряде других тканей. Последовательность аминокислот тимальфазина гомологична последовательностям членов семейства секретина - глюкагон-вазоактивного кишечного пептида (VIP) - и альфа-интерферона (IFNα). Последовательность аминокислот тимальфазина гомологична последовательностям членов семейства секретина - глюкагон-вазоактивного кишечного пептида (VIP) - и альфа-интерферона (IFNα).

Задаксин ® (thymalfasin) Международное название: thymosin alfa 1 Международное название: thymosin alfa 1 Чистый синтетический пептид с ацетилированной конечной аминогруппой, состоящий из 28 аминокислот. Чистый синтетический пептид с ацетилированной конечной аминогруппой, состоящий из 28 аминокислот. Произведен методом твёрдофазного пептидного синтеза по технологии GMP. Произведен методом твёрдофазного пептидного синтеза по технологии GMP. Конечный продукт является лиофилизированной формой для подкожного введения. Конечный продукт является лиофилизированной формой для подкожного введения. Val Lys Ser Asp Ala Val AspThrSer GluIle Thr Leu Asp Lys Glu Lys Glu ValGlu AlaGluAsn Ac

Органы иммунной системы Центральные: тимус тимус костный мозг костный мозгПериферические: иммунные клетки иммунные клетки селезёнка селезёнка л/узлы л/узлы эктопическая лимфоидная ткань эктопическая лимфоидная ткань

Иммунные клетки. Лимфоциты Лимфоциты Макрофаги Макрофаги Полиморфные нуклеары Полиморфные нуклеары Дендритные клетки Дендритные клетки Эозинофилы Эозинофилы

Дифференцировка Т и В лимфоцитов Стволовая клетка. Появление незрелых предшественников Т и В лимфоцитов Появление незрелых предшественников Т и В лимфоцитов Появление на мембране АГ - распознающих рецепторов Развитие толерантности по отношению к ауто-АГ Дозревание лимфатических клеток и превращение их в зрелые Т и В лимфоциты

Дифференцировка Т-лимфоцитов Происходит в вилочковой железе. Ранний предшественник Т-лимфоцита ИЛ-7 ИЛ-7 Незрелый Т-лимфоцит Незрелый Т-лимфоцит Миграция в мозговое вещество тимуса Созревание Т-лимфоцита Т-h T-c Т-h T-c Миграция в периферические органы.

Т-лимфоциты Функции CD4 : хелперная функция Помогают В-клетке превращаться в антитело-продуцирующую плазматическую клетку Помогают В-клетке превращаться в антитело-продуцирующую плазматическую клетку Помогают CD8 превращаться в зрелую цитотоксическую Т-клетку. Помогают CD8 превращаться в зрелую цитотоксическую Т-клетку. Помогают осуществлять макрофагам эффект гиперчувствительности замедленного типа Помогают осуществлять макрофагам эффект гиперчувствительности замедленного типа Функции CD8 : киллерная функция Th1- продуцируют g- интерферон, ИЛ-2, a -опухоленекротический фактор Th1- продуцируют g- интерферон, ИЛ-2, a -опухоленекротический фактор Th2 - продуцируют ИЛ-4, ИЛ5, ИЛ- 10, ИЛ-13, которые отвечают за развитие гуморального ответа и продукцию JgЕ. Th2 - продуцируют ИЛ-4, ИЛ5, ИЛ- 10, ИЛ-13, которые отвечают за развитие гуморального ответа и продукцию JgЕ. o ИЛ-12 поддерживает баланс между Th1 и Th2, повышая к-во Th1. o g- интерферон подавляет функции Th2 o ИЛ-10 ингибирует Th1

Дифференцировка В-лимфоцитов В костном мозге Стволовая клетка дифференцируется в ранний предшественник В-лимфоцита Стволовая клетка дифференцируется в ранний предшественник В-лимфоцита Затем в незрелый предшественник В-лимфоцита Затем в незрелый предшественник В-лимфоцита Формируется зрелый покоящийся лимфоцит с АГ- распознающим рецептором на поверхности. Формируется зрелый покоящийся лимфоцит с АГ- распознающим рецептором на поверхности. Антиген - зависимая фаза Т - независимый иммунный ответ (без участия CD4) – продуцируют только JgM, нет имунной памяти. Т - независимый иммунный ответ (без участия CD4) – продуцируют только JgM, нет имунной памяти. Т - зависимый иммунный ответ – В-лимфоцит продуцирует JgM, JgG, JgA, JgE, есть имунная память (В-клетки памяти с рецептором к JgG и JgM) Т - зависимый иммунный ответ – В-лимфоцит продуцирует JgM, JgG, JgA, JgE, есть имунная память (В-клетки памяти с рецептором к JgG и JgM) Дифференцируются в плазматические клетки и продуцируют АТ

Апоптоз Апоптоз - программированная (физиологическая ) гибель клетки. 1 путь индукции апоптоза После распознавания CD8 в клетке - мишени чужеродного пептида в CD8 образуется белок перфорин, который формирует поры в мембране клетки-мишени. В CD8 образуются гранзимы, которые активируют протеазы в повреждённой клетке – в результате включается апоптоз, который приводит к фрагментации ядра и активации эндонуклеаз. После распознавания CD8 в клетке - мишени чужеродного пептида в CD8 образуется белок перфорин, который формирует поры в мембране клетки-мишени. В CD8 образуются гранзимы, которые активируют протеазы в повреждённой клетке – в результате включается апоптоз, который приводит к фрагментации ядра и активации эндонуклеаз. 2 путь индукции апоптоза Связывание Fas-лиганда на поверхности CD8 + Fas-рецептором на поверхности клетки-мишени запускает механизм апоптоза. Связывание Fas-лиганда на поверхности CD8 + Fas-рецептором на поверхности клетки-мишени запускает механизм апоптоза.

Иммуноглобулины JgM – живёт 4-5 дней, слабоспецифичный. Активирует комплемент Активирует комплемент Усиливает фагоцитоз Усиливает фагоцитоз Выработка ранних АТ против вирусов и бактерий. Выработка ранних АТ против вирусов и бактерий. JgG – живёт 21 день, тимусзависимый (вырабатывается при участии Т- лимфоцитов) Активирует комплемент Активирует комплемент Усиливает фагоцитоз Усиливает фагоцитоз Проникает ч-з плаценту Проникает ч-з плаценту Нейтрализует токсины Нейтрализует токсины JgA – живет 5-6 дней, тимуснезависимый. Защита слизистых (секреторный) – связывает м/о, предотвращая адгезию к слизистой ЖКТ. Защита слизистых (секреторный) – связывает м/о, предотвращая адгезию к слизистой ЖКТ. Нейтрализация сывороточных бактерий и токсинов (сывороточный). Нейтрализация сывороточных бактерий и токсинов (сывороточный). JgE – живёт 2-3 дня Активация тканевых базофилов – активация хемотаксиса Активация тканевых базофилов – активация хемотаксиса Индуцирует аллергию (анафилаксию) Индуцирует аллергию (анафилаксию) Реализация защиты от паразитов Реализация защиты от паразитов Участие в иммунитете против гельминтов Участие в иммунитете против гельминтов JgD – живёт 2-3 дня Помогает дифференцировке лимфоцитов Помогает дифференцировке лимфоцитов

Цитокины Интерлейкины Интерлейкины Интерфероны Интерфероны Опухоле-некротизирующие факторы Опухоле-некротизирующие факторы Трансформированные факторы роста Трансформированные факторы роста Хемокины Хемокины Собственно ростовые факторы Собственно ростовые факторы

Интерлейкины ИЛ1 – продуцируется макрофагами, глией, эндотелиоцитами, фибробластами (эндогенный пироген). Индуцирует продукцию ИЛ2, 3, 6, 8 Индуцирует продукцию ИЛ2, 3, 6, 8 ИЛ2 – Продуцируется Th1 Индуцирует пролиферацию Т-клеток, созревание цитотоксических Т- лимфоцитов, пролиферацию и дифференцировка В-лимфоцитов и усиление функции NK (естественных киллеров) Индуцирует пролиферацию Т-клеток, созревание цитотоксических Т- лимфоцитов, пролиферацию и дифференцировка В-лимфоцитов и усиление функции NK (естественных киллеров) ИЛ3 – Продуцируется Th, тучными клетками Индуцирует пролиферацию стволовых клеток, клеток для всех ростков кроветворения Индуцирует пролиферацию стволовых клеток, клеток для всех ростков кроветворения ИЛ4 – Продуцируется Th2 Индуцирует пролиферацию В-клеток, секрецию JgG, JgE. Антагонист g- интерферона Индуцирует пролиферацию В-клеток, секрецию JgG, JgE. Антагонист g- интерферона

Интерлейкины ИЛ5 – Продуцируется Th2 Индуцирует пролиферацию и дифференцировку В-клеток, активацию и хемотаксис эозинофилов. Индуцирует пролиферацию и дифференцировку В-клеток, активацию и хемотаксис эозинофилов. ИЛ6 - продуцируется макрофагами, лимфоцитами, фибробластами Индуцирует продукцию белков острой фазы, дифференцировку клеток и продукцию АТ Индуцирует продукцию белков острой фазы, дифференцировку клеток и продукцию АТ ИЛ8 – продуцируется моноцитами, лимфоцитами, гранулоцитами. Повышает хемотаксис нейтрофилов, прилипание к эндотелию, проницаемость сосудов. Повышает хемотаксис нейтрофилов, прилипание к эндотелию, проницаемость сосудов. ИЛ10 – (супресорный фактор) Продуцируется Th2. Подавляет функцию Th1, повышает продукцию NK, моноцитов, снижает продукцию имуноцитокинов Подавляет функцию Th1, повышает продукцию NK, моноцитов, снижает продукцию имуноцитокинов ИЛ12 – продуцируется В-клетками, моноцитами, макрофагами Индуцирует дифференцировка Т0 и Т1-клеток, повышает генерацию NK, цитотоксических Т- лимфоцитов и продукцию g-интерферона

Интерфероны a- интерфероны (лейкоцитарный) Продуцируется лимфоцитами и макрофагами Продуцируется лимфоцитами и макрофагами b- интерфероны (фибробластный) b-1 и b-2 g- интерфероны Продуцируются активными Th1 и NK клетками

Стволовая клетка NK- клетки Задаксин® Уникальный двойной механизм действия Инфицированная вирусом клетка Иммуномодулирующий Прямой противовирусный экспрессию HLA-1 Репликация вируса Апоптоз T- клеток T- хелперы CD4 Цито- токсические Т-лимфоциты CD8 Продукции Т- клеток IL-2, IFN- g IL-4, IL-10 Инфицированная вирусом клетка Цитокины: IL-2, IFN-g

Задаксин ® (thymalfasin) Стимулирует стволовые клетки и увеличивает выработку NK, CD4, CD8 Стимулирует стволовые клетки и увеличивает выработку NK, CD4, CD8 Задаксин увеличивает выработку Th 1 цитокинов Задаксин увеличивает выработку Th 1 цитокинов Уменьшает апоптоз Т - клеток Уменьшает апоптоз Т - клеток увеличивает экспрессию HLA класса 1 увеличивает экспрессию HLA класса 1 Ингибирует репликацию вирусов Ингибирует репликацию вирусов Уменьшает окислительный стресс Уменьшает окислительный стресс Иммуномодулирующее действие Прямое антивирусное действие

ГЕПАТИТ B

В 100 раз более контагиозный по сравнению с ВИЧ 350 миллионов инфицированных в мире Вирус ДНК - содержащий Возможна вакцинация Основа иммунного ответа - вирусологический клиренс. Вирусный гепатит В

Интерферон IFN Интерферон IFN Нуклеозидные аналоги (3TC, FTC) Нуклеозидные аналоги (3TC, FTC) Задаксин ® Задаксин ® Применяемые препараты

Аналоги нуклеотидов, Интерфероны и ЗАДАКСИН ® Ламивудин Интерфероны ЗАДАКСИН Механизмингибирует ДНК, увеличивает адгезию ввыработку T действияРНК синтез и экспрессию молекул. функции T HLA 1 и 2 и повышает + функцию прямой эффект Т очка рибосомы предш. Т-лимф, инфицированные действияядро тимоциты клетки Время Дни От дней до недель От недель до месяцев ТоксичностьСпецифическая чувствит.; Гематологич., ЦНС; Нет От мягкой до летальной Побочный эффектНевропатии, дисфункции Головокружение, тошнота Фактически нет печени: мягкий – серьезный Мягкий – серьезный Эффективность Быстрое снижение уровня Вариация клиренса Вариация клиренса циркулирующих HBV ДНК HBV ДНК и HBeAg; HBV ДНК и HBeAg; Не стойкий эффект Стойкий эффект Стойкий эффект Сравнительная таблица

Сравнение эффективности терапии HBV 10% - 15% 10% - 15% Нет или плацебо 6 месяцев месяцев 4 месяца длительность 25% - 41% (37%**) Задаксин Задаксин 8% - 16% 8% - 16% 15% - 40% 15% - 40% IFN IFN эффективность * Терапия * Loss of HBV DNA and HBeAg ** Meta-analysis. Data on file. Schiff. Diseases of the Liver, Dienstag. Clinics in Liver Diseases, Ламивудин

Сравнение частоты возникновения побочных эффектов

ГЕПАТИТ B HBV МОНОТЕРАПИЯ ЗАДАКСИНОМ

HBV Монотерапия Задаксином. Зависимость ответа от дозы. фаза 2 РКИ (Japan) фаза 2 РКИ (Japan) 6 месяцев терапии 6 месяцев терапии 6 месяцев контроля 6 месяцев контроля Контрольные показатели Контрольные показатели HBV ДНК HBV ДНК АЛТ АЛТ ZDX dose (BIW) 8.3% 21.4% 45.5% Полнота ответа (%)

ГЕПАТИТ B HBV ЗАДАКСИН + ЛАМИВУДИН

Задаксин ® Комбинированная терапия HBV с нуклеозидными аналогами Рациональность применения: Уменьшение HBV ДНК Уменьшение HBV ДНК Уменьшение иммунной толерантности Уменьшение иммунной толерантности Индуцирование имунного клиренса HBV ДНК Индуцирование имунного клиренса HBV ДНК Уменьшение HBV мутаций Уменьшение HBV мутаций Увеличение срока поддержания эффекта Увеличение срока поддержания эффекта

Souglu et al Anti Hbe позтивны HBV-ДНК негативны HBV Комбинированная терапия Задаксином с Ламивудином (pilot study) 2001) Gut 49 supp3: 1639

ГЕПАТИТ B ЗАДАКСИН + IFN a

Saruc et al (2001) DDW, (2002) WCOG Эффективность (HBV ДНК негативность) 6 месяцев после терапии 12 месяцев после терапии При терапии Задаксин + IFN IFN HBV Терапия Задаксином в комбинации с IFN

HBV Сравнение различных схем терапии (показатели ответа на терапию) % * % ** % * % *** 70% Полнота ответа (%) * Schiff, Diseases of the Liver, 1999 ** Dienstag, Clinics in Liver Diseases, 1999 *** Meta analysis, data on file Chan et al, Data on file, 1999 Saruk Hepatogastroenterology, in press, 2001

ГЕПАТИТ C Return to table of contents HCV

Вирусный гепатит C Хроническая вирусная РНК инфекция наиболее часто передающаяся парентеральным путём. Хроническая вирусная РНК инфекция наиболее часто передающаяся парентеральным путём. выявлено 6 разных типов (генотипов) выявлено 6 разных типов (генотипов) 4 миллиона инфицированных в США 4 миллиона инфицированных в США только 5% пациентов обратившихся (200,000)только 5% пациентов обратившихся (200,000) 36,000 новых пациентов ежегодно36,000 новых пациентов ежегодно 5миллионов инфицированных в европе 5миллионов инфицированных в европе 3-5 миллионов инфицированных в Японии 3-5 миллионов инфицированных в Японии До 72% пациентов не реагируют на текущие стандарты лечения. До 72% пациентов не реагируют на текущие стандарты лечения. Не создана вакцина Не создана вакцина Immune response fundamental to viral clearance Immune response fundamental to viral clearance

Гепатит С и ВИЧ у детей. Распространение вирусного гепатиту С среди ВИЧ+ дітей в розвитых странахє выше, чем в общей популяції Распространение вирусного гепатиту С среди ВИЧ+ дітей в розвитых странахє выше, чем в общей популяції Самый частый путь инфицирования - вертикальная трансмиссия Самый частый путь инфицирования - вертикальная трансмиссия Риск повышается при высокой вирусной нагрузке уматери Риск повышается при высокой вирусной нагрузке уматери Частота инфицирования геп.С среди ВИЧ+ женщин в 2,8 развыше, чем среди ВІЛ(-) Частота инфицирования геп.С среди ВИЧ+ женщин в 2,8 развыше, чем среди ВІЛ(-) Риск передачи ВИЧ ребенку у женщин с ВИЧ+геп С в1,7 раза чему неинфицированных гепатитом С Риск передачи ВИЧ ребенку у женщин с ВИЧ+геп С в1,7 раза чему неинфицированных гепатитом С Кесарево сечение не влияет на риск перередачи от матери к ребенку. Кесарево сечение не влияет на риск перередачи от матери к ребенку. Грудное вскармливание не влияет на риск вертикальной трансмисии Грудное вскармливание не влияет на риск вертикальной трансмисии Применение в/в наркотиков мамой во время беременности потенцирует риск перекдачи ВИЧ и геп. С Применение в/в наркотиков мамой во время беременности потенцирует риск перекдачи ВИЧ и геп. С генотип гепатита С не влияет на риск вертикальной трансмисии. генотип гепатита С не влияет на риск вертикальной трансмисии.

HCV ZDX + IFN Конечный результат терапии (Вирусная РНК) Конечный ответ (%) Sherman et al (1998) Hepatology 27: 1128–1135 n = 37 n = 35 PCR ответ 6 месяцев терапии 75% genotype 1 37% 19% 3%

HCV ZDX + IFN. Гистологический ответ n = 101 Слепая биопсия Два независимых гистолога Sherman et al (1998) Hepatology 27: 1128–1135 * * P < 0.05 compared to placebo PlaceboIFN ZDX + IFN

HCV Сравнение эффективности Уровень Ответа (%) * McHutchison et al (1998) ** Rasi et al (1996) *** Schalm et al (1999) # Data on file * * ** * * *** # Впервые лечённые (генотип 1) Не ответившие на прежнее лечение (генотип 1)

Перспективы применения у пациентов с ВИЧ. Низкая токсичность Низкая токсичность Возможность длительного применения Возможность длительного применения Возможность комбинации с НИОТ (AZT) Возможность комбинации с НИОТ (AZT) Убедительное увеличение уровня CD 4+ Убедительное увеличение уровня CD 4+

Опыт лечения первичной иммунопатологии. Синдром Ди-Джорджи: Возможность применения в детском возрасте Возможность применения в детском возрасте Через 3 недели приема – увеличение уровня Т-лимфоцитов Через 3 недели приема – увеличение уровня Т-лимфоцитов Снижение тяжести и частоты течения инфекций Снижение тяжести и частоты течения инфекций Улучшение общего состояния Улучшение общего состояния

Опыт потенцирования формирования поствакцинального иммунитета У пожилых людей( после 80 лет) У пожилых людей( после 80 лет) У больных, находящихся на хроническом гемодиализе У больных, находящихся на хроническом гемодиализе При вакцинации от гриппа, гепатита В При вакцинации от гриппа, гепатита В

Задаксин ® Форма выпуска Флаконы по 1,6 мг сухого вещества 2 Флаконы по 1,6 мг сухого вещества 2 флаконы растворителя 2 флаконы растворителя 2

Рекомендуемые схемы дозирования Задаксина ® по 1,6 мг (900 мг/м 2 ) 2 раза в неделю по 1,6 мг (900 мг/м 2 ) 2 раза в неделю или 40 мкг /кг при массе тела менее 40 кг два раза в неделю или 40 мкг /кг при массе тела менее 40 кг два раза в неделю (3-4 дневный перерыв) (3-4 дневный перерыв)