Its well known that cytokinin plays main role in crop production however the cytokinin signaling mechanisms of the regulation of the ammonia assimilation of the cereals are stayed unstudied, whereas this process determines the protein productivity of the plants. Our long time investigation let to discover the very powerful cytokinin secondary (CSH) hormone which related to fusicoccin compounds. CSH was isolated from germinated wheat seeds by hydrophobic chromatography and by reverse phase chromatography. CSH is formed in response to cytokinin action. Then CSH is turn bound with plasmatic membrane receptor that leads to the activation of Ca+2 ATPase. As result the concentration of cytosolic Ca+2 is increased. This Ca+2 ions are turn bound with molecular of glutamate dehydrogenase (GDh) which related to Ca+2 sensor proteins. The last step of the cytokinin signaling is the phosphorylation of the Ca+2 bound GDh. That lets to activation of NADPH – GDh. This enzyme has very high affinity to ammonia KM= 0,8 mkM that much better than glutamine synthetase (GS). It was shown by us in the ripening wheat ears the 75 % more than 45% the assimilation of ammonia carry out by NADPH – GDh whereas GS- GOAT road plays secondary role in this process. Thus the cytokinin signaling switch on the process of the assimilation of ammonia by activation NADPH-GDh by increasing of the concentration of the cytosolic Ca+2 ions and by phosphorylation precursor of the GDh molecular. The materials are next: germination seeds and green ears of the winter wheat (Triticum aestivum Steclovidnaya- 24 cultivar) Methods: homogenization, centrifugation, hydrophobic and reverse phase chromatography spectrophotometeric methods of determination of NADH-NADPH –Glutamate dehydrogenase, Bradford determination of protein concentration with coomassi G-250 and cytokinin biotest. The aim is the study the cytokinin signaling in the regulation of the ammonia assimilation of the cereals ABSTRACT PURPOSE MATERIALS AND METHODS RESULTS THE CYTOKININ SIGNALING IN THE REGULATION OF THE AMMONIA ASSIMILATION OF THE CEREALS Murat Gilmanov, Saniam Ibragimova, Arailym Esebbaeva, Adilet Esmambetov Scientific research Institute of biology and biotechnology, Kazakh National university. Almaty, Kazakhstan Гидрофобная хроматография спиртового экстракта из проросших семян пшеницы сорта «Арай» на колонке с октилсефарозой CL-4B. Размер колонки 3,5х20 см. Колонку уравновешивали 10 % этанолом. Отмывку от не связавшихся веществ проводили 10% этанолом. МЦ смывали элюцией 50% этанолом, после чего колонку промывали 80% этанолом для освобождения колонки от адсорбированных на ней веществ. Гидрофобная хроматография спиртового экстракта проросших семян пшеницы сорта «Арай» на колонке с октилсефарозой CL-4B Обратнофазовая хроматография медиатора цитокинина на колонке типа RP 18a Обратно-фазовая хроматография медиатора цитокинина на колонке типа RP-18. Колонку уравновешивали 10 % этанолом, затем проводили градиентную элюцию этанолом (от 10 до 100%). Фракция с медиатором цитокинина указана стрелкой Влияние 6-БАП и медиатора цитокинина на подавление апикального доминирования у декапитированных стеблей растения «Impatiens balsamina» Влияние 6-БАП и медиатора цитокинина на подавление апикального доминирования у декапитированных стеблей растения «Impatiens balsamina». 1 – контроль, стебель с удаленной верхушечной почкой без обработки; 2 – опыт, стебель с удаленной верхушечной почкой ежедневно обрабатываемый 6-БАП (23 мкг/мл). 3 – опыт, стебель с удаленной верхушечной почкой ежедневно обрабатываемый медиатором цитокинина (100 нг/мл). 12 Сканирующая электронная микроскопия сферосом Электронная микроскопия сферосом проведена с помощью сканирующего электронного микроскопа типа JEOL SUPER PROBE 733 (Япония). На специальную стеклянную пластину наносили 1 каплю препарата сферосом и помещали в вытяжной шкаф до полного высушивания. Затем пластина помещалась в аппарат ion sputter (fine coat) (JFC-1100) при напряжении 1000В и при вакууме 10-3 мм рт. ст. на 30 минут для покрытия сферосом тончайшим слоем золота. 1- контрольный вариант, необработанный ионами кальция; 2 – опытный вариант, обработанный 10 мМ раствором CaCl2. Инкубацию с ионами кальция проводили в течение 5 мин. Воздействие цитокинина на зародыш стимуляция образования МЦ транслокация МЦ в алейроновый слой МЦ увеличение уровня цитозольного Са 2+ активация МЦ Н + АТФ-азы плазматической мембраны клеток алейронового слоя Активация НАДФ-ГДГ Действие ионов Са 2+ на латентную ГДГ сферосом алейроновых клеток Экспериментально обоснованная схема цепи сигнальной трансдукции цитокинина, приводящей к активации НАДФ-ГДГ Mass-spectroscophy of CSH Формула фузикокцина Влияние 6-БАП и медиатора цитокинина на предотвращение пожелтения изолированных стареющих листьев «Сингониума ушковатого» Влияние 6-БАП и медиатора цитокинина на предотвращение пожелтения изолированных стареющих листьев «Сингониума ушковатого». I вар.: 1а- половина листа, ежедневно протираемая тампоном, смоченным раствором 6-БАП (23 мкг/мл), 1b – половина листа без обработки 6-БАП. II вар.: 2a -половина листа ежедневно протираемая тампоном, смоченным раствором медиатора цитокинина (100нг/мл), 2b-половина листа без обработки медиатором цитокинина Опыт проводили в течение 7 дней. Влияние медиатора цитокинина на укоренение черенков лоха узколистного Влияние медиатора цитокинина на укоренение черенков лоха узколистного. 1- контроль, без обработки медиатором цитокинина; 2- опыт, черенок обработанный медиатором цитокинина (100 нг/мл). Время опыта 1 месяц. Трансфокальная микроскопия на микроскопе типа DM 6000 фирмы «Leico» (Швейцария) сферосом из покоящегося зерна пшеницы График определения константы Михаэлиса к ионам аммония НАДФН – ГДГ сферосом из созревающего зерна пшеницы