Фармакогностическое исследование представителей семейства Rosaceae и Asteraceae флоры Красноярского края Выполнили : МБОУ « ОУ Гимназия 10 » Дорохин Алексей, Грищенко Иван

Постановка и формулировка проблемы Для расширения сырьевой базы и создания эффективных оригинальных препаратов необходимо проводить поиск новых сырьевых источников лекарственных растений, расширять изучение природных биологически активных веществ. Черемуха и пижма, произрастающие в Красноярском крае, являются перспективными источниками получения витаминных и противовоспалительных препаратов.

Цель работы Фармакогностическое изучение представителей семейства Rosaceae и Asteraceae флоры Красноярского края для получения растительных средств антимикробного, противовоспалительного и вяжущего действия, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний органов пищеварения.

Основные задачи Изучить ассортимент растительных средств, применяемых для лечения заболеваний органов пищеварения ; дать анализ современного состояния изученности растений сем Rosaceae и Asteraceae; Провести изучение химического состава пижмы обыкновенной и черемухи обыкновенной флоры Красноярского края ; Установить закономерности накопления и распределения БАВ по органам и фазам развития пижмы обыкновенной, обосновать рациональные сроки заготовки для указанного вида сырья ; Провести количественное содержание БАВ в листьях черемухи обыкновенной в период цветения из различных районов Красноярского края.

Объекты исследования : - надземная часть ( листья, стебли, соцветия ) пижмы обыкновенной, собранные в период вегетации в Курагинском районе Красноярского края.

- листья черемухи обыкновенной в период цветения, собранные в 4 районах Красноярского края и окрестностях г. Красноярска : образцаМесто сбора образцаМесто сбора 1 г. Минусинск 5 г. Красноярск, район завода «Крастяжмаш» 2 г. Лесосибирск 6 г. Красноярск, район ТЭЦ-3 3 п. Емельяново 7 г. Красноярск, Академгородок 4 Красноярское водохранилище 8 г. Красноярск, район завода «Краз»

Методы исследования : 1.Определение дубильных веществ Метод основан на окислении танинов водным раствором пермаганата калия с применением в качестве индикатора индигосульфокислоты. Содержание дубильных веществ в процентах вычисляют по формуле: где V1 - объем 0,1 н.KMnO 4, пошедшего на титрование, мл; V2 - объем 0,1 н. KMnO 4, пошедшего на контрольный опыт, мл; K – поправка на титр, D – коэффициент пересчета на танин: для гидролизуемых дубильных веществ равен 0,004157, для конденсированных – 0,00582; V – общий объем экстракта, мл; m – масса навески сырья, г; V3 – объем экстракта, взятого для титрованиия, мл. 2. Определение органических кислот В коническую колбу помещают 20 мл фильтрата, отмеренного пипеткой, добавляют 3-4 капли фенолфталеина и титруют раствором едкого натрия до слабо-розового окрашивания. Содержание органической кислоты в процентах определяют по формуле: V – количество 0.1н раствора щелочи, израсходованной на титрование, мл; К – коэффициент для пересчета на соответствующую кислоту; V 1 – объем вытяжки, приготовленной из навески исследуемого продукта, мл; m- масса навески или объем исследуемого продукта, г или мл;V 2 – количество фильтрата, взятого для титрования, мл

3. Определение пигментов Сущность метода заключается в измерении оптической плотности вытяжки ( экстракта ) пигментов на спектрофотометре при длинах волн, соответствующих максимумам поглощения хлорофиллов a (663 нм ) и b (645 нм ) и максимуму поглощения каротиноидов (440,5 нм ), с последующим расчетом концентрации пигментов по уравнениям Вет штейна и Хольма : Ca = 9,784D ,99D644; Cb = 21,426D ,650D662; Ca+Cb = 5,134D ,436D644; Скар = 4,695D440,5 - 0,268D(Ca + Cb), где : Са - концентрация хлорофилла а, мг / дм ; СЬ - концентрация хлорофилла b, мг / дм ; Скар - концентрация каротиноидов, мг / дм 3. Содержание пигментов ( мг /100 г ) находят по формуле х = CVV / н V l. 1000, где : С - концентрация пигмента, мг / дм 3 ; V - объем исходной вытяжки, см 3 ; V 1 - объем исходной вытяжки, взятой для разбавления, см ; V 2 - объем разбавленной вытяжки, см ; н - масса навески. Содержание пигментов в растительном сырье определяли на спектофотометре ПромЭколаб ПЭ В. Экстракцию пигментных комплексов из сырья проводили ацетоном.

4. Определение аскорбиновой кислоты Метод основан на редуцирующих свойствах аскорбиновой кислоты. Синяя краска ( индикатор ), 2,6- дихлорфенолиндофенол, восстанавливается в бесцветное соединение экстрактами растений, содержащими аскорбиновую кислоту ( реакция Тильманса ). Кислотные вытяжки из растений титруют раствором индикатора ( известного титра ) до наступления розового окрашивания, обуславливаемого избытком индикатора в кислой среде. Количество витамина С ( Х ) в образце вычисляют по формуле : где а - объем краски ( с вычетом поправки на титрование чистого растворителя ), которая пошла на титрование экстракта, мл ; Т - титр краски по аскорбиновой кислоте ; V- общий объем вытяжки, мл ; V1- объем экстракта, взятого для титрования, мл ; m- масса навески, г. 5. Статистическая обработка данных Статистическую обработку результатов исследований проводили на ПЭВМ с применением программного пакета Microsoft Excel.

Результаты сравнительного фитохимического анализа листьев черемухи обыкновенной, собранных в различных районах Красноярского края образца Район сбораВитамин С мг/100г Дубильные вещества, % Органические кислоты % перерасчет на яблочную кислоту 1г. Минусинск363,5±18,1010,55±0,522,13±0,1 2г. Лесосибирск362,10±18,109,40±0,471,84±0,09 3п. Емельяново270,65±13,505,92±0,301,51±0,07 4Красноярское водохранилище 326,94±16,356,48±0,321,82±0,09 5г. Красноярск, район завода «Крастяжмаш» 252,33±12,605,72±0,301,14±0,06 6г. Красноярск, район ТЭЦ-3 242,35±12,005,65±0,281,13±0,05 7г. Красноярск, Академгородок 268,21±13,45,88±0,301,14±0,06 8г. Красноярск, район завода «Краз» 147,61±7,404,7±0,240,76±0,04

Содержание биологически активных веществ в надземных органах пижмы обыкновенной Месяц сбораОрганическ ие кислоты % перерасчет на яблочную кислоту Дубильные вещества, % Хлорофилл А мг/100 Хлорофилл В мг/100 Каротиноид ы мг/100 Витамин С, мг/% ЛистьяИюнь0,92±0,0412,98±0,6564,17±1,2034,16±1,7012,05±0,6017,50±0,80 Август0,78±0,0410,22±0,5146,56±1,3028,58±1,4010,98±0,6014,2±0,70 Сентябрь0,67±0,038,35±0,4134,82±1,7018,66±0,938,88±0,4510,15±0,50 СоцветияИюль1,12±0,058,10±0,4010,94±0,5413,57±0,6020,8±0,1012,10±0,60 Сентябрь0,75±0,035,70±0,282,85±0,142,66±0,1320,3±0,109,20±0,40 СтеблиИюнь1,94±0,1012,56±0,631,07±0,051,42±0,070,38±0,20* сентябрь1,74±0,089,62±0,481,97±0,102,88±0,150,76±0,04*

Выводы 1. Анализ ассортимента растительных средств, применяемых для лечения и профилактики заболеваний органов пищеварения, показал необходимость разработки средств с антимикробным, противовоспалительным и вяжущим действием отечественного производства, в том числе из растений семейства семейства Rosaceae и Asteraceae. 2. Установлено, что в листьях черемухи обыкновенной ( г. Минусинск, г. Лесосибирск ) содержание основных БАВ ( дубильных веществ, органических кислот, аскорбиновой кислоты ) больше, чем в сырье из других районов. 3. Установлены в ходе фармакогностических исследований некоторые закономерности накопления и распределения БАВ по органам и фазам развития пижмы обыкновенной. 4. Для сырья пижмы обыкновенной подобраны оптимальные условия заготовки, сушки и предварительной обработки.