Лектор Творко М. С.

План лекции 1. Принципиальное строение антител- иммуноглобулинов 1. Принципиальное строение антител- иммуноглобулинов 2. Основные классы иммуноглобулинов и их характеристика 2. Основные классы иммуноглобулинов и их характеристика 3. Основные функции иммуноглобулинов 3. Основные функции иммуноглобулинов 4. Первичный и вторичный иммунные ответы.4. Первичный и вторичный иммунные ответы. 5. Моноклональные антитела и способы их получения.5. Моноклональные антитела и способы их получения. 6. Механизмы иммунного ответа.6. Механизмы иммунного ответа.

Антитела (иммуноглобулины). Характеристика основных классов иммуноглобулинов. Наиболее критический момент в процессе иммунного ответа - это распознание, выявление химического маркера, который свойственный чужому агенту в отличие от своего организма. Это задание выполняют особые белки, которые отличаются удивительным разнообразием молекулярной структуры. Основными распознающими белками являются антитела или иммуноглобулины (Ig). Существует пять классов иммуноглобулинов человека - G, M, А, E, D. Молекулы каждого класса состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей. Легкие полипептидные цепи (L) бывают двух видов или, или и одинаковые для всех классов иммуноглобулинов. Тяжелые цепи (Н) у каждого класса разные, и в зависимости от названия тяжелой цепи и происходит название класса иммуноглобулинов.

У каждого иммуноглобулина - только один тип легких цепей или, или. Таким образом, структурные формулы каждого класса иммуноглобулина можно записать таким образом: Тяжелые цепи Класс иммуноглобулинов Ig G Ig M Ig A Ig E Ig D Ig G - 2 2,, 2 2 Ig M - ( 2 2 ) 5, ( 2 2 ) 5 Ig A - ( 2 2 ) n, ( 2 2 ) n,, Ig E - 2 2, 2 2 IgD - 2 2, 2 2

IgG - основной класс иммуноглобулинов, который составляет 70 % всех иммуноглобулинов. В значительной мере он выделяется в ответ на повторное попадание антигена в организм. В процессе иммунного ответа происходит переключение синтеза IgM на IgG. IgG сравнительно термостабильные (выдерживают нагревание при 75 С 30 мин). При такой экспозиции IgM быстро разрушаются. Период полураспада IgG - 23 суток. IgG нейтрализуют вирусы, токсины, опсонизирующие действуют на бактерии, связывают комплемент. IgG - единственный иммуноглобулин, который проходит через плаценту и защищает в первое время после рождения ребенка от возбудителей дифтерии, столбняка, коклюша, кори и др. По структуре тяжелых цепей среди IgG различают четыре подкласса: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.

IgА. Различают сывороточные и секреторные IgА. Сывороточные IgA могут иметь структуру мономера (80 % ), димера- или полимера. У последних двух есть дополнительная цепь J, которая объединяет эти мономеры. Сывороточные иммуноглобулины А составляют % всех иммуноглобулинов сыворотки. Секреторные иммуноглобулины чаще всего бывают в виде димера, к которому присоединяется секреторный компонент (СК-фрагмент), который защищает IgA от разрушения протеазами.

Секреторный Ig А имеет выраженные бактерицидные свойства. Он в несколько раз более активный по отношению к грам отрицательной флоре, чем IgM и в десятки раз в сравнении с IgG. S IgA - основной защитный фактор от вирусов и существует независимо от сывороточного. Местная резистентность слизистых оболочек от вирусных инфекций тесно связана с количеством S IgA на их поверхности. S IgA также защищает слизистые оболочки от адгезии на них патогенных микроорганизмов.

IgM. Иммунный ответ организма начинается из синтеза IgM. Они синтезируются быстро, но иммунологическая память клеток, которые их синтезируют либо отсутствует, либо сохраняется кратковременно. Период полураспада - 5 суток. IgM содержит дополнительную цепь J, которая объединяет 5 мономеров в одну структуру. IgM имеет 10 активных центров и дополнительный домен СH4, который активно фиксирует комплемент. Основным источником IgM является селезенка. IgM находится в крови и секретах, и им, в основном, обусловлены бактерицидные свойства этих веществ.

IgE- реагины играют основную патогене- тичну роль в аллергических реакциях немедленного типа. Ig E синтезируются в коже, лимфоидной ткани дыхательных путей и кишечника. По своей структуре они несколько отличаются от IgG. У IgE на один домен больше (СН4). Это свойство обусловливает особенности биологической функции IgE – способность адсорбироваться на базофилах и тучных клетках при помощи домена СН4 Fc - фрагмента.

IgD. Строение этого класса иммуноглобулинов сходное с IgG. Однако они не способны фиксировать комплемент. Сравнительно большее их количество находится в сосудах, чем за их пределами. IgD как и IgМ, является одним из поверхностных рецепторов В-лимфоцитов.

Класс Количество активных центров Место действия Функции IgG 2 Кровь Тканевые жидкости проходит через плаценту Повышает активность макрофагов Антитоксины Агглютинация IgM 10 Кровь Тканевые жидкости Агглютинация IgA 2 или 4 Секреты (слюна, слезы, тонкий кишечник, вагина, простата, нос, грудное молоко) Предупреждает адгезию бактерий к клеткам хозяина, заселение бактериями слизистых оболочек IgE 2 Ткани Активирует тучные клетки Гистамин Немедленный ответ

Как работают антитела? Функции антител: Нейтрализация Опсонизация Антитело-зависимая цитотоксичность Активация комплемента Специализированная роль: Иммунитет слизистых оболочек Иммунитет новорожденных

Гибридомы и моноклональные антитела. Сфера использования. Гибридомы - клетки, полученные в результате слияния лимфоцитов от иммунизированной определенным антигеном мыши с гистогенетический близкой опухолью (миеломой). Эти клетки способны бесконечно делиться и продуцировать специфические антитела. Антитела, которые синтезируются одним клоном гибридных клеток, получили название моноклональных. Впервые осуществили этот процесс Г. Келлер и Ц. Мильштейн в 1975 году. До момента получения гибридом в иммунологии не было препаратов специфических антител такой чистоты.

1. Иммунизация мышей антигеном, против которого нужно получить антитела. 2. Выделение клеток селезенки иммунизированных животных. 3. Получение клеток миеломы у мышей, пораженных этой опухолью. 4. Слияние клеток селезенки с клетками миеломы. 5. Тестирование необходимых клеток и их клонирование. 6. Культивирование гибридом в организме животных или в культуральных средах. 7. Очистка гибридомных антител. Этапы получения гибридомы:

Практическое использование моноклональных антител Идентификация и очистка молекул и клеток, которые несут специфический антиген. Диагностика в следующих методических вариантах: иммуноанализ биологических жидкостей и клеток организма типа РИА, ИРМА, ИФА, иммунофлуоресценции, микроцитофлюорометрии, микроскопии, иммунодиффузии, иммуноэлектрофореза, иммуноблоттинга и др. Лечение: экстракорпоральная обработка тканей ( чаще костного мозга при трансплантациях ); введение свободных антител in vitro или in vitro антител, связанных со лекарственными веществами ( иммунотоксин). Исследование этиологии и патогенеза разных заболеваний.

CD8 T клетки атакуют клетку, инфицированную вирусом СПИДа.

Поверхностные клеточные белки (желтые) концентрируются в области контакта двух иммунных клеток, что обмениваются информацией. Они сообщают Т клетке-киллеру (внизу слева), что с В клеткой (дело) все в порядке. Для клеток, которые не прошли тест на жизнеспособность или безопасность, в клетки убийцы заготовлено «оружие» гранулы с кислым содержанием (красные), готовы направиться к месту контакта (синапса) и сделать смертельную инъекцию.

Імунна сітка