«SPINE MEDICAL». Эксклюзивный дистрибьютор проточных цитометров ЦитоСенс в России. 129272, г Москва, Олимпийский проспект, д. 26 телефон:+7 495 669 64. - презентация

1 «SPINE MEDICAL». Эксклюзивный дистрибьютор проточных цитометров Цито Сенс в России , г Москва, Олимпийский проспект, д. 26 телефон: , Е:

2 Оценка состояния водных экосистем методом проточной цитометрии. Ни одна экологическая экспертиза водной среды не обходится без исследований фитопланктона, то есть, мелких водорослей живущих во всех пресноводных и морских местообитаниях.

3 Фитопланктон. Основа практически всех пищевых сетей. Необычайно чувствительный компонент экосистем к изменениям во внешних условиях. При неблагоприятных условиях массовое развитие отдельных микроводорослей может вызывать трагические изменения в окружающей среде.

4 Квалифицированная обработка одной пробы фитопланктона под микроскопом занимает минимум несколько часов и по международным расценкам стоит евро. В России на данный момент осталось не более 15 специалистов способных проделать такую работу. Из этих 15 не более 10, которые возможно возьмутся за это.

5 Выходом из создавшейся ситуации является использование современных методов проточной цитометриии (то есть, учет клеток микроводорослей приборами), специально разработанных для исследований фитопланктона в естественных местообитаниях без фиксации проб, транспортировки их в лаборатории и последующей длительной микроскопии.

6 Проточная цитометриия метод исследования рассеянных частиц в режиме поштучного анализа элементов по сигналам светорассеяния и флуоресценции. Название метода связано с его основным применением, а именно, с исследованием одиночных биологических клеток в потоке. Основа метода заключается в: 1) использовании системы гидрофокуссировки, которая обеспечивает прохождение клеток в потоке поодиночке; 2) облучении клетки лазерным излучением; 3) регистрации уровня сигналов светорассеяния и флуоресценции от каждой клетки (Википедия). Что такое проточная цитометриия?

7 Клетки фитопланктон Датчик рассеивания Датчик флуоресценции Выстраивание клеток в потоке Лазер Оболочка из специальной жидкости Упрощенная схема принципа работы проточного цитометра. Частица

8 Преимущества CytoSense. Проточный цитометр CytoSense, сочетает в себе классические принципы проточной цитометриии с фото (видео) регистрацией всех частиц и клеток микроводорослей.

9 CytoSense снабжен капиллярами для регистрации самых больших представителей фитопланктона (до 1.5 мм). То есть, обеспечивает статистически достоверный подсчет крупных клеток и клеток, собранных в колонии, цепочки. CytoSense специально приспособлен к работе в полевых условиях, необычайно компактен, весит менее 20 кг, его диаметр 30 см, высота 45 см. CytoSense работает от сети 110/220 V или 12/24 V батареи CytoSense имеет две модификации: CytoSub и Cytobuoy.

10 CytoSense имеет две модификации: CytoBuoy и CytoSub. CytoSense работает от сети 110/220 V или 12/24 V батареи.

11 CytoSense. Блоки Электронный. Оптический. Флюидная система. слив исходная проба

12 CytoBuoy. CytoBuoy – полностью автономная система мониторинга. Плавающий буй, самостоятельно проводящий измерения и передающий информацию исследователю на расстоянии до 10 км в прямой видимости; возможна модификация со спутниковой связью.

13 Запрограммированный режим работы, «спящий режим» с включением по таймеру, режим слежения за потенциально опасными водорослями. Речная и морская модификации (один или два фильтра для удаления взвешенных частиц, фильтр для снижения фоновой флуоресценции).

14 CytoSub – подводный аппарат. CytoSub – погружаемая модификация, приспособленная для работы с борта судна до глубины 20 или 200 м (модели для пресных и морских вод). Проточная система работает при нормальном давлении, CytoSub можно использовать как настольный. Коннекторы для подключения кабеля (возможна автономная работа).

15 CytoSense, CytoSub, CytoBuoy. Один или два лазера разных длин волн и мощности Низкотурбуленнтная проточная система для хрупких частиц. Флюидная система позволяет контролировать скорость потока, выравнивает частицы по продольной оси Дозирование: бесклапанное, волюметрическое Модуль детекции из 3 детекторов: прямое рассеивание, боковое рассеивание, красная флуоресценция, (фотоумножитель для желтой, зеленой и оранжевой флуоресценции). Возможно использование до 6 детекторов,включая детектор поляризации. Дополнительный датчик бокового рассеивания позволяет определять кривизну клеток (колоний) водорослей.

16 CytoSense, CytoSub, CytoBuoy. Считывание непрерывного импульса всех датчиков облегчает морфологическое описание частицы (клетки). Фотокамера: 20 кадров в секунду, матрица 1280 х 1024 пикселей, специальный объектив х 10, живой режим, возможна предустановка параметров, возможность выбора объектов заранее по измеряемым сигналам и параметрам. Программное обеспечение и компьютер (оперативная память 4 гб).

17 Основные этапы работы CytoSense: Длина Средний размер Структура Форма Пигменты Клетка в потоке жидкости проходит через луч лазера. Свет рассеивается по всех направлениях. Клетки фитопланктона, способные к флуоресценции, испускают флуоресценцию.

18 Рассеяние и флуоресценция собираются на детекторах. Собранный свет конвертируется в электрический импульс, а затем в цифровое значение. Далее информация сохраняется на компьютере для дальнейшего анализа.

19 Сравнение 2-х проточных цитометров, на которых возможен учет фитопланктона. Объект: живые и неживые микроскопические объекты. Одиночные клетки и колонии. CytoSense: Accuri C6: Размер: 1 – 700 мкм (диаметр), до 10 мм длиной. (есть модификации, позволяющие параметризировать пико частицы от 0,4 мкм). Концентрация: 10 2 – частиц/л Скорость тока: 0,1 – 1 мкл/сек. Постоянная калибровка: не требуется!!! Регулярная промывка: не требуется!!! Работает с любыми сосудами и нативными пробами Прибор специально спроектирован для планктонных работ. Объект: вирусы, бактерии и культуры водорослей. Размер: 0,5 – 50 мкм (диаметр). Нужна префельтрация нативных проб. Концентрация: до 5x10 10 частиц/л. Скорость тока: 0,17-1,67 мкл/сек Встроенная камера: нет. Постоянная калибровка: требуется!!! Регулярная промывка буфером: требуется!!! Требуются специальные пробирки и планшеты – может понадобиться концентрирование пробы!!! Адаптированная версия медицинского оборудования. Встроенная камера: есть

20 CytoSense - как выглядит информация? CytoSense – камера Skelethonema marinoi (название водоросли) Chl a Прямое рассеивание Боковое рассеивание carotenoids Cytobuoy данные Диатомеи

21 Результаты Хлорофилл «а» и флуоресценция Соотношение суммарного сигнала флуоресценции фитопланктона измеренного CytoSense и концентрации суммарного хлорофилла «a» (классический метод Parsons et al., 1984). Коэффициент корреляции (= 0,83) показывает хорошую сходимость результатов СytoSense и классического метода.

22 Результаты по мелким видам Micromonas pusilla (средний размер 1.5 микрона) Сходимость результатов CytoSense и микроскопии еще выше, коэффициент корреляции = 0,89 Спектры выглядят так же, как у близкого вида Phaeocystis poushetii. Необходим контроль под микроскопом.

23 Результаты по крупным колониальным видам Колониальная диатомея Skelethonema marinoi ( > 10 микрон) Спектры 6 клеток, собранных в колонию Сходимость результатов CytoSense и микроскопии хорошая, коэффициент корреляции = 0,87

24 Для чего же нужен Цито Сенс? Использование водных объектов для разведки и добычи полезных ископаемых осуществляется в соответствии с Водным кодексом РФ и законодательством о недрах. То есть, компании, связанные с добычей и переработкой нефти и газа должны основываться на требованиях экологической безопасности. В свою очередь, эффективная система экологического мониторинга базируется на использовании современных методов и технических средств, обеспечивающих высокий уровень экологической безопасности, рациональное использование природных ресурсов и минимизацию ущерба, наносимого окружающей среде.

25 Заключение: Цито Сенс позволяет получать достоверные количественные данные о численности и физиологическом состоянии клеток фитопланктона; Для корректного определения водорослей и интерпретации данных необходимо проанализировать под микроскопом лишь несколько проб, а не весь огромный объем материала; Цито Сенс может давать количественную информацию по клеткам фитопланктона размером от 1-3 микрон до 500 микрон имеющих разные формы, одиночных и колониальных.

26 Спасибо за проявленный интерес!