Некоторые методы молекулярной биологии Денис Ребриков.

Презентация:



Advertisements
Похожие презентации
Информация о компании ЗАО «НПФ ДНК-Технология» Основана в 1993 году Специализация: производство оборудования и реактивов для ПЦР, лабораторная диагностика.
Advertisements

Некоторые методы молекулярной биологии Дей Е.В.. Полимеразная цепная реакция Принцип ПЦР сформулировал Гобинд Корана в 1971 В 1983 Кэри Мюллису удалось.
Теоретические основы полимеразной цепной реакции.
ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
Полимеразная цепная реакция в реальном времени. Изобретение ПЦР Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрел в 1983 году американский ученый Кэри Мюллис.
Шамбер Александр, Ученик 10аш класса Руководитель: Матвеева Татьяна Валерьевна Консультант: Калиничева Наталья Юрьевна ГОУ СОШ 303 им. Ф.Шиллера.
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное образовательное учреждение высшего образования «БРЯНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ.
ПЦР – метод амплификации, т.е. получения большого числа копий нужного гена или его фрагмента в условиях in vitro. Реакционная смесь для получения нужной.
Полимеразная цепная реакция Генерозова Анна, 9 класс «А»
Полимеразная цепная реакция Метод, который перевернул современную молекулярную биологию.
СРС Тема: Молекулярно-биологические методы: гибридизация НК, ПЦР, секвенирование ДНК. Прикладная иммунология. Выполнила:Кыстаубаева Ж.А. 219 группа ОМФ.
Методы молекулярной диагностики. Использование молекулярных методов привело к увеличению специфичности, чувствительности диагностики инфекционной и неинфекционной.
РАЗРАБОТКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ РАННЕЙ ДИАГНОСТИК ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ НА ОСНОВЕ БИОЧИПА Ю.А. Королёва Балтийский федеральный университет имени И. Канта.
Генная Инженерия Работу выполнил ученик 10 класса – Кириллов Роман.
ДНК диагностика фитопатогенов. Методы диагностики Визуальный Индикаторные растения Электронная микроскопия Серологическая диагностика ДНК диагностика.
Рынок ПЦР исследований в России и за рубежом. Текущее состояние и основные тенденции развития. Колин В.В г.
Определение соотношения патогенных микроорганизмов десневого кармана в норме и при пародонтите Брехов Антон, 11 «Б» Научный руководитель: д.б.н. Ребриков.
Составление генетических паспортов и установление родственных связей Москва 2010.
Wet Lab Смирнов Арсений Пензенцева Евгения. ДНК (4 нуклеотида: А, Т, G, C) 3.
Контроль качества: Молекулярная диагностика. Контроль качества молекулярной диагностики – Тема Общий подход Взятие, транспортировка и обработка.
Транксрипт:

Некоторые методы молекулярной биологии Денис Ребриков

Полимеразная цепная реакция Принцип ПЦР сформулировал Гобинд Корана в 1971 В 1983 Кэри Мюллису удалось провести ПЦР В 1993 за изобретение ПЦР Кэри Мюллису вручена Нобелевская премия по химии

Инфекции крови (качественное и количественное определение) ИППП Эпидемические инфекции Исследование биоценозов и др. … Выявление патогенов

ПЦР позволяет определять вставки, делеции или однонуклеотидные замены в геномной ДНК Сейчас с помощью ПЦР диагностируют более 200 наследственных заболеваний, таких как: –Фенилкетонурия –Муковисцидоз –Миодистрофия Дюшенна/Беккера –Хорея Гентингтона –Гемофилия А, В –Болезнь Вильсона-Коновалова –и др. … Исследование генома

Исследование мРНК Относительная экспрессия в двух образцах Определение абсолютного кол-ва копий мРНК на клетку

контроль за использованием ГМ организмов (ГМО) контроль за наличием и процентным содержанием ГМ ингредиентов (ГМИ) в пище Определение вида и индивида ПЦР позволяет осуществлять: Мониторинг живых систем

Принцип ПЦР

Экспоненциальная амплификация

Программа амплификации Денатурация ДНК Отжиг праймеров Достройка праймеров Число циклов

Компоненты реакции вода буфер dNTP праймеры полимераза зонды, интеркаляторы масло

Оборудование для ПЦР

«Проявка» хода реакции Флуоресцентные красители и тушение флуоресценции 5-экзонуклеазная активность Taq-полимеразы

Гибридизационные методы Меченые праймеры Sunrise=AmplifluorScorpions Меченые зонды kissing probes= adjacent probes Complementary oligosTaqManBeacons

Разгорание пробы Принцип флуоресцентной детекции

Форма графиков накопления ДНК

начало быстрого падения Е Е почти константа

Результаты ПЦР на образцах с одинаковым количеством ДНК

Вычитание геномов Денис Ребриков

На Земле существует около 2,5 млн видеов живых существ. Все это разнообразие определяют различия в строении геномов отдельных видеов. Организм человека состоит из примерно 210 основных типов клеток, существенно отличающихся фенотипически. Это разнообразие связано с различными вариантами экспрессии одного и того-же генома.

Сравнение кДНК для поиска дифференциально экспрессируемых генов

Сравнение бактериальных геномов для поиска штамма- специфичных генов

Сравнение эукариотических геномов для поиска видео- и раса специфичных последовательностей ?

Для поиска дифференциально представленных молекул применяют методы вычитающей гибридизации

Принцип метода Амплификации после SSH подвержены только молекулы с разными адаптерами

Эффективность применения SSH

Упрощение с варьирующими параметрами Анализ на полиакриламидном геле Стратегия дифференциального дисплея Опухолевая трансформация А В Выделение РНК ~2 x10 4 видеов мРНК АВ

Использование УДД для поисков маркеров различных регионов тела планарии 3c3c 2 а

Информация о компании ЗАО «НПФ ДНК-Технология» Основана в 1993 году Специализация: производство оборудования и реактивов для ПЦР, лабораторная диагностика Состояние на январь 2007 года –более 170 сотрудников, из них 20 - кандидаты наук –собственная научная база для работ в области генной и белковой инженерии, синтеза олигонуклеотидов, секвенирования ДНК, разработки оборудования –собственное производство оборудования и диагностических наборов –диагностическая лаборатория для всех видеов исследований