ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ГЕНЕРИЧЕСКИХ ЛС - ОСНОВНОЙ ЭТАП ИХ ЭКСПЕРТИЗЫ Кукес В.Г. Раменская Г.В. Насонов А.С.

Известно, что оценка биоэквивалентности генерических ЛС является основным видом медико- биологического контроля качества воспроизведенных препаратов, предназначенных для внесосудистого введения В качестве препарата сравнения следует использовать соответствующий оригинальный препарат, если он официально зарегистрирован в Российской Федерации, или его аналог, нашедший в Российской Федерации наиболее широкое медицинское применение.

По литературным данным объем продаж воспроизведенных ЛС на фармацевтическом рынке составляет: США - около 25%, Германии - 35%, Великобритании - 55%, Венгрии - 55%, Польше - 61%, Словакии - 66%. России - 78%

В настоящее время в России зарегистрировано свыше генериков

ГЕНЕРИЧЕСКИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ПРЕПАРАТЫ, ЗАРЕГИСТРИРОВАННЫЕ В США, ГЕРМАНИИ И КАНАДЕ НА ОСНОВАНИИ ДАННЫХ ИХ БИОЭКВИВАЛЕНТНОСТИ Амоксициллин Аллопуринол Азатиоприн Ацетозаломид Верапамил гидрохлорид Вальпроат Гуанидин сульфат Доксициклин Индометацин Изосорбит динитрат Кломифен Карбидопа Карбамазепин Кетоконазол Леводопа Левамизол Метронидазол Метотрексат Меркаптопурин Нифедипин Пиразинамид Пириметамин Прокарбазин гидрохлорид Прокаинамил гидрохлорид Пропранолол гидрохлорид Рифампицин Сальбутамол Спиролактон Сульфадоксин Сульфаметоксазол Сульфасалазин Тамоксифен цитрат Толбутамид Триметоприм Фенотоин Флуцитозин Флудрокортизон ацетат Фуросемид Этинилестрадиол Этамбутол гидрохлорид Циклофосфамид Ципрофлоксацин

В России регистрация ЛС проводится на основе: - Федерального закона от 22 июня 1998 г. N 86-ФЗ "О лекарственных средствах", Принятого Государственной Думой 5 июня 1998 г. и Одобренного Советом Федерации 10 июня 1998 г. - и ряда утвержденных подзаконных актов, регламентов и инструкций.

С целью гармонизации требований к регистрации ЛС в РФ с Европейским содружеством и с FDA (США) в подведомственных актах выпускаемых в РФ учтены основные положения регламента ВОЗ и Европейской ассоциации фармакологов, если они не противоречат положению закона "О лекарственных средствах"

1. In vivo bioequivalence guidances – USP 2. EMEA, The rules governing medicinal products in the European Union. Investigation of Bioavailability and Bioeauiralence. 3. Руководство для органов по регулированию оборота лекарственных средств (серия пособий по вопросам регулирования 5) Всемирная организация здравоохранения При разработке Методических указаний по биоэквивалентности в РФ использовались:

Исследования биоэквивалентности в РФ выполняются только после одобрения Национального Комитета по Этике и с разрешения Росздравнадзора.

Исследования биоэквивалентности ЛС проводятся по открытой, pандомизиpованной и пеpекpестной схеме на 18 здоровых добровольцах, за исключением изучения БЭ противоопухолевых и психотропных препаратов исследования которых должны проводится на больных или на крупных видах животных.

Закон подлости: Чем хуже всасывание, тем больше вариабельность. Чем больше вариабельность, тем больше нужно испытуемых

Фармакокинетика этацизина N=12 N=18

Аналитический метод должен обеспечивать избирательное, точное и воспроизводимое определение концентрации препаратов при выбранных условиях в соответствии с утвержденным протоколом фармакокинетического исследования. Кинетические исследования проводятся в независимых (от фирм изготовителей) сертифицированных кинетических лабора- ториях.

В ряде случаев происходит очень быстрый метаболизм ЛС. Не всегда удается определить его концентрацию в пробе крови. В этом случае рекомендуется оценить БЭ по концентрации метаболита, поскольку он быстро растворим и выделяется с мочой, то концентрацию можно определить только в моче (алендроновая к-та, лозартан и его метаболит Е3179 и т.д.)

ЛС МЕТОД Амлодипин Эналаприл Рокситромицин Карведилол ВЭЖХ с электрохимическим детектором ИФА Микробиологический ВЭЖХ с флуориметрическим детектором

ПараметрДоверительный интервал AUC тест /AUC референс 80 – 125 (C max /AUC) тест / (C max /AUC) референс C max(тест) / C max(референс) 75 – 133 ЛС считаются биоэквивалентными, если полученные результаты не выходят за рамки доверительного интервала

Существуют ситуации когда ЛС метаболизируются в организме с образованием активных метаболитов. Нередко, фармакологическая активность которых выше, чем у ЛС. При регистрации генерических ЛС, например, статины, клопидогрел, ИАПФ и др., рекомендуется изучать БЭ самого ЛС, и его активного метаболита.

CYP3A4,1A2 Верапамил Норверапамил Нифедипин CYP3A4 неактивен 20% активности верапамила В результате биотрансформации из ЛС может образовываться активные или неактивные метаболиты

На образование метаболита влияют: - генетические факторы - ингибирование и индуцирование ферментов - физико-химические свойства субстанции ЛС - качество ЛС БЭ Например - из S-изомера ЛС S-изомер метаболита - большая форма кристаллов ЛС замедление абсорбции скорость и полнота высвобождения ЛС из ЛФ

С целью усовершенствования проведений исследований по биоэквивалентности необходимо ответить на следующие вопросы: 1. Нужно ли проводить после БЭ клинические исследования? Если да, то в каких случаях? Каких придерживаться правил, если Т 1/2 более 40 часов (например флуоксетин часов)? Когда необходимо брать пробы крови в течение 4 Т 1/2 (5 суток, катетер в вене будет находиться не менее 10 дней). Исследование не возможно с этической точки зрения. 2. Как проводить исследование БЭ на больных, если препарат отменять нельзя? - например: противоэпилептическое ЛС По регламенту между периодами исследования должен быть период «отмывки» 5-7 суток. А этично ли это будет оставлять больного на этот период без лекарственной терапии?

Ответ на 1 вопрос: Если AUC тест /AUC референс и (C max /AUC) тест /(C max /AUC) референс находятся на уровне верхней границы доверительного интервала, то нельзя исключить, что при курсовой терапии возможно нарастание равновесной концентрации, а ЛС (антидиабетические ЛС, α- и β-стимуляторы, иммуносупресоры и т.д.) имеющие четкую взаимосвязь между показателями фармакокинетики и фармакодинамики могут вызвать НЛР.

Учитывая специфичность действия этих ЛС мы рекомендуем проводить пострегистрационные клинические исследования с обязательным определением С ss, хотя бы в течение 4 периодов Т 1/2. Ответ на 2 вопрос: Приведем данные о НЛР при разовом их применении (данные по амитриптилину и глибенкламиду).

АМИТРИПТИЛИН По данным Немецкой национальной программы по безопасности лекарственных средств в психиатрии (АMSP), частота серьезных нежелательных реакций амитриптилина составляет 1%, при этом чаще всего наблюдались: - делирии - судорожный синдром - острая задержка мочи - ортостатический коллапс Всего при применении амитриптиллина, нежелательные лекарственные реакции развиваются в 37,1%, чаще в виде чрезмерной седации. Источник: Severe adverse drug reactions of antidepressants: results of the German multicenter drug surveillance program AMSP. Pharmacopsychiatry Mar;37 Suppl 1:S39-45.

ГЛИБЕНКЛАМИД Частота гипогликемий при применении глибенкламида составляет 17%! Источник: Glibenclamide vs gliclazide in type 2 diabetes of the elderly. Diabet Med Dec;11(10):

Что мы предлагаем: 1. Изучать БЭ на крупных видах животных (собаки, минисвиньи, овцы, чьи генетические параметры близки к человеческим). 2. При положительных результатах и соответствии теста «сравнительной кинетики растворения» in vitro, провести 3. Пострегистрационные сравнительные клинические исследования с определением равновесной концентрации (C SS ) в течение 4 Т 1/2 на 24 больных (12 больных, получающих препарат новации и 12 больных, получающих препарат генерик). Возможно на 18 больных провести последовательное изучение равновесной концентрации обеих препаратов.

Не будет ли более достоверным, если оценивать генерический препарат по их фармакологическому действию? Для ответа на этот вопрос, приведем данные по результатам мультицентровых исследований некоторых ЛС. И по итогам полученных результатов - ответить на вопрос.

Насколько достоверны и воспроизводимы результаты ККИ?

Мы проанализировали эффективность ЛС в различных КИ и был выявлен значительный разброс ЛОВАСТАТИНФЛУОКСЕТИН MARS FATS CLAPT LRT EXCEL РКИ из базы CENTRAL Достижение «целевых» уровней ЛНП у 30-75% пациентов Эффективность при депрессии %

МЕТОПРОЛОЛВАРФАРИН MERIT-HF COMET OASIS ATLAS PREVENT VanQWISH ЧАСТОТА БРОНХОСПАЗМА 2-10% ЧАСТОТА КРОВОТЕЧЕНИЙ 9-26,5% Мы проанализировали безопасность ЛС в различных КИ и также был выявлен значительный разброс

Разброс величины удлинения интервала QT при применении спарфлоксацина в 5 РКИ Автор РКИ Ср. величина удлинения интервала QT, мс Gradwohl, ,3±27,6 Baddour, Segure, ,1 Jacobs, 19975±25,6 Suzuki, 19984,6±2,3

Разброс в эффективности карведилола при ХСН в четырех РКИ Снижение смертности, %

Ответ на назначение иГКС в одинаковой дозе у 895 больных БА спустя 12 нед. лечения. Malmstrom, K et al. Ann Intern Med 1999;130, ~25% больных БА не отвечают на лечение! ~25% больных БА не отвечают на лечение!

Т.о. представленные данные показывают, что имеются большой разброс в оценке эффективности ЛС и НЛР, при проведении МцКИ - тех исследованиий, когда рандомизация больных по протоколу чрезвычайно тщательна. Ведь эти исследования легли в основу принципов доказательной медицины. Значит БЭ по нашему анализу остается наиболее достоверным, быстрым, удобным методом оценки качества генериков.

Причины возможного снижения качества генериков по сравнению с инновационными препаратами: Изменение метода синтеза активной субстанции может привести к увеличению % примесей и их состава. Характер производства, а так же изменение вспомогательных веществ. Изменение технологии производства.

Например амлодипин L- изомер – фармакологически активен D- изомер – фармакологически неактивен До 80% L оптимальный эффект Менее 50% L отсутствие эффекта 95% L побочные эффекты

Зависимость растворения фуросемида от морфологии и размеров кристаллов Myriam Hassoun M Hassoun, 2003

Взаимосвязь размеров кристаллов субстанции тамоксифена и его фармакокинетики В.В. Чистяков, 2004 A Adjei, 1990 Взаимосвязь размеров кристаллов субстанции лаурила ацетата и его фармакокинетики Мелкие кристаллы Крупные кристаллы Мелкие кристаллы Крупные кристаллы

Прежде чем регистрировать ЛС надо зарегистрировать субстанцию, требования к качеству которой должны гармонизировать с требованиями BP и USP При разработке новой технологии получения субстанции необходимо разработать и прменять новый аналитический контроль полупродуктов и самой субстанции. Если применяется старый аналитический контроль, то он не может оценить качество сусбанции и выявить примеси. Поэтому при регистрации новой субстанции необходимы сведения о путях ее синтеза, для прогнозирования наличия возможных примесей Так например: одна субстанция диклофенака вызывала побочные эффекты. При анализе путей ее синтеза было выявлено, что она содержит бром, что было подтверждено в дальнейшем. С ним и были связаны побочные эффекты Академик РАМН Глушков Р.Г.

Также при регистрации субстанции необходимо представлять данные о соотношении оптических и стереоизомеров. Это касается и оригинальных препаратов. На сегодня известно, что ряд препаратов зарегистрированные как рацематы являются более активными если применяются в виде активного оптического изомера. Пример: амлодипин, клопидогрель, омепразол, верапамил и др.

BASF Aktiengesellschaft В состав кишечно-растворимых таблеток омепразола добавили гидрофосфат натрия (Na 2 HPO 3 ), что увеличило их стабильность.

Но при этом меняется кинетика растворения таблеток при рН 6,8. Например, через 15 минут растворяется около 20% таблеток, не содержащих Na 2 HPO 3 и 50% таблеток, содержащих Na 2 HPO 3.

Спасибо за внимание и терпение!