Выполнила: Столяр Марина Александровна Руководители: канд. биол. наук, проф. Н.М. Титова, канд. мед. наук, доц. И. А. Ольховский Красноярск 2012 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования «СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт Фундаментальной Биологии и Биотехнологии Кафедра Медицинской биологии

Клетки крови под электронным микроскопом: эритроцит, тромбоцит и лейкоцит Гранулы тромбоцитов, их компоненты

Схема тромбоцитарного гемостаза тромбоцит Аспирин ЦОГ2

*здесь и далее АСК- ацетилсалициловая кислота *

выявление оптимальных способов и методов диагностики резистентности к ацетилсалициловой кислоте.

В качестве объекта исследования использовалась цельная кровь пациентов больницы КНЦ СО РАН и добровольцев. В работе использованы следующие методы измерения агрегации тромбоцитов: Оптический; Импедансный; Люминесцентный. Агрегометр CHRONOLOG

Цельная кровь Центрифугирован ие Плазма (бедная и богатая тромбоцитами) Анализ агрегации Импедансный и люминесцентный методы Оптический метод является "золотым" стандартом в агрегометрии; длительный и трудоёмкий процесс подготовки плазмы; механические воздействия на клетки. не нарушается естественное окружение тромбоцитов; не снижается концентрация лабильных медиаторов к моменту измерения; можно проводить измерения агрегации даже в гемолизированных, липемичных образцах; относительная быстрота; при люминесцентном измерении одновременно с агрегацией тромбоцитов можно исследовать и другие процессы, например, процессы секреции гранул. не нарушается естественное окружение тромбоцитов; не снижается концентрация лабильных медиаторов к моменту измерения; можно проводить измерения агрегации даже в гемолизированных, липемичных образцах; относительная быстрота; при люминесцентном измерении одновременно с агрегацией тромбоцитов можно исследовать и другие процессы, например, процессы секреции гранул.

степень агрегации – максимальный процент светопропускания образца или сопротивления электродов, зарегистрированный прибором; скорость агрегации – увеличение светопропускания образца или сопротивления электродов за 1 мин; площадь графика – произведение максимальной амплитуды агрегации на время её достижения. скорость амплитуда Площадь графика

Определение антитромботического эффекта АСК в цельной крови Определение антитромботического эффекта АСК в плазме крови

1)Люминесцентный метод определения аспиринорезистентности в цельной крови Рисунок 1 – Изменение функциональной активности и секреции гранул тромбоцитов после инкубации с АСК в цельной крови

2)Импедансный метод определения аспиринорезистентности в цельной крови Рисунок 2 – Изменение функциональной активности тромбоцитов после инкубации с АСК в цельной крови

3)Изменения других параметров агрегации тромбоцитов после инкубации проб с АСК (а именно: а, б, в – амплитуды, угла наклона касательной и площади под графиком соответственно) аб в

** КИА и КИС – коэффициенты ингибирования агрегации и скорости соответственно Рисунок 3 – Индивидуальная диаграмма степени «аспиринорезистентности»

Определение агрегации ИндукторАмплитуда %уголплощадь АДФ норма Коллаген ,8норма Адреналин ,5норма метод амплитудауголплощадь КИА, %КИС, % КИП,% оптика ,526,438,437,7 импеданс ,060,064,0 люминесценция 1,6168 6,557,141,2 58,5 Комплексная диагностика, индивидуаль ный подход Точный диагноз

ВЧЕРА Экспериментальное назначение лечения Личный опыт врача Препарат А Препарат В Препарат С Препарат D Затраты: время, деньги и здоровье ДИАГНОСТИКА Препарат А Препарат В Препарат С Препарат D Экономия: время, деньги и время болезни

1. Ацетилсалициловая кислота in vitro снижает как агрегацию тромбоцитов, так и интенсивность реакции высвобождения АТФ из их гранул. 2. Ацетилсалициловая кислота in vitro уменьшает, наряду с амплитудой, другие параметры агрегации тромбоцитов. 3. Отмечаются индивидуальные особенности в характеристиках кривых оптического поглощения, импеданса и интенсивности люминесценции. 4. Необходимо комбинированное использование оценки параметров агрегационных характеристик и динамики секреции содержимых гранул тромбоцитов для оценки степени «аспиринорезистентности» конкретного индивидуума.

« Лекарство – яд в руках невежды» Древнее индийское изречение Ваши вопросы