У 2008 році розпочато дослідження з вивчення впливу хрому на репродуктивну здатність кролиць. які було продовжено у 2009 році на культурі клітин ембріональних фібробластів та ендометрію, що дозволило встановити оптимальні дози його застосування для підвищення відтворювальної функції самок. Окремі метали є ессенціальними мікроелементами, тому дослідження впливу органічних сполук важких металів, таких як мідь, хром та марганець, які відіграють важливу роль в обмінних процесах як в цілому організмі, так і в матці в період вагітності вимагають подальших досліджень і, в перспективі, розробки нових форм їх застосування.

Дослід 4 проведено з метою зясування впливу хелатної сполуки хрому – хром- метіоніну на репродуктивну функцію самиць, стимуляцію формування ембріонально- маткових взаємодій та біохімічні показники антиоксидантного захисту і перекисного окислення ліпідів. Дослідження були продовженням досліду розпочатого у 2008 році. Дослід був проведений на 12 кролематках породи «карпатський паннон», які належали Мукачевському ПП «Карпатський паннон». Дослід 4 проведено з метою зясування впливу хелатної сполуки хрому – хром- метіоніну на репродуктивну функцію самиць, стимуляцію формування ембріонально- маткових взаємодій та біохімічні показники антиоксидантного захисту і перекисного окислення ліпідів. Дослідження були продовженням досліду розпочатого у 2008 році. Дослід був проведений на 12 кролематках породи «карпатський паннон», які належали Мукачевському ПП «Карпатський паннон».. ГрупиХарактеристика групМаніпуляції КонтрольОсновний раціон (ОР) Запліднення кролематок після згодовування хрому впродовж 6-ти тижнів Забій на 14 день вагітності Загальний аналіз крові кролиць Вміст білків і співвідношення окремих білкових фракцій у сироватці крові Вміст продуктів ПОЛ у сироватці крові Вміст продуктів ПОЛ в тканинах Активність антиоксидантних ферментів у сироватці крові Активність антиоксидантних ферментів у тканинах Дослідна 1ОР+25 мкг/гол/день Дослідна 2ОР+50 мкг/гол/день Хром-метіонін додавали впродовж 6 тижнів до запліднення самиць. Кролематок забивали на 14 день вагітності. В плазмі крові кролиць та відібраних зразках тканин, які зберігалися в азоті, в 2009 році визначали вміст продуктів ПОЛ: гідроперекисів ліпідів, малонового діальдегіду та рівень активності глутатіонпероксидази, каталази і супероксиддисмутази. Проводили загальний аналіз крові та вміст загального білка і відсоткове співвідношення білкових фракцій у сироватці.

Видалення ембріонів та одержання фрагментів матки для досліджень

Встановлено підвищення вмісту гідроперекисів ліпідів у плазмі крові кролиць 1-ї дослідної групи у порівнянні з 2-ю дослідною групою. Вміст малонового діальдегіду у плазмі крові кролиць дослідних груп вірогідно знижувався у порівнянні з контрольною групою Досліджувані показники Групи Контрольна1-а дослідна2-а дослідна Гідроперекиси ліпідів, ОЕ/мл 3,85±0,074,08±0,113,69±0,03 Малоновий діальдегід, мкмоль/мл 2,46±0,061,8±0,06**1,56±0,07*** Активність супероксиддисмутази та глутатіонпероксидази у крові кролиць дослідних груп збільшується, що вказує на активацію антиоксидантного захисту в організмі кролиць дослідних груп Досліджувані показники Групи Контрольна1-а дослідна2-а дослідна Каталаза,ммоль/мг білка за хв5,02±0,07±5,47±0,04*5,32±0,28 Супероксиддисмутаза, у.о./мг білка0,412±0,020,438±0,020,380±0,08 Глутатіонпероксидаза,мкмоль/мг білка за хв 42,07±1,354,02±1,4**50,45±1,3*

У матці встановлено зростання кількості гідроперекисів ліпідів у тварин 1-ої дослідної групи та зниження у тварин 2-ої дослідної групи. У тканинах печінки не встановлено суттєвих міжгрупових різниць стосовно концентрації гідроперекисів ліпідів (табл ). Концентрація малонового діальдегіду в тканинах печінки та матки 1-ої дослідної групи та контрольної була приблизно однаковою. Тоді, як додавання до раціону кролиць хром- метіоніну у більшій дозі призвело до вірогідного зниження вмісту малонового діальдегіду в тканинах матки і печінки 2-ої дослідної групи. ГрупиГідроперекиси ліпідів, ОЕ/мл Малоновий діальдегід, мкмоль/мл Печінка Контрольна2,79±0,122,6±0,05 1-а дослідна2,77±0,12,55±0,06 2-а дослідна2,68±0,032,38±0,03* Матка Контрольна2,96±0,062,61±0,07 1-а дослідна3,34±0,152,68±0,02 2-а дослідна2,49±0,08**2,21±0,02**

Аналіз показників, активності ферментів системи антиоксидантного захисту в тканинах кролиць показав, що в 1-ій дослідній групі активність супероксиддисмутази, каталази, глутатіонпероксидази мала тенденцію до підвищення причому, підвищення активності глутатіонпероксидази було вірогідним у порівнянні з контрольною групою. Тоді, як у кролиць 2-ої дослідної групи ці показники не відрізнялись від контрольної групи, а активність глутатіонпероксидази навіть мала тенденцію до зниження. Групи Супероксиддисмутазна активність, у.о./мг Каталазна активність, мкмоль Глутатіонпероксидазна активність, GSH/г/хв Печінка Контрольна33,17±0,1457,52±0,2937,66±0,14 1-а дослідна35,33±0,1358,21±0,2542,18±0,19*** 2-а дослідна32, 83±0,0556,87±0,3636,32±0,16** Матка Контрольна34,50±0,1438,72±0,2432,59±0,36 1-а дослідна36,63±0,1541,06±0,16**39,63±0,5*** 2-а дослідна33,39±0,2238,56±0,2931,78±0,20

ВИСНОВКИ Встановлено, що хром-метіонін в дозі 0,03 мкг/мл підвищує проліферацію клітин ендометрія корів та ембріонального фібробласта плодів. Додавання хром-метіоніну до раціону кролиць у досліджуваних дозах проявляє інгібуючий вплив на кінцеві стадії перекисного окислення ліпідів. Хром-метіонін позитивно впливає на показники загального аналізу крові та біохімічні показники, що проявляється підвищенням вмісту в крові еритроцитів, гемоглобіну, загального білка та перерозподілом співвідношень білкових фракцій, що супроводжується підвищенням активності ферментів тканинного обміну, і як наслідок, зростання активності обмінних процесів в організмі кролиць в період запліднення та вагітності. Виробнича перевірка з застосування хром-метіоніну показала, що згодовування його в передовуляторний період є ефективним для стимуляції овуляторної функції кролиць та приживлення ембріонів.

Дослід 5 проведений з метою розробки нового селеновмісного препарату пролонгованої дії для стимуляції статевого циклу у самиць щурів та посилення у них формування ембріонально-маткових взаємодій на ранніх стадіях вагітності і був продовженням досліду, розпочатого у 2008 році. Групи тварин Гормональна обробка тварин Підсадка самців (2 самця на 5 самок) Введення селенвмісного препарату Введення препарату ФСГ Введення препа-рату хоріогоніч-ного гормону через 48 год після введення ФСГ До заплід- нення Після заплід- нення Контрольна 20 МО на 1 самицю 30 МО на 1 самицю Через 3 години після введення ХгЧ -- Дослідна 1 20 МО на 1 самицю 30 МО на 1 самицю Через 3 години після введення ХгЧ 3 рази- Дослідна 2 20 МО на 1 самицю 30 МО на 1 самицю Через 3 години після введення ХгЧ 3 рази2 рази

МЕТОДИ І МАТЕРІАЛИ Визначення каталазної активності проводили за методом Королюк М.А. (1988) по здатності пероксиду водню утворювати з солями молібдату стійкий кольоровий комплекс. Інтенсивність забарвлення вимірювали на приладі Specol при довжині хвилі λ=410 нм. Визначення каталазної активності проводили за методом Королюк М.А. (1988) по здатності пероксиду водню утворювати з солями молібдату стійкий кольоровий комплекс. Інтенсивність забарвлення вимірювали на приладі Specol при довжині хвилі λ=410 нм. Глутатіонпероксидазну активність визначали за методом Моіна В.М. (1986), де мірою активності ферменту є швидкість окислення глутатіону у пристуності гідроперекису третинного бутилу. Глутатіонпероксидазну активність визначали за методом Моіна В.М. (1986), де мірою активності ферменту є швидкість окислення глутатіону у пристуності гідроперекису третинного бутилу. Вміст гідроперекисів ліпідів досягали осадженням білків розчином трихлороцтової кислоти та екстракцією ліпідів етанолом з наступною взаємодією дослвджувальних екстрактів з тіоціанатом амонію. Вміст гідроперекисів визначали на спектрофотометрі при довжині хвилі λ=480 нм. Контрольну пробу обробляли як дослідну, вміст гідроперекисів визначали за формулою: Вміст гідроперекисів ліпідів досягали осадженням білків розчином трихлороцтової кислоти та екстракцією ліпідів етанолом з наступною взаємодією дослвджувальних екстрактів з тіоціанатом амонію. Вміст гідроперекисів визначали на спектрофотометрі при довжині хвилі λ=480 нм. Контрольну пробу обробляли як дослідну, вміст гідроперекисів визначали за формулою: ΔД(гідроперекисів ліпідів)=Д480 (дослід) – Д480 (контроль). Вміст малонового діальдегіду визначали по реакції між МДА і тіобарбітуровою кислотою, яка при високій температурі в кислому середовищі протікає з утворенням кольорового комплексу. Вимірювали оптичну густину на спектрофотометрі при довжині хвилі λ=535 і λ=580 нм. Вміст малонового діальдегіду визначали по реакції між МДА і тіобарбітуровою кислотою, яка при високій температурі в кислому середовищі протікає з утворенням кольорового комплексу. Вимірювали оптичну густину на спектрофотометрі при довжині хвилі λ=535 і λ=580 нм. Індекс вагітності (ІВ): Індекс вагітності (ІВ): кількість заплдінених/кількість спарованих Х 100% Статистичну обробку результатів досліджень проводили стандартними параметричними методами. Статистичну обробку результатів досліджень проводили стандартними параметричними методами.

Вміст ТБК-активних продуктів у гомогенатах внутрішніх органів самиць щурів на ранніх стадіях вагітності за умов введення селенвмісного препарата (М±n). Групи тварин Тканини ЯєчникиМаткаСерцеСелезінка Наднирник и МязиПечінкаНирки Малоновий діальдегід (мкМоль/мл) Контроль7,22 ±0,2310,83±0,2822,11±0,7116,77±0,2410,44±0,2128,67±0,416,08±0,7927,59±0,53 Дослідна 1 11,23±0,4* ** 21,69±1,8** * 33,89±1,52* ** 18,84±0,18* ** 10,96±0,28 38,06±0,07* ** 20,53±0,38* ** 33,05±0,13* ** Дослідна 2 6,04±0,16* ** 10,04±0,25 8,34±0,25** * 5,19±0,31** * 20,59±1,98* ** 11,59±1,79 20,56±1,29* * Гідроперекиси ліпідів (одЕ/г) Контроль2,27±0,285,98±0,294,37±0,413,12±0,143,23±0,123,84±0,36,29±0,263,8±0,51 Дослідна 1 3,02±0,15* * 8,31±1,725,23±0,09 4,26±0,16** * 7,86±1,02**4,62±0,57,44±0,29**5,46±0,26** Дослідна 2 1,3±0,12** 3,09±0,046* ** 2,01±0,71** 0,46±0,47** * 0,498±0,48* ** 0,23±0,24** * 1,38±0,28** * 0,89±0,23** *

Активність каталази та глутатіонпероксидази у гомогенатах внутрішніх органів самиць щурів на ранніх стадіях вагітності за умов введення селенвмісного препарата (М±n). Групи тварин Тканини ЯєчникиМаткаСерцеСелезінка Наднирник и МязиПечінкаНирки Активність каталази (мМоль). Контроль41,25±0,4255,67±1,0855,73±0,2656,35±0,1256,61±0,2843,39±0,3159,35±0,0854,38±0,04 Дослідна 1 42,69±0,13 ** 69,08±0,09* ** 61,89±0,09* ** 59,34±0,38* ** 58,54±0,24* ** 47,19±0,27* ** 62,48±0,28* ** 58,53±0,19* ** Дослідна 2 40,32±0,5453,92±0,08 51,23±0,13* ** 46,44±0,38* ** 48,37±0,13* ** 37,98±0,24* ** 44,54±0,19* ** 42,83±0,24* ** Активність глутатіонпероксидази (г/хв) Контроль14,21±0,1215,74±0,0615,66±0,0914,61±0,2315,17±0,114,62±0,2415,75±0,9615,44±0,13 Дослідна 1 15,31±0,11 *** 16,92±0,04* ** 16,34±0,13* * 15,86±0,58 15,68±0,19* * 14,85±0,0816,67±0,2315,9±0,06** Дослідна 2 13,62±0,48 14,7±0,23** * 11,44±0,21* ** 12,62±0,13* ** 12,58±0,21* ** 13,11±0,03* ** 14,42±0,16 13,27±0,08* **

ВИСНОВКИ Підшкірне трьохразове введення препарату селену щурам з депонуючою речовиною при стимуляції суперовуляції за стандартною схемою з використанням ФСГ позитивно впливає на імплантаційні процеси, посилюючи взаємодію між материнським організмом та плодом стимулюючи при цьому антиоксидантну систему організму матері в цілому шляхом підвищення активності ферментів глутатіонової антиоксидантної системи – глутатіонпероксидази, каталази і глутатіонредуктази. Підшкірне трьохразове введення препарату селену щурам з депонуючою речовиною при стимуляції суперовуляції за стандартною схемою з використанням ФСГ позитивно впливає на імплантаційні процеси, посилюючи взаємодію між материнським організмом та плодом стимулюючи при цьому антиоксидантну систему організму матері в цілому шляхом підвищення активності ферментів глутатіонової антиоксидантної системи – глутатіонпероксидази, каталази і глутатіонредуктази. Введення препарату селену щурам після запліднення в досліджуваних дозах негативно впливає як на становлення ранньої вагітності, так і на активацію процесів антиоксидантного захисту. Введення препарату селену щурам після запліднення в досліджуваних дозах негативно впливає як на становлення ранньої вагітності, так і на активацію процесів антиоксидантного захисту.

Видавнича діяльність 1. Штапенко О. В, Федорова С. В. Цитотоксическое влияние хлорида кадмия на культуру клеток эмбрионального фибробласта в зависимости от длительности культивирования // VIII Международная научно-практическая конференция молодых ученых «Биоэкология и ресурсосбережение», Сборник тез Витебской государственной академии ветеринарной медицины 2. О.В. Штапенко, І.І. Гевкан, Ю.І. Сливчук, С.В. Федорова Проліферація культури клітин яйцепроводів корів та окремі біохімічні показники середовища за умов дії хлориду нікелю // Конф. Бахта Науково- технічний бюлетень ІБТ і ДНДКІ ветпрепаратів та кормових добавок. Львів – 2009, В.10, 1,2. С Гевкан И.И., Штапенко О.В Сливчук Ю.И., Розгони И.И., Федорова С.В. Коррекция репродуктивной функции коров с гипофункцией яичников препаратом «Овокорт»// мая 2009 года Международная научно-практическая конференция «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного и продуктивного здоровья животных», посвященная 100-ле-тию со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ, профессора В.А. Акатова 4. Штапенко О. В, Дзень Е. А., Гевкан И. И., Слывчук Ю. И., Федорова С. В. Влияние хромметионина на репродуктивную функцию кролематок и развитие плодов на ранних эмбриональных стадиях // Конференция «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии», Витебск 5. Штапенко О. В Проліферативний ріст фідерних клітин яйцепроводів у культурі при дії хлоридів кадмію, міді та нікелю// Аграрний вісник Причорноморя 6. Штапенко О. В Проліферативна та метаболічна активність культури клітин яйцепроводів корів при дії хлориду міді.// Мат. I міжнар. конф. студентів, аспірантів та молодих учених "Фундаментальні та прикладні дослід-ження в біології", Донецький національний університет //Збірник наук. тез, лютого 2009 р., м. Донецьк С Гевкан И.И., Штапенко О.В Сливчук Ю.И., Федорова С.В. Спосіб одержання фідерних клітин яйцепроводів // Аграрна наука виробництву 8. Федорова С.В. Використання фідерних клітин для довгострокового збереження ембріонів без зниження їх життєздатності // Мат. I міжнар. конф. студентів, аспірантів та молодих учених "Фундаментальні та прикладні дослід-ження в біології", Донецький національний університет //Збірник наук. тез, лютого 2009 р., м. Донецьк С Федорова С.В., Мадіч А.В. Influence insulin and epidermal growth factor on the culture feeder cells proliferation and in vitro oocyte maturation in bovine // ІV Міжнародна конференція молодих вчених «Biodiversity. Ecology. Adaptation. Evolution » (Одеса, 2009) 10. Федорова С.В., Гевкан І.І. Активність ферментів антиоксидантного статусу та репродуктивна здатність щурів за умов введення препарату селену // Аграрний вісник Причорноморя

Участь у наукових міжнародних та всеукраїнських конференціях 1. VIII Міжнародня науково-практична конференція молодих учених «Биоэкология и ресурсосбережение», Вітебська державна академія ветеринарной медицини, Вітебськ, Білорусь. Тези. 2. Міжнародна науково-практична конференція Наукове забезпечення інноваційного розвитку аграрного виробництва в Карпатському регіоні, Закарпатська обл, с. Велика Бакта, Україна. Стаття, усна доповідь – Штапенко О.В. 3. Міжнародна науково-практична конференції «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного и продуктивного здоровья животных», посвященная 100-летию со дня рождения заслуженного деятеля науки РФ, профессора В.А. Акатова, Воронеж, Россия. Стаття. 4. Міжнародна конференція «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии», Вітебськ, Білорусь. Тези. 5. I Міжнародна конференція студентів, аспірантів та молодих учених "Фундаментальні та прикладні дослідження в біології", Донецький національний університет, Донецьк, Україна. Тези. 6. ІУ Міжнародній науково-практичній конференції молодих вчених «Biodiversity. Ecology. Adaptation. Evolution » Одеса, Україна. Тези, усна доповідь – Федорова С.В. 7. Конференція молодих вчених Інституту біології тварин УААН Україна, Львів. Усна доповідь – Федорова С.В.