По российским нормативным актам в целях безопасности гемотрансфузий совместимость сыворотки больного и эритроцитов донора по системе АВО, а также совместимость. - презентация

1

2 По российским нормативным актам в целях безопасности гемотрансфузий совместимость сыворотки больного и эритроцитов донора по системе АВО, а также совместимость по отсутствию иммунных групповых антител (в первую очередь антител к антигену RhD) в сыворотке больного, определяются непосредственно перед трансфузией эритроцитов (Приказ МЗ РФ 363 от ). Тестирование наличия иммунных групповых антител по системе Rh и другим групповым системам у больного допускается производить заблаговременно в лабораторных условиях. Методология определения наличия иммунных (нерегулярных) групповых антител Типы тестируемых эритроцитов: - донорские, подобранные для трансфузии больному ( совместимость ); - стандартные для скрининга антител ( наличие групповых антител ). Виды применяемых тестов: - с использованием антиглобулиновых антител; - с использованием потенциаторов антител. В современной трансфузиологии отсутствие групповых антител в сыворотке больного, определяемое с помощью тестирования на стандартных эритроцитах для скрининга, приравнивается к установлению факта совместимости сыворотки больного с донорскими эритроцитами. Ниже приводятся характеристики используемых в России методов определения наличия совместимости по нерегулярным антителам и их выявления как групповых антител.

3 Табл. 1. Краткая характеристика используемых в России методов определения совместимости по неполным групповым антителам

4 Однако препараты стандартных эритроцитов для скрининга групповых антител тестируются фирмами-производителями не по всем клинически значимым антигенам (Табл. 2), т.е., эти антигены могут не содержаться на стандартных эритроцитах, и аллоантитела к ним у больных могут не выявляться (ложноотрицательные результаты). Следовательно, методы выявления нерегулярных антител у больного с помощью стандартных эритроцитов для скрининга антител не могут давать надежные результаты. Табл. 2. Групповые антигены различных систем, тестируемые в препаратах стандартных эритроцитов для скрининга аллоантител основных фирм- производителей

5 Таким образом, определение совместимости по иммунным антителам более надежно следует проводить на донорских эритроцитах, предназначенных для трансфузии. Однако существующие в России методы тестирования по ряду критериев не являются оптимальными для поставленной задачи (Табл. 1). Учитывая это Компанией «Гематолог» был разработан и зарегистрирован в России простой, чувствительный и быстрый в исполнении тест-набор для определения совместимости сыворотки больного и эритроцитов донора ЭРИТРОТЕСТ ТМ -ИммуноКонтроль, основанный на действии сильного потенциатора неполных антител.

6 Система групповых антигенов (по ISBT) Тестестируемые сыворотки, содержащие неполные (IgG) антитела к антигенам: Результаты выявления антител в ИммуноКонтроле (интенсивность реакции) Контрольный тест*** Rh D++++Гель-АГТ*, АГТ** C+++Гель-АГТ, АГТ E++++АГТ c++++АГТ Kell K (K1)+++Гель-АГТ, АГТ k (K2, Cellano)++++АГТ Кр А +Гель-АГТ**** Kidd Jk A +АГТ Jk B +АГТ MNS s++++АГТ Duffy Fy A ++++АГТ Fy B ++++АГТ Табл. 3. ЭРИТРОТЕСТ ТМ -ИммуноКонтроль: Чувствительность выявления групповых антигенов различных систем (результаты медицинских испытаний, проведенных в ГБУ Гематологический Научный Центр МЗ РФ) * Антиглобулиновый тест в гелевой модификации; ** Антиглобулиновый тест в стандартной постановке (тест Кумбса); *** В контрольных тестах интенсивность реакции отмечалась в диапазоне +++/++++. **** В контрольном тесте интенсивность реакции +/++

7

8 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль: Состав Набора, дополнительные материалы и тест-образцы Исследуемая сыворотка больного Эритроциты донора, от- мытые в Растворе 1 Автоматическая пипетка с наконечниками

9 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль Этап подготовки – Внесение исследуемой сыворотки реципиента, - Контроля и + Контроля

10 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль Этап подготовки – Внесение отмытых эритроцитов донора

11 Этап 1 – Выявление АВО-совместимости Перемешивание содержимого лунок. Если в лунке «Совместимость» в течение 1 минуты не появилась агглютинация эритроцитов, то кровь больного и донора совместимы по АВО. Переход к этапу 2. 01:00 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль

12 Этап 2 – Добавление агглютинирующего раствора После инкубации в течение 2 минут агглютинация эритроцитов появляется во всех лунках. Переход к этапу 3. 02:00 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль

13 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль Этап 3 – Добавление ресуспендирующего раствора После инкубации в течение 15 сек. агглютинация эритроцитов остается только в тех лунках, где эритроциты связались с неполными антителами. Результат теста: эритроциты донора и сыворотка больного несовместимы по нерегулярным антителам. Переход к этапу 4. 00:15

14 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль Этап 4 – Документирование результатов теста

15 ЭРИТРОТЕСТ-ИммуноКонтроль Несовместимость крови больного и донора Совместимость донора

16 Основные характеристики метода ЭРИТРОТЕСТ ТМ -ИммуноКонтроль : 1.Тест-система направлена на определение совместимости крови больного и донора по наличию в сыворотке реципиента клинически значимых групповых неполных антител к эритроцитам донора. 2.Тест также предусматривает определение совместимости по системе АВО (полные антитела). 3.Необходимое дополнительное оборудование для проведения тестирования: -центрифуга лабораторная для отмывания эритроцитов; -дозаторная пипетка со сменными наконечниками; -секундомер. 4. Общее время проведения теста – около 5 минут. 5.Чувствительность теста при определении клинически значимых групповых неполных антител достигает чувствительности теста Кумбса в классическом и микроколоночном (гелевом) вариантах. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: ЭРИТРОТЕСТ ТМ -ИммуноКонтроль является чувствительным, простым, быстрым и удобным тестом по определению АВО и иммунной совместимости крови больного и донора.