Новый маркер инсулинорезистентности и ишемии – свободные жирные кислоты Вельков В.В., «ДИАКОН», 2008. - презентация

1 Новый маркер инсулинорезистентности и ишемии – свободные жирные кислоты Вельков В.В., «ДИАКОН», 2008

2

3 Свободные жирные кислоты называют «красной лампочкой на приборной доске миокарда».

4 Повышение их уровня сигнализирует: - сначала о метаболическом синдроме, - потом об инсулинорезистентности: - потом о диабетической кардиомиопатии. А когда эта «лампочка» загорается совсем ярко, - об ишемической болезни сердца.

5 А дальше эта лампочка может перегореть и вспыхнут «лампочки» маркеров некроза миокарда, которые свидетельствуют о «точке не возврата» А ведь повышенные уровни СЖК А ведь повышенные уровни СЖК начинают «светиться красным», когда время изменить курс еще есть…

6 Чума ХХI века Ожирение – одна из главных причин - метаболического синдрома (МС), - - инсулинорезистентности (ИР), - пандемии СД 2, - и, в итоге, - ССЗ В США МС - - у 22,8% мужчин и - у 22,6% женщин. МС диагностируется: - у 4,6% лиц с нормальным весом, - у 22,4% лиц с избыточным весом - - у 59,6% лиц с ожирением

7

8 Метаболический синдром Компоненты МС: Компоненты МС: 1. Высокие триглицериды 1. Высокие триглицериды > 1.69 ммоль/л, > 1.69 ммоль/л, 2. Низкий Х-ЛПВП 2. Низкий Х-ЛПВП 1.29 ммоль/л для женщин; 1.29 ммоль/л для женщин; 1.03 ммоль/л для мужчин; 1.03 ммоль/л для мужчин; 3. Высокое артериальное давление – от 130/85 мм и выше; от 130/85 мм и выше; 4. Высокая глюкоза от 6.1 ммоль/л и выше; от 6.1 ммоль/л и выше; 5. Объем талии – более 88 см для женщин и более 88 см для женщин и более 102 см для мужчин. более 102 см для мужчин.

9

10 hsСРБ и осложнения СД 1 При СД 1 hs СРБ 2,6+/-0,4 мг/л, Без СД 1 0,7+/-0,7 мг/л. При СД 1 с осложнениями (ретинопатия, нефропатия, нейропатия ) 3,6+/-5.1 мг/л. без осложнений 2,0+/-3,1 мг/л, При СД 1 без осложнений, СРБ повышен в 3 раза У пациентов с осложнениями СРБ повышен в 5 раз hsСРБ – предиктор осложнений при диабете 1-го типа Coulon J, et al. Increase in C-reactive protein plasma levels during diabetes in infants and young adults. levels during diabetes in infants and young adults. Presse Med. 2005; 34 (2 Pt 1): 89-93

11 hsСРБ и СД 2 С инсулинорезистентностью связаны: - ОФ, индуцируемая цитокинами, - дислипидемия, - атеросклероз Повышенные уровни hsCRP выявляют субклиническое воспаление и указывают на необходимость немедленной терапии для снижения риска развития ССЗ при СД 2 Garanty-Bogacka B, et al., Relation of acute-phase reaction and endothelial activation to insulin resistance and adiposity in obese children and adolescents. Neuro Endocrinol Lett (5):

12 Адипозные клетки

13 Свободные жирные кислоты

14 СЖК в плазме Образуются в результате гидролиза триглицеридов, содержащихся Образуются в результате гидролиза триглицеридов, содержащихся в адипозных тканях. в адипозных тканях. Пазменные ЖК или этерифицированы Пазменные ЖК или этерифицированы и связаны с альбумином, или и связаны с альбумином, или не эстерифицированы (NEFA), и не эстерифицированы (NEFA), и находятся в свободном состоянии (NEFAub) находятся в свободном состоянии (NEFAub) В плазме уровни СЖК В плазме уровни СЖК от 100 микромоль/л до 1 ммоль/л от 100 микромоль/л до 1 ммоль/л и сильно зависят от времени суток. и сильно зависят от времени суток.

15 Суточные колебания плазменных уровней СЖК После еды (день) уровень СЖК падает, т.к., После еды (день) уровень СЖК падает, т.к., инсулин подавляет липолиз адипозных клеток инсулин подавляет липолиз адипозных клеток Ночью уровень СЖК возрастает. Ночью уровень СЖК возрастает. К этим колебаниям СЖК адаптируются К этим колебаниям СЖК адаптируются скелетные мышцы, которые переключаются скелетные мышцы, которые переключаются с утилизации глюкозы (днем) с утилизации глюкозы (днем) на потребление СЖК (ночью). на потребление СЖК (ночью). «Метаболическая гибкость» - способность «Метаболическая гибкость» - способность мышц (и др. тканей) подстраиваться мышц (и др. тканей) подстраиваться к доминирующему субстрату связана к доминирующему субстрату связана с нормальной чувствительностью к инсулину с нормальной чувствительностью к инсулину Kelley DE, et al. Fuel selection in human skeletal muscle in insulin resistance: Kelley DE, et al. Fuel selection in human skeletal muscle in insulin resistance: a reexamination. Diabetes. 2000;49(5): a reexamination. Diabetes. 2000;49(5):

16 СЖК – в аэробных условиях Первичный метаболический ресурс, поставляющий миокарду, 2/3 необходимого АТФ, 1/3 АТФ обеспечивается метаболизмом глюкозы Среднее значение СЖК в сыворотке не зависит от возраста и пола. После ночи натощак уровни СЖК повышаются van der Vusse GJ et al. Critical steps in cellular fatty acid uptake and utilization. Mol Cell Biochem 2002; 239:9–15. СЖК

17 Нарушение метаболизма СЖК – ключевое событие, ведущее к ИР При ожирении в кровоток поступает избыток СЖК, который накапливается в тканях, не предназначенных для их хранения: - в скелетных мышцах и - - в печени Это ведет к тяжким последствиям

18 Свободные жирные кислоты, МС и СД 2 Многократно и достоверно показано – Многократно и достоверно показано – большинство лиц, страдающих большинство лиц, страдающих МС, СД2, и/или ожирением, МС, СД2, и/или ожирением, имеют повышенные уровни СЖК, имеют повышенные уровни СЖК, что приводит к ИР многих тканей, (мышечных, печени, адипозных, эндотелиальных клеток). что приводит к ИР многих тканей, (мышечных, печени, адипозных, эндотелиальных клеток). Delarue J, Magnan C. Free fatty acids and insulin resistance. Delarue J, Magnan C. Free fatty acids and insulin resistance. Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 2007; 10(2):142-8 Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 2007; 10(2):142-8

19 «Липотоксичекий эффект СЖК» Хронически высокие уровни СЖК Хронически высокие уровни СЖК оказывают оказывают токсический эффект токсический эффект на бета-клетки поджелудочной железы. на бета-клетки поджелудочной железы. Unger RH: Lipotoxicity in the pathogenesis of obesity-dependent NIDDM: genetic and clinical implications. Unger RH: Lipotoxicity in the pathogenesis of obesity-dependent NIDDM: genetic and clinical implications. Diabetes 1995, 44: 863–870 Diabetes 1995, 44: 863–870

20 Высокие СЖК – высокая эндогенная глюкоза Повышенный поток СЖК в печень, в особенности, за счет липолиза висцерального жира, Повышенный поток СЖК в печень, в особенности, за счет липолиза висцерального жира, ведет к повышению эндогенного синтеза глюкозы в печени. ведет к повышению эндогенного синтеза глюкозы в печени. Rebrin K,et al Free fatty acid as a link in the regulation of hepatic Rebrin K,et al Free fatty acid as a link in the regulation of hepatic glucose output by peripheral insulin. glucose output by peripheral insulin. Diabetes 1995, 44:1038–1045 Diabetes 1995, 44:1038–1045

21 Жировая ткань – эндокринный орган

22 Ожирение -> Воспаление -> ИР Провоспалительные цитокины, Провоспалительные цитокины, в избытке синтезируемые большой массой адипозных клеток, в избытке синтезируемые большой массой адипозных клеток, приводят к хроническому воспалительному процессу, приводят к хроническому воспалительному процессу, - нарушающему путь передачи инсулинового сигнала и - нарушающему путь передачи инсулинового сигнала и - повреждающему функции митохондрий, что нарушает гомеостаз глюкозы - повреждающему функции митохондрий, что нарушает гомеостаз глюкозы Hotamisligil, G.S. (2006). Nature 444, 860–867. Hotamisligil, G.S. (2006). Nature 444, 860–867.

23 Патогенное действие избыточного жира Секретируемые жировыми клетками интерлейкин ИЛ-6 и ФНО-альфа Секретируемые жировыми клетками интерлейкин ИЛ-6 и ФНО-альфа утяжеляют ИР утяжеляют ИР Адипонектин – в норме предотвращающий ИР, у лиц с абдоминальным ожирением, Адипонектин – в норме предотвращающий ИР, у лиц с абдоминальным ожирением, имеет в крови низкую концентрацию, имеет в крови низкую концентрацию, Жировые клетки секретируют ангиотензин II, который повышает кровяное давление Жировые клетки секретируют ангиотензин II, который повышает кровяное давление и способствует развитию атеросклероза. и способствует развитию атеросклероза. СЖК прямым образом повреждают эндотелиальные клетки, СЖК прямым образом повреждают эндотелиальные клетки, что еще больше отягащает атерогенез что еще больше отягащает атерогенез

24 Куда ведет повышение СЖК К повышению тяжести ИР, К повышению тяжести ИР, К снижению секреции инсулина, К снижению секреции инсулина, К повышению глюконеогенеза в печени, К повышению глюконеогенеза в печени, Boden G. Free fatty acids and insulin secretion in humans. Boden G. Free fatty acids and insulin secretion in humans. Curr Diab Rep. 2005; 5(3): Curr Diab Rep. 2005; 5(3): Wilding JP. The importance of free fatty acids in the development Wilding JP. The importance of free fatty acids in the development of Type 2 diabetes. of Type 2 diabetes. Diabet Med. 2007;24(9): Diabet Med. 2007;24(9): И, в итоге…. И, в итоге…..

25 Чем вымощена дорога в ад? Чем вымощена дорога в ад? Дорога в ад вымощена благими намерениями The path to hell is paved with good intentions.

26

27 Чем вымощена дорога к ИР?

28 Повышение СЖК- причина инсулинорезистентности Локальное накопление внутри Локальное накопление внутри скелетных мышц и печени скелетных мышц и печени метаболитов СЖК, таких как: метаболитов СЖК, таких как: - церамид, - церамид, - диаглицерол или - диаглицерол или - Ацетил КоА может активировать может активировать каскад сериновых киназ, каскад сериновых киназ, что ведет к нарушению что ведет к нарушению передачи инсулинового сигнала и, передачи инсулинового сигнала и, тем самым, тем самым, к нарушению транспорта глюкозы к нарушению транспорта глюкозы

29 Церамиды Состоят из: из сфингозина Состоят из: из сфингозина и жирно-кислотного остатка, соединенных амидной связью. и жирно-кислотного остатка, соединенных амидной связью. Церамид - мессенджер Церамид - мессенджер в сигнальном пути в сигнальном пути сфингомиелина, сфингомиелина, участвует в регуляции: участвует в регуляции: - клеточной дифференцировки, - клеточной дифференцировки, - клеточной пролиферации и - клеточной пролиферации и - апоптоза - апоптоза

30 Повышенные уровни церамида, образовавшиеся Повышенные уровни церамида, образовавшиеся из-за избытка СЖК, ФНО-альфа или глюкортикоидов нарушают передачу инсулинового сигнала путем ингибирования фосфорилирования в системе Akt/PKB из-за избытка СЖК, ФНО-альфа или глюкортикоидов нарушают передачу инсулинового сигнала путем ингибирования фосфорилирования в системе Akt/PKB

31 Повышенные СЖК вызывают ИР, ИР адипозные клетки еще больше синтезируют СЖК

32 ИР ведет к неконтролируемому липолизу В норме липолиз в адипоцитах, приводящий к образованию СЖК, подавляется инсулином. При ИР липолиз в адипоцитах инсулином не подавляется Уровни СЖК натощак пропорциональны ИР Хронически повышенные уровни СЖК натощак – характеристика ИР Избыточный липолиз одна из причин развития нарушенной толерантности к глюкозе и СД 2. Abbasi F et al. The relationship between glucose disposal in response to physiological hyperinsulinemia and basal glucose and free fatty acid concentrations in healthy volunteers. J Clin Endocrinol Metab 2000;85:1251–1254. Perseghin G, Caumo A, Caloni M, Testolin G, Luzi L. Incorporation of the fasting plasma FFA concentration into QUICKI improves its association with insulin sensitivity in nonobese individuals. J Clin Endocrinol Metab 2001;86:4776–4781

33 СЖК – независимый предиктор Нарушенной Толерантности к глюкозе 5 лет наблюдений, 5 лет наблюдений, 3671 индивид с нормальной, толерантностью к глюкозе (Норм ТГ) 3671 индивид с нормальной, толерантностью к глюкозе (Норм ТГ) У 418 лиц развилась Нарушенная ТГ У 418 лиц развилась Нарушенная ТГ (Нар ТГ), (Нар ТГ), Высокие уровни СЖК натощак у лиц Высокие уровни СЖК натощак у лиц с Норм ТГ – с Норм ТГ – предикторы развититя Нар ТГ, предикторы развититя Нар ТГ, независимые от ИР независимые от ИР или от нарушений секреции глюкозы. или от нарушений секреции глюкозы. Charles Maet al The role of non-esterified fatty acids in the deterioration of glucose tolerance in Caucasian subjects: results of the Paris rospective Study. Diabetologia. 1997; 40(9): Charles Maet al The role of non-esterified fatty acids in the deterioration of glucose tolerance in Caucasian subjects: results of the Paris rospective Study. Diabetologia. 1997; 40(9):

34 Повышенные натощак уровни СЖК – фактор риска СД 2 9 лет наблюдений, 9 лет наблюдений, 580 лиц с СД 2 и 556 лиц без СД. 580 лиц с СД 2 и 556 лиц без СД. Уровни СЖК были прямо пропорционально связаны: Уровни СЖК были прямо пропорционально связаны: с индексом массы тела, с индексом массы тела, с объемом талии, с объемом талии, с частотой пульса, с частотой пульса, уровнями триглицеридов в плазме, и уровнями триглицеридов в плазме, и показателями воспаления (определяли показателями воспаления (определяли по 6 маркерам воспаления). по 6 маркерам воспаления). Pankow JS et al Fasting plasma free fatty acids and risk of type 2 diabetes: the atherosclerosis risk in communities study. Pankow JS et al Fasting plasma free fatty acids and risk of type 2 diabetes: the atherosclerosis risk in communities study. Diabetes Care. 2004; 27(1): Diabetes Care. 2004; 27(1):77-82.

35 Самые ранние предикторы ИР Для для предотвращения развития СД 2 Для для предотвращения развития СД 2 ИР должна быть обнаружена как можно раньше Наилучшим комплексом индикаторов, предсказывающих ИР, являются: - Соотношение Х-ЛПВП/Общий Холестерин - Уровень СЖК натощак - Mffm/I=12x[2.5x(HDL-c/total cholesterol)-NEFA] Disse E et al. A lipid-parameter-based index for estimating insulin sensitivity and identifying insulin resistance in a healthy population. Diabetes Metab Oct 13.

36 О чем предупреждают СЖК Повышенные уровни СЖК натощак отражают предрасположенность к инсулинорезистетности, когда гомеостаз глюкозы еще не нарушен Disse E et al. A lipid-parameter-based index for estimating insulin sensitivity and identifying insulin resistance in a healthy population. Diabetes Metab Oct

37 - ИР жировые клетки - ИР жировые клетки интенсивно расщепляют интенсивно расщепляют содержащиеся в них триглицериды, содержащиеся в них триглицериды, и высвобождают образовавшиеся из них СЖК в кровь и высвобождают образовавшиеся из них СЖК в кровь - Поток СЖК из адипозных клеток повышается - Поток СЖК из адипозных клеток повышается - СЖК также выходят из Х- ЛПОНП - СЖК также выходят из Х- ЛПОНП и из хиломикронов плазмы и из хиломикронов плазмы и по кровотоку направляются и по кровотоку направляются в другие органы, в другие органы, и частично – обратно в печень, и частично – обратно в печень, где снова превращаются в триглицериды где снова превращаются в триглицериды Происходит накачка печени Происходит накачка печени триглицеридами и СЖК триглицеридами и СЖК

38 При ИР уровень СЖК в печени повышается так как: так как: - повышается липогенез de novo, - этерификиця СЖК превышает их окисление, окисление, - Этерифицированные ЖК запасаются в виде триглицеридов или направляются на синтез Х-ЛПОНП (богатых триглицеридами), в виде триглицеридов или направляются на синтез Х-ЛПОНП (богатых триглицеридами), - понижается регулируемая инсулином мобилизации триглицеридов.

39 Эффект «падающего домино» Повышение в печени уровней СЖК и триглицеридов приводит к «бегущей волне» нарушений в цепи реакций метаболизмахолестерина ВысокиеСЖК

40 Что заканчивается тяжелой дислипидемией

41 Инсулинорезистентность и дислипидемия Инсулинрезистен тные жировые клетки инстенсивно расщепляют содержащиеся в них триглицериды и высвобождают образовавшиеся свободные жирные кислоты (СЖК) в кровоток. Это происходит как при ожирении, так и без него. СЖК поглощаются печенью и там превращаются в триглицериды. СЖК (NEFA ) - новый маркер инсулинрезис тентности ИР жировые клетки интенсивно расщепляют содержащиеся в них триглицериды и высвобождают образовавшиеся СЖК в кровоток (как при ожирении, так и без него) Образовавшиеся СЖК снова поглощаются печенью и там снова превращаются в триглицериды и там снова превращаются в триглицериды. Повышенные СЖК - маркер ИР

42 Как инсулинорезистентность ведет к дислипидемии Повышение в печени триглицеридов стимулирует образование Апо В и Х-ЛПОНП,

43 Инсулинорезистентность и дислипидемия При высоком уровне Х-ЛПОНП и нормальном уровне белка, переносчика эфира холестерина (cholesteryl ester transfer protein - CETP), триглицериды из Х-ЛПОНП переходят в Х-ЛПВП, а холестерин из Х-ЛПВП переходит в Х-ЛПОНП. Образуются: богатые холестерином очень атерогенные ремнантные частицы Х-ЛПОНП и Х-ЛПВП, содержащий много триглицеридов и мало холестерина. Такие частицы Х-ЛПВП теряют триглицериды (из активности гепатитной липазы) и Апо А1. В итоге уровень антитерогенного Х-ЛПВП понижается

44 Инсулинорезистентность и дислипидемия При высоком уровне Х-ЛПОНП, богатых триглицеридами, CETP переносит триглицериды из Х-ЛПОНП в Х-ЛПНП, и переносит холестерин из Х-ЛПНП в Х-ЛПОНП. Богатые триглицеридами Х-ЛПНП из-за активности гепатитной или липопротеиновой липазы теряют триглицериды, уменьшаются в размерах и становятся очень атерогенными мелкими плотными Х-ЛПНП

45 Еще один путь, которым высокие СЖК вызывают атерогенез Повышенный при ИР уровень СЖК вызывает в митохондриях макрососудиситых эндотелиальных клеток - сверхсинтез активных форм кислорода, - - что ведет к окислению Х-ЛПНП и модификации Х-ЛПВП, - что индуцирует воспалительный процесс в стенках сосудов - и ведет к ишемии

46 СЖК при ишемии (дефиците) О2 В норме СЖК быстро метаболизируются В норме СЖК быстро метаболизируются за счет бета - окисления в митохондриях за счет бета - окисления в митохондриях и дают 65-70% АТФ. и дают 65-70% АТФ. За счет гликолиза % АТФ. За счет гликолиза % АТФ. Окисление 1 моля СЖК требует большего количества О2, чем окисление 1 моля глюкозы. Окисление 1 моля СЖК требует большего количества О2, чем окисление 1 моля глюкозы. В норме эти потребности удовлетворяются, В норме эти потребности удовлетворяются, но при ишемии: но при ишемии: - из-за того, что СЖК - из-за того, что СЖК «сгорают» не полностью, «сгорают» не полностью, их уровень в крови повышается; их уровень в крови повышается; - метаболизм СЖК в миокарде - метаболизм СЖК в миокарде становится патологическим становится патологическим Aras O, et al. Targeting ischemic memory. Aras O, et al. Targeting ischemic memory. Current Opinion in Biotechnology 2007, 18:46–51 Current Opinion in Biotechnology 2007, 18:46–51

47 Кардиотоксичность СЖК при ишемии В ишемических и кардиомиопатических условиях утилизация глюкозы преобладает над использованием СЖК. В ишемических и кардиомиопатических условиях утилизация глюкозы преобладает над использованием СЖК. При ишемии метаболизм СЖК становится патологическим, внутри ишемических клеток образуются лактат и ионы водорода. При ишемии метаболизм СЖК становится патологическим, внутри ишемических клеток образуются лактат и ионы водорода. Это ведет к деградации контрактильности миокарда, диастолической дисфункции и снижает артитмогенный порог кардиомиоцитов Это ведет к деградации контрактильности миокарда, диастолической дисфункции и снижает артитмогенный порог кардиомиоцитов Hendrickson SC, et al. Free fatty acid metabolism Hendrickson SC, et al. Free fatty acid metabolism during myocardial ischemia and reperfusion. during myocardial ischemia and reperfusion. Mol Cell Biochem. 1997; 166(1-2): Mol Cell Biochem. 1997; 166(1-2):

48 Токсичность СЖК для миокарда при ишемии Уровни СЖК Уровни СЖК независимо от других параметров независимо от других параметров связаны связаны с диастолической дисфункцией левого желудочка. с диастолической дисфункцией левого желудочка. Leichman JG et al Association of plasma free fatty acids and left ventricular diastolic function in patients with clinically severe obesity. Am J Clin Nutr. 2006;84(2):336-3 Leichman JG et al Association of plasma free fatty acids and left ventricular diastolic function in patients with clinically severe obesity. Am J Clin Nutr. 2006;84(2):336-3

49 Повышенные СЖК – самый ранний предиктор ишемии Проспективное исследование, 5 лет, Проспективное исследование, 5 лет, 2103 мужчины, исходно не имевшие ИБС, 2103 мужчины, исходно не имевшие ИБС, у 144 развилась ИБС. у 144 развилась ИБС. Повышенные натощак уровни СЖК Повышенные натощак уровни СЖК (3-я тертиль) были связаны с повышением риска ИБС в 2 раза (3-я тертиль) были связаны с повышением риска ИБС в 2 раза (по сравнению с нижней тертилью) (по сравнению с нижней тертилью) Pirro M et al. Plasma free fatty acid levels and the risk of ischemic heart disease in men: prospective results from the Québec Cardiovascular Study. Atherosclerosis. 2002; 160(2): Pirro M et al. Plasma free fatty acid levels and the risk of ischemic heart disease in men: prospective results from the Québec Cardiovascular Study. Atherosclerosis. 2002; 160(2):

50 Повышенные уровни СЖК – ранний маркер ишемии 30 пациентов (неотложная терапия, острый коронарный синдром) измеряли тропонин I и СЖК. При поступлении высокие СЖК - у 28 из 30 пациентов (93%). У 9 лиц – диагностирован ИМ высокий cTnI только у 2 из 9 с ИМ В течение 24 час после поступления у всех 9 лиц с ИМ уровни cTnI повысились. В каждом случае повышения cTnI повышались и уровни СЖК У всех 9 лиц с ИМ уровни СЖК при поступлении были повышены (100%). «При ишемии СЖК повышаются независимо «При ишемии СЖК повышаются независимо от наличия или отсутствия некроза миокарда, от наличия или отсутствия некроза миокарда, тестируемого по сTnI». тестируемого по сTnI». Apple FS, et al Unbound Free Fatty Acid Concentrations Are Increased in Cardiac Ischemia, Clin Proteomics, 2004, 1, 1, 41-44

51 Повышенные СЖК и ишемия после коронарной ангиопластики 22 пациента, чрезкожная транслюминальная ангиопластика СЖК измеряли за 5 мин до и через 30 мин после. У всех пост операционные СЖК были выше предоперационных. За 30 мин СЖК повышаются в 14 раз И хотя у всех 22 лиц были высокие СЖК, только у 11 после операции наблюдалось ишемическое изменение ST сегмента. Именно у них СЖК были значительно выше, чем у лиц без подъема ST – сегмента (47 nM). « Повышение сывороточного уровня СЖК быстро отражает транзиторную ишемию, вызываемую ангиопластикой; определение уровня СЖК – более чувствительный показатель степени ишемии, чем ЭКГ» K Kleinfeld AM, et al. Increases in serum unbound free fatty acid levels following coronary angioplasty. Am J Cardiol ; 78(12): Am J Cardiol ; 78(12):

52 У пациентов без ишемии высокий уровень СЖК часто связан высокий уровень СЖК часто связан с комплексом преждевременных сокращений желудочков и, в конечном счете, повышает риск ССЗ с комплексом преждевременных сокращений желудочков и, в конечном счете, повышает риск ССЗ При ишемии концентрация СЖК повышается и имеет проаритмический эффект, вызывающий тахиаритмию Повышенные СЖК – показатель тяжести ишемии тяжести ишемии у «тропонин-отрицательных» у «тропонин-отрицательных» пациентов пациентов

53 СЖК предсказывают внезапную смерть 6,85 лет, 3315 лиц подвергавшихся коронарной ангиографии. Заболевания коронарных артерий диагностированы у 2231 пациента. Внезапная смерть 165 лиц. Повышенные уровни СЖК Повышенные уровни СЖК связаны с повышенным риском связаны с повышенным риском внезапной смерти. внезапной смерти. Pilz S, et al. Elevated plasma free fatty acids predict sudden cardiac death: Pilz S, et al. Elevated plasma free fatty acids predict sudden cardiac death: a 6.85-year follow-up of 3315 patients after coronary angiography. a 6.85-year follow-up of 3315 patients after coronary angiography. Eur Heart J Nov;28(22): Eur Heart J Nov;28(22):

54 СЖК – новый маркер Для оценки рисков развития: Для оценки рисков развития: нарушенной толерантности к глюкозе нарушенной толерантности к глюкозе инсулинорезистентности инсулинорезистентности ИБС ИБС Для мониторинга Для мониторинга степени тяжести ишемии, степени тяжести ишемии, предшествующей ОИМ предшествующей ОИМ

55 Свободные жирные кислоты Неэтерифицированные жирные кислоты NEFA FS Повышенный уровень СЖК – фактор риска: - инсулинорезистентности, - гиперинсулинемии - метаболического синдрома и, в целом, - сердечно-сосудистых заболеваний Ферментативный метод Конечная точка Определяет концентрацию C12-C16 жирных кислот Биреагентная схема Жидкий стабильный реагент (впервые!) Диапазон определения > 2 ммоль/л Линейность - до 3 ммоль/л Набор+калибраторы+контроли руб. При 250 мкл реагента/измерение ~ 40 руб/тест.

56 Определение СЖК NEFA FS, DiaSys. 1. СЖК + Ко А взаимодействуют в присутствии ацил-коэнзим- А-синтетазы (АКС) с образованием ацил КоА, АМФ и пирофосфата. СЖК + Коэнзим А + АТФ АКС Ацил-коэнзим А + АМФ + ФФ1 2. Ацил КоА окисляется ацил-Ко А-оксидазой (АКОД) с выделением Н2О2. с выделением Н2О2. Ацил-коэнзим А + О2 2,3-транс-еноил- коэнзим А + Н2О2 Ацил-коэнзим А + О2 2,3-транс-еноил- коэнзим А + Н2О2 3. Н2О2 образует окрашенный продукт в присутствии пероксидазы (ПОД) и хромогенного компонента Триндера* 2 Н2О2 + компонент Триндера ПОД Краситель + 4 Н2О. 2 Н2О2 + компонент Триндера ПОД Краситель + 4 Н2О. Измеренная при 546 нм интенсивность красного красителя прямо пропорциональна концентрации СЖК в образце. Измеренная при 546 нм интенсивность красного красителя прямо пропорциональна концентрации СЖК в образце. (*Метод Триндера, основан на колориметрическом определении продуктов реакции Н2О2 с 4-аминоантипирином (пара-аминоантипирином, PAP) в присутствии 2,4- дихлорфенолсульфата ). (*Метод Триндера, основан на колориметрическом определении продуктов реакции Н2О2 с 4-аминоантипирином (пара-аминоантипирином, PAP) в присутствии 2,4- дихлорфенолсульфата ).

57 Отличная линейность СЖК ДиаСис

58 Сравнение с конкурирующим методом DiaSys NEFA FS vs. competitor n = 118 Passing/Bablock Regression: y = x mmol/L r = 0.999

59 Сравнение с конкурирующим методом Набор ДиаСис Набор ДиаСис Жидкий стабильный Жидкий стабильный Стабильность в жидком состоянии Стабильность в жидком состоянии 1 год при 2 – 8 С 1 год при 2 – 8 С Аналитическая чувствительность Аналитическая чувствительность 0,005 ммоль/л 0,005 ммоль/л Не токсичен Не токсичен Набор фирмы N Набор фирмы N Лиофилизированный Лиофилизированный Стабильность в жидком состоянии Стабильность в жидком состоянии 5 дней при 2 – 8 С 5 дней при 2 – 8 С Аналитическая чувствительность Аналитическая чувствительность 0,01 ммоль/л 0,01 ммоль/л Токсичен Токсичен

60 Определение СЖК NEFA FS, DiaSys. П рактические рекомендации 1. Концентрации СЖК в плазме в течение суток могут колебаться: повышаться после приема пищи. Измерения уровней СЖК следует проводить натощак. 2. Определение СЖК следует проводить в течение не более, чем двух часов после забора крови. Иначе из-за возможного наличия Иначе из-за возможного наличия в образце липазной активности может происходить гидролиз содержащихся в образце липазной активности может происходить гидролиз содержащихся в нем триглицеридов с образованием дополнительных количеств СЖК, что может привести к завышению их истинной концентрации в нем триглицеридов с образованием дополнительных количеств СЖК, что может привести к завышению их истинной концентрации

61 Определение СЖК NEFA FS, DiaSys. П рактические рекомендации 3. При необходимости, каждая лаборатория должна проверить, применим ли контрольный диапазон величин к местному населению, и определить свой собственный диапазон нормальных величин. 4. Для диагностических целей значения СЖК всегда должны рассматриваться в сочетании с анамнезом, клиническим обследованием и другими данными.

62 Определение СЖК NEFA FS, DiaSys. П рактические рекомендации 5. При избыточном весе и подозрении на МС и СД уровни СЖК целесообразно измерять в сочетании с измерениями уровней глюкозы и гликозилированного гемоглобина. МС и СД уровни СЖК целесообразно измерять в сочетании с измерениями уровней глюкозы и гликозилированного гемоглобина. 6. При диагностике ССЗ и, в особенности, ИБС, уровни СЖК целесообразно измерять в сочетании с измерениями общего холестерина, Х-ЛПНП, Х-ЛПВП, триглицеридов, с измерениями концентраций аполипопротеинов В и А

63 Определение СЖК NEFA FS, DiaSys. П рактические рекомендации 7. При оценке степени ишемии при кардиохирургических операциях измерение уровней СЖК следует проводить до и после хирургического вмешательства. 8. При оценках рисков развития ССЗ измерение уровней СЖК целесообразно проводить в сочетании с высокочувствительным измерением С-реактивного белка и измерением концентраций аполипопротеинов В и А. С-реактивного белка и измерением концентраций аполипопротеинов В и А.

64 Гипергликемия делает «хороший» Х-ЛПВП «плохим» Незрелые частицы Х-ЛПВП – акцепторы свободного (неэтерифицированного) ХС Св-ХС на поверхности Х-ЛПВП этерифицируется за счет лецитин-холестерин-ацетилтрансферазы (ЛХАТ), кофактор – Аполипопротеин А-1 Образованные эфиры ХС перемещаются с поверхности Х-ЛПВП внутрь, освобождая место для свободного ХС. При высоких уровнях HbA1c Апо А-1 гликозилирован, что снижает активность ЛХАТ и, тем самым, обратный транспорт ХС Nakhjavani M et al. Diabetes Res Clin Pract. 2008;81(1):38-41, Апо А-1 ЛХАТ

65 Свободный (неэтерифицированный) холестерин Новый маркер нарушения обратного транспорта холестерина при СД Характеризует нарушение функции Х-ЛПВП независимо от его концентрации

66 Свободный холестерин Free Cholesterol FS Определяет свободный(неэтерифицированный) холестерин Повышение свободного холестерина – фактор риска развития атеросклероза, связанного с СД 2 и вызываемого нарушением обратного транспорта холестерина Ферментативный фотометрический тест, конечная точка Ферментативный фотометрический тест, конечная точка Монореактив Монореактив Жидкий стабильный реагент Жидкий стабильный реагент Чувствительность – 0.9 мг/дл (0.023 ммоль/л) Чувствительность – 0.9 мг/дл (0.023 ммоль/л) Линейность - до 400 мг/дл (10.3 ммоль/л ). Линейность - до 400 мг/дл (10.3 ммоль/л ).

67 Гликозилированный гемоглобин oneHbA1c FS Набор реагентов для количественного фотометрического определения HbA1c в цельной крови – венозной и капиллярной Одностадийный иммунотурбидиметрический тест Одностадийный иммунотурбидиметрический тест - с сенсибилизацией латексными частицами, - с прямым определением HbA1c, - без измерения общего гемоглобина! Для полуавтоматических и автоматических биохимических анализаторов. Диапазон измеряемых концентраций %. Линейность в диапазоне 3 – 15% Широкий набор специфических калибраторов и контрольных сывороток Готовый к употреблению гемолизирующий раствор.

68 Innova Star – фотометр для диабетического профиля HbA1c, гемоглобин, глюкоза – в одной пробе Время анализа НbА1с – 8 мин, глюкозы – 2 мин, гемоглобина – 0,5 мин. Диапазон измерения: НbА1с – 4–15%, глюкоза – 0,6–50,0 ммоль/л, гемоглобин – 1,9–19 ммоль/л (3,0–30 г/дл). Точность измерения: НbА1с – 2,0%, глюкоза – 1,5%, гемоглобин – 2,0%. СКОРО!

69 HbA1c-Check-1 Гликогемоглобин Быстрый количественный иммунохроматографический тест для экспресс-анализатора Easy Reader VEDA.LAB., Франция Диапазон определения – 3-15% Цельная кровь Время определения 15 мин Для скринига и мониторинга СД

70 The DIAKON Web-Site

71 ДИАКОН Мы работаем больше, чтобы вы сомневалисьменьше diagnostics.ru diagnostics.ru , Пущино, МО, пр. Науки 5. Тел.: (495) ; Тел\факс: (495) , Москва, Внутренний проезд, д. 8, строение 9, Тел.: (495) , Тел\факс: (495)

72 Спасибо за внимание Спасибо за внимание