Сравнительное исследование минимальной остаточной болезни в периферической крови и костном мозге больных с В-клеточным хроническим лимфолейкозом ГБОУ ДПО РМАПО Минздравсоцразвития России Кафедра клинической лабораторной диагностики Д.Г. Кисиличина, Е.В. Наумова, М.Е. Почтарь, С.А. Луговская, Е.А. Никитин* * ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России Москва 2011

Время, мес. Moreton et al Общая выживаемость Полная ремиссия МОБ - Нет ответа Частичная ремиссия Полная ремиссия МОБ + Минимальная остаточная болезнь (МОБ) – состояние, обусловливающее развитие рецидива, связанное с сохранением опухолевых клеток в крайне низких концентрациях, ниже предела чувствительности морфологических методов. Значение МОБ в прогнозе выживаемости

Оценка МОБ методом проточной цитофлюориметрии Стандартизованная панель МКА (Rawstron et al., 2007) + CD45 в каждую пробирку! FITCPEECDPC5PC7 1sIgκsIgλCD45CD19CD5 2CD3CD14CD45CD19CD5 3CD38CD20CD45CD19CD5 4CD22CD81CD45CD19CD5 5CD43CD79bCD45CD19CD5 FITCPEPC5PC7APCAPC-Cy7 1sIgκsIgλCD20CD19CD5CD45 2CD3CD81CD5CD19CD22CD45 3CD43CD38CD5CD19CD79bCD45 6-цветная панель Проточный цитофлюориметр FC500 (Beckman Coulter, США) 5-цветная панель Проточный цитофлюориметр FACSCantoII (Becton Dickinson, США) Многоцветная проточная цитофлюориметрия: Согласующиеся с АС-ПЦР данные Выполнимость в течение 1 рабочего дня Меньшая по сравнению с АС-ПЦР себестоимость исследования Не требуется материал до лечения

Стратегия последовательного гейтирования 6-цветный анализ Условия: Анализ не менее событий для каждой пробирки (чувствительность ). Абсолютный порог = 50 событий в регионе соответствующих характеристик; Уровень контаминации < абсолютного порога; U = = = VS U

Оценка МОБ в крови и КМ после 6 циклов FCR Материал исследования – кровь и костный мозг с К 3 EDTA. 57 больных с В-ХЛЛ Корреляция по Спирмену R = 0,96 Согласующиеся по МОБ-статусу данные в 42 (74%) случаев

Случай Сравнение уровня МОБ в крови и КМ % МОБ в КМ > % МОБ в крови (Me = 10): МОБ + Костный мозг Кровь МОБ - МОБ + МОБ

Алгоритм финальной оценки МОБ Определение МОБ в крови Клетки ХЛЛ 0,01%Клетки ХЛЛ < 0,01% Ответ частичной ремиссии Исследование костного мозга Клетки ХЛЛ < 0,01%Клетки ХЛЛ > 0,01% Клинически полная ремиссия Полная иммунофенотипическая ремиссия

Промежуточная оценка - после 2-3 циклов FCR Финальная оценка - после 6 циклов FCR Исследование МОБ в динамике 6 FCR МОБ- 6 FCR МОБ+ N3 FCR, % клеток В-ХЛЛ От WBC Me (диапазон) 6 FCR, % клеток В-ХЛЛ От WBC Me (диапазон) 290,01 (0 – 4,83)0 84,1 (0,1 – 24)1,51% (0,01 до 13,8)

Выводы Количественную оценку остаточных клеток В-ХЛЛ по окончанию терапии возможно проводить по периферической крови. Анализ МОБ в КМ необходим в случаях, когда остаточный клон не выявляется в крови. Мониторирование МОБ во время терапии выявляет динамику элиминации опухолевых клеток и позволяет прогнозировать достижение МОБ-негативной ремиссии. Цель лечения В-ХЛЛ - достижение полной клинико- гематологической ремиссии с эрадикацией МОБ. При финальной оценке МОБ после лечения с использованием препаратов МКА рекомендуется исследовать КМ.

Спасибо за внимание